生物下游技术

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1、第一章绪论1.什么是下游技术？所用原料及产品的特性？对于由生物界自然产生的，由微生物菌体发酵的，动植物细胞组织培养的，酶反应等耕种生物工业生产过程获得的生物原料，经提取分离加工并精致目的成分，最终使其成为产品的技术，通常称为下游技术。2.生物产品与普通化工产品分离过程有何不同？a传统生化产品都力小分子，理化性能已知，放大比较有根据，基因工程产品都是大分子，数据缺乏，放大多凭经验。B基因工程产品多处于细胞内，提取前需要细胞破碎。而且发酵液产物浓度也较稀，杂志又多，加上大分子比较不稳定，故提取较困难，常需要利用商分辨力的精制方法，如色层分离等。

2、3.下游技术的一般工艺过程及特点？流程：a发酵液的预处理和固液分离b初步纯化c高度纯化d成品加工特点：A发酵液成分复杂b培养液产物浓度低c欲提取的生物物质通常很不稳定，d弹性要求大4.生物技术下游加工过程的重要性？5.初步纯化与高度纯化分离效果有何不同？6.设计生物产品的分离工艺应考虑哪些因素？第二章发酵液的预处理和固液分离方法1.发酵液预处理的方法有哪些？A在活性物质稳定性的范围内，通过酸化，加热，以降低发酵液的粘度。B加入絮凝剂，使细胞或者大分子凝结成较大的颗粒。2.絮凝和凝聚的定义和区别。常用的絮凝剂有哪些？凝聚：在巾性盐的作川下，由

3、于双电层排斥电位的降低，而使胶体体系不稳定的现象。絮凝:在某些高分子絮凝剂存在下，基于架桥作用，使胶粒形成粗大的絮凝团的过程，是一种以物理的集合为主的过程。絮凝剂：a聚W烯酰胺类衍生物b聚苯乙烯类衍生物c无机高分子聚合物絮凝剂，如聚合铝盐d天然有机尚分子絮凝剂：多聚糖类胶黏剂，海藻酸钠，明胶,骨胶。4.影响絮凝效果的因素有哪些？A絮凝剂浓度b絮凝剂分子量c絮凝剂类型d溶液的phe搅拌速度和吋间f助凝剂5.发酵液分离的主要方法有哪些？a商价无机离子的去除方法：去除钙离子：草酸法。去除镁离子：三聚磷酸钠。除去铁离子：加入黄血盐。B杂蛋白的去除方

4、法：等电点法，热变性法，c凝聚和絮凝技术。4.分离和过滤的主要设备有哪些？1，板框压滤机2,鼓式真空过滤机3,离心分离机4,错流过滤机第三章微生物细胞的破碎1.微生物细胞常用的破碎方法有哪些？一机械法：（珠磨法，高压匀浆法，超声破碎法，X-press法）二非机械法（酶溶法，化学渗透法，渗透压法，冻结融化法，干燥法）2.超声波破碎时，影响生物产品收率的因素有哪些？1温度上升：当气泡破裂时，绝大部分释放出来的能以热的形式为液体说吸收，为了避免高温，悬浮液应先冷却到0—5度，并且还应用冷却液连续通入容器夹套，即短期的声波破碎与短期的冷却交替作业，

5、声波破碎

6、冷却的时间比率称为“负载因素”。2化学效应：超声处理会引起诸如生成游离基这样的化学效应，他可能对某些耑要的分子带來破坏性影响，但对破碎细胞毫无影响：可通过添加游离基清除剂如胱氨酸或谷胱甘肽，或者用M气预吹细胞悬浮液来缓和。3.什么是破碎率？其测定方法有哪些？破碎率：被破碎细胞的数量占原來细胞数量的百分比数。方法：1直接测定法2测定释放的蛋白质量或酶活力3测定导电率第四章沉淀法1.盐析的作用机理是什么？蛋白质胶体稳定的原因：电荷和水化膜。蛋白质-COOH-NH2和-OH都是亲水基团，与水形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成MOOnm

7、的亲水胶体，削弱了蛋白质分子之间的作川力，极性基团越多，水化层越厚，蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大，因而溶解度也越大。2.什么是亲和沉淀，其主要操作步骤是什么？亲和沉淀：利用蛋白质与特定分子的专一性反应，选择性极强的分离技术，其沉淀原理不是依据蛋白质洛解度的差异，而是依据“吸附”有特殊蛋白质的聚合物的溶解度的大小。步骤：1目标蛋白质与亲和配位体络合形成沉淀，2所得沉淀物用一种适当的缓冲溶液进行洗涤，洗去可能存在的杂志3用适当的试剂将目标蛋白质从配位体中离解山来。3.沉淀法分离蛋白质的特点是什么？1在生产的前期就可使原料液体积很快的减小

8、10-50倍，从而简化生产工艺，降低生产费用2使中间产物保持在一个中性温和的环境3w极早的将n标蛋白与溶液中得蛋白水解酶分离，避免蛋白质的降解，提高产物稳定性。4川蛋白质沉淀法作为色谱分离的前处理技术,可使色谱分离实用的限制因素降低到最少。1.用于蛋白质提取的沉淀方法有哪些？1盐析法2等电点沉淀法，3有机溶剂沉淀法4非离子型聚合物沉淀法5聚电解质沉淀法6金属离子沉淀法第五章膜分离过程1.名词解释：不对称膜、反渗透、超滤、微过滤、纳滤、毛细管流动模型、溶解一扩散模型、优先吸附•毛细孔流动模型、截断曲线、浓差极化、膜污染不对称膜：透过速度较大，

9、具不对称结构，表而为活性层，孔径lOOnm左右，厚0.2-0.5微米，起过滤作用，下面为50-100微米的支撑层，孔径0.1-1,0微米。起支持活性层的作用。反渗透，超滤，微过滤