一株耐镉假单胞杆菌的分离鉴定及其对镉的吸附研究

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1、一株耐镉假单胞杆菌的分离鉴定及其对镉的吸附研究摘要:从污染水域筛选获得了1株可在含有100mg/LCd2+的培养基上生长的耐镉菌株Cd-tl。通过形态观察、16SrDNA扩增及系统发育分析，将其初步鉴定为嗜碱性假单胞菌(Pseudomonasalcaliphila)。不同Cd2+浓度处理下菌株的生长曲线显示，各浓度Cd2+处理延缓了该菌株的生长时期。进一步利用扫描电镜、能谱分析与质粒消除试验发现，该菌株的Cd2+耐受性与其形态适应性变化和C、N、O、P、Na、K、Ca等元素含量的改变相关，并决定于质粒上的镉耐受基因。关键词：镉污染；假单胞杆菌；1

2、6SrDNA;能谱分析；扫描电子显微镜中图分类号：Q939.99文献标识码：A文章编号:0439-8114(2016)11-2765-04DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.014有色金属采选和冶炼、镉化合物工业、电池制造业等排放的含镉废水使中国部分地区耕地土壤受到不同程度的镉污染［1，2］，而这些土壤中的镉会通过食物链向人类转移并在肝脏蓄积［3,4］。镉在与含巯基、一株耐镉假单胞杆菌的分离鉴定及其对镉的吸附研究摘要:从污染水域筛选获得了1株可在含有100mg/LCd2+的培养基上生长的耐镉菌株Cd

3、-tl。通过形态观察、16SrDNA扩增及系统发育分析，将其初步鉴定为嗜碱性假单胞菌(Pseudomonasalcaliphila)。不同Cd2+浓度处理下菌株的生长曲线显示，各浓度Cd2+处理延缓了该菌株的生长时期。进一步利用扫描电镜、能谱分析与质粒消除试验发现，该菌株的Cd2+耐受性与其形态适应性变化和C、N、O、P、Na、K、Ca等元素含量的改变相关，并决定于质粒上的镉耐受基因。关键词：镉污染；假单胞杆菌；16SrDNA;能谱分析；扫描电子显微镜中图分类号：Q939.99文献标识码：A文章编号:0439-8114(2016)11-2765-

4、04DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.014有色金属采选和冶炼、镉化合物工业、电池制造业等排放的含镉废水使中国部分地区耕地土壤受到不同程度的镉污染［1，2］，而这些土壤中的镉会通过食物链向人类转移并在肝脏蓄积［3,4］。镉在与含巯基、一株耐镉假单胞杆菌的分离鉴定及其对镉的吸附研究摘要:从污染水域筛选获得了1株可在含有100mg/LCd2+的培养基上生长的耐镉菌株Cd-tl。通过形态观察、16SrDNA扩增及系统发育分析，将其初步鉴定为嗜碱性假单胞菌(Pseudomonasalcaliphila)。

5、不同Cd2+浓度处理下菌株的生长曲线显示，各浓度Cd2+处理延缓了该菌株的生长时期。进一步利用扫描电镜、能谱分析与质粒消除试验发现，该菌株的Cd2+耐受性与其形态适应性变化和C、N、O、P、Na、K、Ca等元素含量的改变相关，并决定于质粒上的镉耐受基因。关键词：镉污染；假单胞杆菌；16SrDNA;能谱分析；扫描电子显微镜中图分类号：Q939.99文献标识码：A文章编号:0439-8114(2016)11-2765-04DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.014有色金属采选和冶炼、镉化合物工业、电池制

6、造业等排放的含镉废水使中国部分地区耕地土壤受到不同程度的镉污染［1，2］，而这些土壤中的镉会通过食物链向人类转移并在肝脏蓄积［3,4］。镉在与含巯基、羟基的蛋白质分子结合后，会通过血液循环转移到肾脏，引起肝、肾等内脏器官及血液循环系统损伤，并致癌和致突变［5,6］。因此，镉污染的治理和修复具有十分重要的现实意义。但是，用于重金属污染治理的传统物理和化学方法费用高、能耗大，并易造成二次污染。而生物修复法作为新兴的重金属修复技术备受关注。其中，微生物特别是细菌以其数量众多、代谢活动旺盛在重金属的生物吸附中具有较好的应用前景［7］。本研宄从镉污染水域中

7、分离获得1株耐镉菌株Cd-tl,在利用形态观察结合16SrDNA序列分析了其系统发育地位后，对不同Cd2+浓度处理下的菌株生长状况、形态特征及元素的积累状况进行了检测和观察，并对镉耐受基因进行了初步的定位，以期为进一步的基因克隆及构建高效耐镉菌株奠定基础。1材料与方法1.1株的筛选试验水样于2011年8月取自渭河杨凌段。样品接种于含30mg/LCdC12的牛肉膏蛋白胨固体培养基上（牛肉膏0.5%,蛋白胨1.0%,NaCl1.5%,琼脂粉2%，pH7.2），以平板划线法分离菌株，培养获得单菌落。将其命名为Cd-tl，并接种于牛肉膏蛋白胨斜面培养基上

8、保存、备用。1.2菌株的16SrDNA鉴定依据文献［8］提取菌株Cd-tl的基因组DNA，利用1492R：5通用引物27F:5'-AGA