半边旗提取物5f对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作

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1、半边旗提取物5F对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作【】目的研究半边旗提取物5f对非小细胞肺癌ncih460细胞生长的抑制作用。方法mtt法检测5f对ncih460细胞的生长抑制作用；用pihoechst荧光双染法和tunel法检测细胞凋亡；流式细胞仪检测5f对dna含量的影响。结果5f抑制ncih460细胞的生长，其效果与5f的浓度和作用时间相关，24、48、72h的ic５０分别为：21.40、4.52、1.02μg/ml；荧光双染色法显示经5f作用后细胞出现变形，染色质浓缩，产生凋亡小体；细胞被阻滞在g2/m期

2、。结论5f在体外能有效地抑制ncih460细胞的生长，其作用可能是通过诱导其凋亡产生的。【关键词】半边旗；5f；ncih460；生长抑制inhibitoryeffectsof5ffrompterissemiinnatal.onproliferationofnonsmallcelllungcancerncih460cellsliuyi1，ichaelkyhsin2，malcolmjunderentofnaturedrugs，guangdongmedicalcollege，zhanjiang524023，chin

3、a；2.departmentofsurgery，thechineseuniversityofhongkong，princeofistryandmolecularbiology，guangdongmedicalcollegecorrespondingauthors：lianglianci，email：plliu78sina.abstract：objectivetoinvestigateinhibitoryeffectsof5ffrompterissemiinnatal.onproliferationofnonsm

4、allcelllungcancerncih460cells.methodsncih460cellgroediatedby5ftt.pihoechstdoublestainingandtunelassayeterinetheeffectof5fonthecontentofdnaincells.results5fdisplayedgrolatthepointof24,48and72hours.5fcouldinduceapoptosis.ncih460cellstreatedby5f.conclusioninvi

5、tro5fsignificantlyinhibitedtheproliferationofncih460cellsandtheactivitymightberealizedthroughinducingapoptosis.keyiinnatal;5f;ncih460;proliferationinhibited半边旗（pterissemiinnatal.）是生长在我国南方的传统中草药，民间用其来治疗感染性疾病。.133229.从半边旗中分离提取到一些具有生物活性的物质，以5f含量最高，其结构为二萜类化合物，见图1

6、。化学结构名为11α羟基15氧16烯对映贝壳杉烷19酸（ent11αhydroxy15oxokaur16en19oicacid）。本课题研究表明5f在体外能抑制多种癌细胞的生长并诱导凋亡的发生；能明显减小k562、s180等瘤株在小鼠所形成的肿瘤大小，延长小鼠存活时间[13]。肺癌是目前全世界人类最主要的癌症死因之一，其中75%～80%为非小细胞肺癌（nsnlc），晚期肺癌患者仅有2%存活率超过5年，通常不满1年。近年来，对肺癌患者的治疗还是以化疗和放疗为主导，这些治疗药物和措施会

7、给患者带来极大的痛苦，因此，从天然植物中提取具有抑制肺癌细胞生长的高效低毒的化合物已经成为抗肿瘤研究的热点。本研究旨在探讨5f对非小细胞肺癌ncih460细胞生长的抑制作用及可能的机制。1材料与方法1.1材料从植物半边旗中提取的5f，纯度为100%，使用前溶于dmso。mtt、hoechst33342、pi为sigma公司产品；超级无支原体新生牛血清购自杭州四季青生物材料有限公司；rpmi1640购自美国hyclone公司；胰酶购自美国gibco公司；细胞凋亡检测试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司产品；其余试剂均

8、为国产分析纯。非小细胞肺癌nci－h460细胞由本室传代。1.2方法1.2.１细胞培养ncih460细胞培养于含10%小牛血清，100ku/l青霉素和100mg/l链霉素的rpmi1640培养液中，37℃、5%co2饱和湿度细胞培养箱培养。取对数生长期细胞用于实验。1.2.２mtt法检测5f对ncih460细胞的生长抑制作用取对数生长期的