ABO血型鉴定标准操作程序

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1、月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_10页码：第-16-页，共16页检验科血库日常操作SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101SOP_10-1ABO血型鉴定标准操作程序一、目的：确保输血安全，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。二、适用范围：血型鉴定。三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：1原理：血清中常存在反应强的抗体，而红细胞上缺乏相应的抗原。许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原，以及分泌型的分泌液中存在着A、B、H物质。红细胞上的A/B/D抗原与抗B/A/D标准血清发生凝

2、集反应。ABO血型的分类及其与抗血清的反应：红细胞与抗血清反应表型红细胞上抗原血清中抗体抗A抗BO无抗A、抗B――AA抗B+―BB抗A―+ABA、B无++2试剂：A、B、O标准血清；A、B、O定型红细胞；生理盐水。3方法：3.1样本采集：真空抽血2ml至一次性抗凝管（EDTA－K2干粉）中，混匀后备用。3.2ABO血型盐水介质鉴定（试管法）：3.2.1制备患者3~5%的红细胞盐水悬液。3.2.2正定型：抗-A抗-B抗-A、B标准血清(ml)100100100受检者RBC悬液(ml)5050503.2.3反定型：AcBcOc定型红细胞(ml)5

3、05050受检者血清(ml)1001001003.2.4混匀。3.2.5以1000r/min离心1min。3.2.6取出试管，轻摇，使沉管底的红细胞浮起，认真观察有无溶血和/或凝集。编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四时间：20180101时间：20180101时间：20180101月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_10页码：第-16-页，共16页检验科血库日常操作SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：201801013.3ABO血型正反定型结果判断：分型血清+受检者红细胞受检者血清+试剂红细胞抗-A抗-B抗-

4、A、B受检者血型AcBcOc+–+A–+––++B+–––––O++–+++AB–––3.4正反定型不一致的原因：（1）技术和管理工作的错误①血样试管及玻片混淆②书写错误③红细胞过浓或过淡④未注意样品溶血现象⑤漏加试剂⑥未按试剂说明操作⑦试剂血清效价低、亲和力不强或污染/过期/失效⑧离心速度/温度改变（2）血清异常等其它原因①抗体：新生儿、老年人、白血病、肿瘤、免疫缺陷、骨髓移植、嵌合体双生子、异型输血交换、胎盘出血等引起的抗体改变。②红细胞抗原：亚型、血型物质过剩、类B等特殊物。③蛋白质或血浆：巨球蛋白、多发性骨髓瘤、恶质病、血浆扩容剂的应

5、用等。④其它：缗钱状排列、多凝集现象、冷凝集、额外凝集素、细菌污染等。（3）正反定型结果不一致的解决办法如发现AB0正反定型结果不一致，首先要重复作试验1次。严格执行操作规程．使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可解决明显的问题，对一些疑难问题必须进一步研究。初步的检查步骤包括：1.另从受检者采取1份新鲜血液标本，这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。2.将红细胞洗涤数次，配成5%盐水细胞悬液，用抗-A、抗-B、抗-A1,抗-A+B及抗-H做试验可以得到其它有用的信息。3.对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细

6、胞已被抗体致敏。编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四时间：20180101时间：20180101时间：20180101月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_10页码：第-16-页，共16页检验科血库日常操作SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：201801014.用A1、A2B、O红细胞及自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗-1，用O型(或ABO相合的)脐血红细胞检查。5.如试验未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min，用镜检核实。6.如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗-A或抗-B血清

7、作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB分泌型的人有用。7.如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水1滴，混和，往往可使缗钱现象消失。应注意不应先加盐水1滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免血清中抗体被稀释。8.如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：(1)观察细胞与抗-A及抗-B的凝集强度，与抗-A的反应要比与抗-B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。(2)用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中抗-B不凝集自身红细胞上的类B抗原。(3)检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，

8、可检出A物质而无B物质。(4)核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌感染有关。9.如发现多凝集现象，应考虑由遗传产生的Cad抗原活性；被细菌酶