全国临床检验操作规程

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1、WORD资料下载可编辑全国临床检验操作规程（第3版）精液检查一．标本收集1.在3个月内检查2次至数次，二次之间间隔应>7天，但不超过3周。2.采样前至少禁欲3天，但不超过7天。3.采样后1h内送到检验科。4.用清洁干燥广口塑料或玻璃小瓶收集精液，不宜采用避孕套内的精液。某些塑料容器具有杀精子作用，但是否合适应事先做实验。5.应将射精精液全部送检。6.传送时温度应在20~40℃。7.容器必须注明患者姓名和（或）识别号（标本号或条码），标本采集日期和时间。8.和所有体液一样，精液也必须按照潜在生物危害物质处理，因为精液内可能含有肝炎病毒、人类免疫缺陷（病毒）和疱疹病毒等。二．一般

2、性状检查一般性状检查包括记录精液量、颜色、透明度、粘稠度和是否液化。1.外观正常精液呈灰白色或乳白色，不透明。棕色或红色提示出血。黄色可能服用某种药物。精子浓度低时精液略显透明。正常精液是一种均匀黏稠的液体，射精后立即凝固，30min后开始液化。若液化时间超过60min考虑为异常，应记录这种情况。正常精液可含有不液化的胶冻状颗粒。2.量技术资料专业分享WORD资料下载可编辑用刻度量筒或移液管测定。正常一次全部射精精液量约2~5ml。精液量过多或过少是不育的原因之一。3.黏稠度在精液全部液化后，用Pasteur滴管吸入精液，然后让精液依靠重力滴落，并观察拉丝长度。正常精液呈水样

3、，形成不连续小滴。黏稠度异常时，形成丝状或线状液滴（长度大于2cm）。也可使用玻璃棒或注射器测定黏稠度。4.酸碱度用精密试带检查。正常人pH为7.2~8.0，平均7.8。三．精子存活率精子存活率（motility）用活精子比例来反映。1.伊红染色法【试剂】5g/L伊红Y染色液：伊红Y0.5g，加生理盐水至100ml。【操作】（1）在载玻片上加新鲜精液和伊红溶液各1滴，混匀后，加上盖玻片，30s后在高倍镜下观察，活精子不着色。死精子染成红色。（2）计数200个精子，计算未着色（活精子）的百分率。2.伊红-苯胺黑染色法【试剂】（1）10g/L伊红Y染色液：伊红1g，加蒸馏水至10

4、0ml。（2）100g/L苯胺黑染色液：苯胺黑10g，加蒸馏水至100ml。技术资料专业分享WORD资料下载可编辑【操作】（1）取小试管，加新鲜精液和伊红溶液各1滴，混匀。（2）30s后，加苯胺黑溶液3滴，混匀。（3）30s后，在载玻片上，加精液-伊红-苯胺黑混合液1滴，制成涂片，待干。（4）油镜下观察，活精子为白色，死精子染成红色，背景呈黑色，计数200个精子，计算未着色活精子的百分率。3.精子低渗膨胀试验（HOS）【试剂】膨胀液：枸橼酸钠0.735g，果糖1.351g，加蒸馏水至100ml。分装，-20℃冷冻保存，使用前解冻，并充分混匀。【操作】（1）取小试管，加1ml膨

5、胀液，37℃预温5min。（2）加0.1ml液化精液，轻轻搅匀，在37℃孵育至少30min。（3）在相差显微镜下观察精子，膨胀精子为尾部形状发生变化的精子，即活精子。计数200个精子，计算膨胀精子的百分率。【参考区间】在排精30~60min内，约有70%以上精子应为活动精子。精子低渗膨胀试验应有60%以上精子出现尾部膨胀。【附注】技术资料专业分享WORD资料下载可编辑（1）如室温低于10℃时，应将标本先放入37℃温育5~10min后镜检。（2）某些标本试验前就有尾部卷曲的精子，在HOS试验前，计算未处理标本中尾部卷曲精子的百分数，实际HOS试验结果百分率就等于测定值减去未处理

6、标本中尾部卷曲精子百分率。（3）HOS也是精子尾部膜功能试验。四．精子活力WHO推荐一种无需复杂设备而能进行简单精子活力（activity）分级的方法。【操作】取10μl标本涂片，连续观察至少5个视野，对200个精子进行分级，首先计数a级和b级精子，随后在同一视野内计数c级和d级精子。【结果判断】根据下述标准把精子活力分为a、b、c、d四级。a级：快速前向运动：37℃时速度≥25μm/s，或20℃时速度≥20μm/s（25μm大约相当于精子5个头部的长度，或半个尾部的长度）。b级：慢速或者呆滞的前向运动。c级：非前向运动（＜5μm/s）。d级：不动。【参考区间】正常精液采集后

7、60min内，a级+b级精子达50%以上。五．精子计数【试剂】技术资料专业分享WORD资料下载可编辑精子稀释液：碳酸氢钠5g，40%甲醛溶液1ml，蒸馏水100ml，待完全溶解过滤后使用。【操作】1.于小试管内加精子稀释液0.38ml，吸液化精液20μl，加入稀释液内摇匀。2.充分摇匀后，滴入改良Neubauer血细胞计数池内，静置1~2min，待精子下沉后，以精子头部作为基准进行计数。3.如每个中央方格内精子少于10个，应计数所有25个中方格内的精子数。4.如每个中央方格内精子在10~40个，应计数1