外用复方中药对兔耳增生性瘢痕挛缩的抑制作用.doc

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1、外用复方中药对兔耳增生性瘢痕挛缩的抑制作用作者：牛占国刘迗恩王润秀高雁夏炜易成刚刘丹【摘要】目的观察一种防治瘢痕的外用复方中药瘢痕膏对兔耳增生性瘢痕挛缩的抑制作用。方法选用8只新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕动物模型。实验组于创面上皮化时即开始用瘢痕膏，并设立空白对照。用药后第30天及第100天观察两组瘢痕组织的外观形态，应用ABC免疫组织化学法染色测a平滑肌肌动蛋白，利用计算机辅助病理象分析系统测定并纪录每张切片阳性反应区域的平均面积百分比和光密度值。结果实验组瘢痕反应较轻，免疫组化染色瘢痕膏组兔耳瘢痕组织aSMA平均面积百分比和光密度值明显低于对照组。结论用复方中药对兔耳增生性瘢痕挛缩有

2、抑制作用，对增生性瘢痕有防治作用。【关键词】增生性瘢痕疾病模型a平滑肌肌动蛋白Abstract：Objectictofacompoundtradiineointmentontheprrshypertrophicscaralandrabbitswereseanimals.TheointmeneexperimentalgroupveToobservetheeffetionalChinesemediceventionofrabbitea.MethodsEightNewZelectedasexperimenttbegantobeusedinthwhenthewoundhealedcompletely

3、whilenoontrols.RespectiveOOdaystheappearancthingwasdonetothecly,after30daysand1eofscartissuemorphologywereobserved,andtheasmoothmuscleactin(aSMA)wastestedbyimmunohistochemicalstaining.Computer-aidedimagesedtodetermineandgeofpositiveregionanalysissystemwasurecordthepercentaandtheopticaldensityineach

4、slice.ResuItsThepercentageofaSMApositiveregionandtheopticaldensityintheexperimentalgrouparebothsignificantlylowerthanthatinthecontrolgroup(PKeywords：Hypertrophicscar；Diseasemodel；a-smoothmuscleactin增生性瘢痕是创伤过度愈合的结果，后期的瘢痕挛缩严重影响了肢体功能。防治增生性瘢痕的方法很多，如外科手术、加压、放射、激光、冷冻和药物瘢痕内注射等疗法，但疗效均不十分理想。传统中医药对瘢痕的治疗积累了丰富

5、的经验，且有较显著的疗效。本课题组根据验方进行改进的瘢痕膏，通过应用于兔耳腹面瘢痕模型，观察该药对兔耳增生性瘢痕挛缩的影响，探讨瘢痕膏对增生性瘢痕防治作用的可能机制，为其临床使用提供理论和实践依据。1器材动物实验在中国人民解放军第四军医大学西京医院整形外科中心实验室完成。选用新西兰大耳白兔8只，清洁级，兔龄3〜4个月，雌雄不拘，体重kg，由中国人民解放军第四军医大学实验动物中心提供［许可证号：SCXK2002-005］。饲养室温度18〜22°C，相对湿度60%〜75%，人工混合饲料喂养。药品及试剂瘢痕膏，一种外用复方中药制剂，由广西医科大学药厂提供。其主要成分为丹参酮、积雪苷、黄岑苷、甘草酸

6、、苦参碱等，按3:3：2：2：1的比例加基质制作而成。aSMA鼠抗人单克隆抗体，北京中杉金桥技术有限公司提供，货号ZM003。ABC试剂，武汉博士德生物技术有限公司提供，货号SA1020。HRPDAB鹿物显色试剂盒，北京HANGEN技术有限公司提供，货号PA109。2方法造模方法肌注速眠新将兔麻醉后，于兔耳腹侧沿长轴制作直径为lcm的圆形创—7*7每耳6处，每两处间间隔至少2cm，完整切除全层皮肤，去除软骨膜，保留软骨，创面不予任何处理，任其自然愈合。21d左右创面上皮化，无一创面感染不愈或愈合不良。分组干预随机将实验动物分别设为瘢痕膏组和对照组，每组8只兔耳，48个创面。瘢痕膏组于创面完全

7、上皮化时即20d后开始用药，将瘢痕膏涂在瘢痕部位，并轻揉直到药物吸收，3次/d，连续用药100d，分别于用药后第30天，第100天取材，每次每只兔耳随机取3处。观察项目大体观察观察对比用药后瘢痕膏组与对照组瘢痕组织颜色、质地的变化。对比分析实验组与对照组瘢痕发生率及外观形态的差异。病理切片将所取标本用4%多聚甲醛固定48h，石蜡包埋切片，每个标本切两张，分别进行HE染色以及ABC法免疫组织化学染色。镜下观察胶