色谱技术实验2014

《色谱技术实验2014》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、色谱技术实验实验一中药提取液HPLC梯度洗脱条件的优化实验二中药挥发油GC程序升温分析条件的优化…•实验三混合染料TLC分离条件的三角形优化实验四溶剂选择性对屮药提取液HPLC分离结果的影响实验一中药提取液HPLC梯度洗脱条件的优化一、目的1.掌握高效液相色谱分析中，梯度洗脱条件的决定因素。2.熟悉HPLC梯度洗脱条件优化的思路。二、提要对于成分杂的中药提取液,测定其HPLC指纹图谱一般采用梯度洗脱的方法。而梯度洗脱条件主要受梯度范围（梯度起始浓度和终止浓度）、梯度斜度及强溶剂种类的影响。其中梯度范围和梯度

2、斜度决定流动相的洗脱强度，川‘以通过调整梯度范围和梯度斜度，使样品组分的k’值符合l

3、样品分离度及分析吋间的影响。二、提要对于宽沸程的样品分析，采用程序升温（单阶程序升温、多阶程序升温），在分析过程中柱温随时间而变化，通常是升高柱温。它的优点是减少分析时间。程序升温条件选择是确定初始温度、初始时间、升温速率、终止温度、终止时间。三、仪器与试剂四、操作步骤五、思考题程序升温的初始温度、终止温度及升温速率的对分离度会有什么影响？实验三混合染料TLC分离条件的三角形优化—、目的1.掌握溶剂极性参数与展开剂洗脱强度之间的关系；2.掌握溶剂的三角形分组对展开剂选择性的影响；3.熟悉三角形优化法在TLC

4、分离条件选择屮的应用。二、提要溶剂与溶质分子之间主要考虑其偶极作用力和氢键作用力，按它们的大小，即给出质子的能力、接受质子的能力、偶极矩的大小，把常用的溶剂分为8类。处于同一组的溶剂，在色谱分离中具有相似的选择性；在分组三角形中相差较远的组中的溶剂，其选择性相差较大。为改善选择性，要根据组分的性质，选择合适的溶剂;而利用多元溶剂，既可调节K值，乂可调节选择性。用统计方法可以帮助确定溶剂表4-1溶剂选择性分类表组别溶剂名称I脂肪族醚、三烷基胺II脂肪醇III毗啶衍生物、THE,酰胺（除甲酰胺外）、乙二醇醚、亚

5、砜IV乙二醇、苯甲醇、甲酰胺、乙酸VCH2C12、二氯乙烷VI酮、酯、腈、聚酯VII卤代芳氢、芳氢、芳香醚、硝基化合物VIII水、氯仿、间甲苯酚、氟烷醇表4-2常用溶剂的溶剂参数溶齐IJ溶剂参数P’所属组别正己烷0.1乙醚2.8I乙醇4.3II异丙醇3.9II正丁醇3.9II四氢呋喃4.0III乙酸6.0IV二氯甲烷3.1V丙酮5.1Via乙酸乙酯4.4Via乙腈5.8w苯2.7vn氯仿4.1Vlll三、仪器与试剂四、操作步骤图4-2溶剂系统三角形优化法各实验溶剂的组成①〜⑦为七个实验组的溶剂配比A/B/C

6、五、注意事项: