建立变应性鼻炎的动物模型

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1、建立变应性鼻炎的动物模型1广西中医学院第一附属医院(南宁530023) 2广西中医学院(南宁530001)  关键词:变应性鼻炎;动物模型;实验研究doi:10.3969/j.issn.100328914.2010.02.026  :100328914(2010)202202242023基金项目:广西科技厅自然基金项目(No:桂科自0640151)  变应性鼻炎是呼吸道***反应的高发病和常见病,已成为严重影响人类健康的全球性疾病[1]。动物模型是研究人类疾病的重要工具,建立一种既能反映变应性鼻炎典型症状,又能反映相应的病理生理改变的动物模型,是十分实

2、用和必要的。通过动物疾病模型研究人类疾病的发生、发展规律,为人类疾病的预防、治疗提供理论依据。理想的疾病模型应该不仅能全面、正确地反映人类该疾病的各项特征,还应具有良好的可操纵性和可重复性。笔者使用卵清蛋白诱发建立变应性鼻炎动物模型,为该病的临床研究提供依据。1 材料与方法111 动物 健康大鼠40只,清洁级,雌雄各半,体重120~250g,由广西医科大学实验动物中心提供,许可证号(SCXK桂200320003)。112 饲养条件 无过敏原,室内有透风设备,室温20~25℃,湿度50%±5%,笼内小瓷罐给水,由广西中医学院实验中心提供的白

3、鼠颗粒饲料饲喂。113 材料 卵清蛋白(Sanland2chemInternationalInc.);氢氧化铝(成都市科龙化工试剂厂)。114 方法 (1)大鼠适应性喂养一周后,随机分成A、B组,A组为实验组30个,B组为正常对照组10个。(2)致敏 ①对A组每只大鼠以卵清蛋白013mg做为致敏原,氢氧化铝30mg作为佐剂,生理盐水溶解制备为1ml混悬液,腹腔注射混悬液每2天1次,共7次。②对A组腹腔注射完成以后第二天,用5%的卵清蛋白溶液各10μl滴于双侧前鼻孔,天天1次,共7天,维持致敏状态。每次鼻腔致敏后立即观察30分钟,记录大鼠鼻分泌量、

4、喷嚏次数及搔鼻情况,采用叠加量化计分法计分,症状计分标准见表1,总积分>5分者为造模成功[2]。2 结果症状观测:经观察对比,实验组大鼠频频用前爪抓鼻端两侧,并伴有喷嚏声,净水鼻涕较多,在鼻端流出两道湿痕,个别眼角湿润,精神不振,而正常对照组无明显体征。实验组大鼠症状观察比较见表2;两组大鼠症状观察对照见表3。表1 大鼠症状计分标准表计分抓鼻流涕喷嚏0分无无无1分偶然流至前鼻孔1~3个2分频繁超过前鼻孔4~10个3分抓不停涕流满面>10个表2 实验组大鼠三大症状观察比较 (例)抓鼻流涕喷嚏1471421616113964表3 两组大鼠症状观察总积分对照

5、表(分)组别抓鼻流涕喷嚏实验组635748正常组0003 讨论最早的变应性鼻炎动物模型是TanakaK在1988年选用甲苯二异氰酸酯建立的[3],但由于甲苯二异氰酸酯对鼻腔黏膜的刺激和炎性损伤,故未能广泛使用,而卵清白蛋白的刺激性很小且致敏效果较好,所以目前应用卵清白蛋白造模较普遍。本实验利用卵清白蛋白加佐剂氢氧化铝先使动物机体基础致敏,再滴鼻维持致敏状态,方法简单,复制了在体征和病程方面都与人的临床变应性鼻炎近似的动物疾病模型,该模型的复制对于进一步研究人类变应性鼻炎的发生、发展规律起着重要作用。变应性鼻炎是鼻黏膜组织的一种非感染性炎症,它的发生系由

6、外界变应原与位于鼻黏膜的特殊炎症性或免疫防御性细胞发生特异性反应。变应原进进机体后,被抗原呈递细胞(APC,包括巨噬细胞、树突状细•224•光明中医2010年2月第25卷第2期  CJGMCM February2010.Vol25.21994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved..ki.胞、朗格汉斯细胞、B淋巴细胞)吞噬,经细胞内吞噬溶酶体降解后的变应原位于APC表面,与主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子形成复合物,被辅助诱导T淋

7、巴细胞所识别激活B细胞,导致变应原特异性IgE的产生,IgE附着于肥大细胞和嗜碱细胞表面,当再次接触变应原后,IgE与受体结合交联,激活肥大细胞、嗜碱细胞开释组胺、白三烯等介质,进而刺激鼻黏膜引发一系列症状。组胺开释后,可激动分布在鼻黏膜的三叉神经末梢的H1受体引起三叉神经的动作电位,刺激感觉神经末梢,产生鼻痒和喷嚏;同时可使微血管扩张,血管通透性增加,组织水肿,嗜酸性细胞增加,胆碱能神经兴奋,开释乙酰胆碱,腺体分泌活动亢进引起流清涕等症状。从本实验中可以观察到用卵清白蛋白造模,大鼠的抓鼻积分最高,其次是喷嚏,流涕积分最低,提示卵清蛋白造模对感觉神经的

8、刺激性较强,产生鼻痒、喷嚏较为明显,对副交感神经作用稍弱,流涕较少,但该造模方法是符合人类变应

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