igfbp3、caspase3在小鼠白念珠菌阴道炎模型黏膜组织中的表达

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1、IGFBP3、caspase3在小鼠白念珠菌阴道炎模型黏膜组织中的表达：陈嵘，樊翌明，林映萍，黎兆军，吴志华【摘要】目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP3）、半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)在ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型中阴道黏膜局部的表达及其临床意义。方法构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型，运用荧光实时定量PCR及免疫组化检测感染组与正常组中IGFBP3、caspase3表达的差异。结果构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型成功，感染组阴道组织中见大量念珠菌丝及炎症细胞浸润；IGFBP3、caspase3在感染组中较正常组高

2、表达（Ｐ<0.01）且两者表达呈正相关(rs=0.683，Ｐ<0.01)。结论IGFBP3、caspase3在感染组中高表达可能与念珠菌下调阴道黏膜免疫并致病有关。【关键词】caspase3；IGFBP3；白念珠菌；动物模型　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofinsulinlikegrourinevaginalmucosaentalcandidiasis.MethodsTheICRmurinevaginalmucosaodel.ThelevelofIGFBP3andc

3、aspase3inmurinevaginalmucosafromthecandidiasisgroupandthenormalcontrolgroupinedbyrealtimequantitativefluorescentPCRandimmunohistochemistry,respectively.ResultsInthecandidiasisgroup,thevaginalmucosaoniliamyceliaandinflammatorycells.TheexpressionofIGFBP3andcaspase3odelissucce

4、ssfullyconstructed.TheoverexpressionofIGFBP3andcaspase3intheexperimentalcandidiasismayplayaroleinthepathogenesisofcandidalvaginitisthroughreducingtheimmunityofthevaginalmucosa.　　Keyurinemodel　　念珠菌性阴道炎(monilialvaginitis)绝大部分感染由白念珠菌引起，是一种常见的阴道黏膜真菌感染性疾病。表现为外阴瘙痒和阴道分泌物增多、阴道疼痛、灼热，

5、可通过性接触传染。约75％育龄妇女在一生中至少发生一次念珠菌性阴道炎，其中约半数病例有再次发作，5%病例发展为复发性念珠菌性阴道炎［1］。此病的免疫学发病机制尚未阐明，最近研究发现:外周血中产生的细胞免疫可能并不是小鼠阴道黏膜主要的防御机制,而更多的是通过局部细胞免疫发挥机体的防御机制，因此黏膜免疫已成为该病研究热点［2］。有研究表明胰岛素生长因子（IGFⅠ）不仅在机体生长发育中充当重要角色，而且可激活体内淋巴细胞、NK细胞、巨噬细胞对免疫调节及抑制凋亡起重要作用。胰岛素生长因子结合蛋白3（IGFBP3）是一种新发现的分泌蛋白，它在组织中广泛存在

6、，并可结合IGFⅠ进而对免疫起调控作用［3］。但IGFBP3、caspase3及其IGFIGFBP轴在念珠菌阴道炎中的表达及分子调控途径尚未清楚。因此，有必要对上述细胞因子在小鼠白念珠菌阴道炎模型中阴道黏膜免疫的作用进行深入研究，进而阐明念珠菌性阴道炎的发病机制，为本病的有效防治提供理论依据。　　1材料和方法　　1.1念珠菌的培养及实验动物　　菌株为标准白念珠菌(No.00270)株，实验动物为健康清洁级雌性ICR小鼠30只，饲料为标准颗粒饲料（均由广东学院实验动物中心提供）。鼠龄9～11周,体质量(26±4)g，随机分为感染组（A组,15只

7、）及正常对照组（B组,15只），饲养于清洁级实验动物环境。培养基为改良沙堡琼脂培养基平皿。真菌悬液的制备:参照文献［4］,将标准菌株接种于含1%蛋白胨和0.1%葡萄糖的液基中,25℃水浴振荡培养16～18h(见图1a)。显微镜下计数，使菌悬液密度为5×106个孢子/mL。　　1.2ICR小鼠白念珠阴道炎模型的建立　　A组为雌激素化组，每只ICR小鼠在接种前6d开始后腿皮下注射含有0.1mg苯甲酸雌二醇油剂0.1mL,每2d注射1次。B组于相同部位注射植物油0.1mL,次数同A组。将真菌悬液10μL(即白念珠菌孢子接种量为5×104个)在接种日注入A组

8、小鼠的阴道内,每只小鼠接种后倒置5min，B组用生理盐水代替。接种后的第2、4、7、14天为检测日,每个检测