田基黄对内毒素血症引起的肝损伤的防治作用

田基黄对内毒素血症引起的肝损伤的防治作用

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1、田基黄对内毒素血症引起的肝损伤的防治作用郑竹美1叶青1邵文霞2陈学军1(通讯作者)潘岩享1(1浙江大学医学院附属儿童医院检验科浙江杭州310003;2杭州市第一人民医院检验科310006)【摘要】目的探讨田基黄对内毒素血症引起的肝损伤的防治作用。方法对Wister大鼠用不同剂量的田基黄水煎剂和联苯双酯进行灌胃,1次/d,连续7d。于最后一次给药1小时后,尾静脉注射内毒素(LPS)5mg/kg。1次/d,连续7d。于最后一次给药1小时后,空白组尾静脉注射生理盐水,余各组尾静脉注射LPS5mg/kg。最后用药24小时后取材观察肝组织病理学变化和生化指标变化。结果㈩基黄能

2、减轻LPS引起肝组织病理损伤并能明显抑制LPS引起的小鼠血清ALT活性的升高,抑制NO,TNF-α和IL-6的过量分泌。结论田基黄对内毒素引起的肝损伤有显著的防治作用。【关键词】田基黄内毒素肝损伤【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)09-0038-02H基黄原名地耳草,系藤黄科金丝桃属楨物地耳草的干燥全草,含有黄酮类、内酯类、色原烯类、缩二氨酸衍生物、咕吨酮类、间环己三醇衍生物等化合物,具有抑菌、抗病毒、抑制癌细胞、增强免疫、抗氧化、保肝护肝等多种药理学功效,但其对内毒素性肝损伤的保护和治疗机制尚未阐明。木课题

3、采用大鼠尾静脉注射内毒素诱导建立起急性肝损伤的大鼠模型,运用免疫学和病理学技术研究和监测大鼠模型中血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平,肝组织内抗炎症介质的和致炎症介质的释放,探讨W基黄在内毒素引起的肝损伤的防治方面的价值。1材料1.1动物Wistar大鼠,SPF级,质量200±20g120只,雌雄各半,由浙江中医药大学动物实验中心提供。1.2药物田基黄用冷水浸泡,煎煮2次,过滤,合并滤液,浓缩成含药2g/ml的水煎液,用前配成0.5、1.0、2.0g/ml溶液;将联苯双酯(BPD)滴丸配制成20mg/ml的溶液。1.3试剂田基黄购自杭州胡庆余堂国药号

4、,并经鉴定为藤黄科植物田基黄的全草;生理盐水注射液,杭州民生药业集闭冇限公司产品,批号110103A07;AST,ALT,NO测试药盒,南京建成生物工程研究所产品;TNF-α、IL-6试剂盒,解放军总医院科技开发中心放免所产品。1.4仪器LXP2B低速大容量离心机、DDL-5低速冷冻离心机,上海安亭科学仪器厂产品;HH.W21>600电热恒温水浴箱,上海医疗器械厂产品;AB204-N电子天平,梅特勒公司产品;BT224半自动生化分析仪,意大利仪器;FJ-2008PSg放射免疫计数器,西安核仪器厂产品;BH-2系统显微镜,OLYMPUS公司产品。2方

5、法2.1建模[1]田基黄用冷水浸泡,煎煮2次,过滤,合并滤液,浓缩成含药2g/ml的水煎液,用前配成0.5、1.0、2.0g/ml溶液,各以低、中、高剂量标之;将联苯双酯(BPD)滴丸配制成20mg/ml的溶液分别给LPS+田基黄各组和西药对照组灌胃,1次/d,连续7d。于最后一次给药1小时后,空ft组尾静脉注射生理盐水,余各组尾静脉注射LPS5mg/kg。2.2动物分组和给药选择健康大鼠,质量200±20g120只,随机分成6组,每组20只,雌雄各半:内毒素血症(LPS)组、生理盐水对照组、LPS+低剂量田基黄组、LPS+中剂量田基黄组、LPS+高剂

6、量田基黄组和西药对照组。2.3检测指标与方法:最后用药24后,用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,经下腔静脉采血;剖开腹腔,暴露肝脏,剪取小块右叶中央部位肝脏组织,约0.5cmx0.5cmx0.5cm,迅速投入10%福尔马林溶液中固定。获得的样本分别进行如下的观察:①各指标分别按相关的试剂盒操作说明书进行。②常规切片,HE染色,光镜下作组织病理学检查。2.4统计学方法实验数据均以均数±标准差(x-±s)表示,组间比较采用t检验。3结果3.1各组大鼠一般情况正常对照组大鼠处死前全部存活,精神饮食、活动均正常。LPS组大鼠处死前大鼠出现精神萎靡,进

7、食减少和反应迟钝。联苯双酯组和田基黄组人鼠一般状态较好,人便偏稀,未出现死亡及中毒性鼓肠发生。3.2血清肝功能的变化与正常对照组相比,LPS模型组小鼠血清转氨酶明显升高(P<0.05);联苯双酯组和田基黄组可显著降低LPS肝损伤小鼠血中ALT水平(P<0.05);低中剂量田基黄组与联苯双酯对照组结果相似(P>0.05),高剂量田基黄组疗效最好。见表1。3.3肝组织病理学检查各组小鼠于肝大叶相同部位取材,10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋、切片,HE染色,光镜下观察。正常对照组大鼠肝细胞排列整齐,肝窦结构清楚;LPS模型组以脂肪变性为主,可见肝细胞

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