pact分子在肝癌中的表达及意义

《pact分子在肝癌中的表达及意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、PACT分子在肝癌中的表达及意义【】R735.7【】A【】1672－3783(2011)11－0241－01　　　　【】目的：肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，而且其预后很差。PACT是新近发现的一个p53蛋白负调控因子，与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本文旨在探讨PACT分子在肝癌中的表达。方法：用免疫组化技术分析PACT在92例肝癌组织、15正常肝组织、77例肝炎和肝硬化组织中的表达，分析其与多项临床相关指标之间的相关性。结果：PACT在肝癌组织中呈高表达，而在良性肝病组织和正常肝组织的表达明显减弱。PACT分子的表达与组织学分

2、级、临床分期及有无淋巴结转移无明显相关。结论：PACT在肝癌组织中的表达显著上调，提示其可能具有促进肝癌发生的作用。　　【关键词】PACT；肝癌；免疫组化　　ExpressionofPACTinhepatocellularcarcinomaanditssignificance　　RuizhenShi1QinMiao2　　【Abstract】Objective:HepatocellularcarcinomaisthemostmonmalignanttumorsinChina，andcarriesapoorprognosis.PACT

3、isanovelnegativeregulatorofp53foundrecently,anditsexpressionisassociatedanytumors.Theaimofthisstudya.Methods:Immunohistochemistryedtoinvestigatetheexpressionof92hepatocellularcarcinomatissues,15normallivertissuesand77hepatitisandcirrhosissamples.yc、HBx、PTEN等也相继被报导与肝癌细

4、胞的转化、生长及侵袭转移密切相关［8-10］。虽然人们对上述基因进行了一定的研究，但这些还不足以完全解释肝癌发生、发展的机理。因此，鉴定、研究新的肝癌差异表达基因就显得尤为迫切，将有助于加深对肝癌发生、发展分子机制的认识，同时又可为肝癌患者的早期诊断、预后判断，以及治疗提供新的标志物和靶标。　　p53蛋白是生物体内重要的抑癌基因，在细胞的增殖、分化、凋亡等方面发挥十分重要的作用。p53蛋白和水平在细胞内受到复杂而精细的调控，多种分子参与p53蛋白活性的调控，目前公认为多种翻译后修饰在其活性调控中发挥了非常重要的作用，包括磷酸化作用

5、、乙酰化作用、泛素化作用等。这其中，HDM2是研究的最为清楚的p53负调控分子，它通过与p53分子的相互作用促进其多泛素化，进而导致p53蛋白的水解。PACT（p53associatedcellularprotein-testesderived）基因是一个新近鉴定的p53蛋白负调控分子，最初采用酵母双杂交的手段以p53为探针从小鼠睾丸cDNA文库筛选而来，其N端含有一个锌指结构以及一个保守的锌指环结构域。该基因定位在16号染色体(16p12)，具有泛素连接酶活性，在细胞内影响HDM2-p53之间的结合，通过HDM2促进p53的多泛

6、素化和水解［11］。近年来研究发现，PACT蛋白在食道癌组织中表达显著上调，可作为肿瘤免疫治疗的潜在靶标［12］。目前，PACT在肝癌中表达的研究国内尚未见报道，本研究旨在通过免疫组化技术研究其在肝癌组织、良性肝病组织和正常肝组织中的表达及分布，同时结合相关临床资料探讨其表达与肝癌发生发展的关系，以期为寻找新的肝癌治疗靶标提供实验和理论依据。　　1资料和方法　　1.1组织标本标本均取自上海芯超生物科技有限公司组织芯片（OD-CT-DgLiv01-011），包括92例肝癌组织、15例正常肝组织和77例肝炎和肝硬化组织。　　1.2免疫

7、组化山羊抗人PACT多克隆抗体购自SantaCruz公司。标本常规脱蜡、脱水、消除内源性过氧化氢酶后，采用微波修复法修复10min，血清封闭后，滴加1:200稀释的PACT抗体，4℃过夜（对照用PBS替代）。PBS洗3次，各5min，滴加HRP标记的驴抗山羊二抗，37℃孵育30min。PBS洗3次，各5min，DAB显色，镜下掌握显色程度，水洗终止染色。苏木精复染1min，盐酸酒精分化，梯度酒精脱水，二甲苯透明，封片，镜检。结果判断：标本中阳性细胞百分比>20%视为阳性。　　1.3统计学分析应用SPSS13.0统计软件，各组间PA

8、CT表达差异的分析采用χ2检验或Fisher精确概率法，p<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　结果显示，92例肝癌组织中80例呈PACT蛋白阳性表达，阳性率为86.9%。15正常肝组织、77例肝炎和肝硬化组织中3例呈PACT蛋白阳性表达，阳