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1、Onedrop分光光度计简要操作说明1.双击电脑屏幕上的OD-1000图标,启动软件.2.选择所需的测量模式,屏幕上会弹出初始化仪器的提示.往仪器的下样品台中间加入2微升的蒸馏水,合上上臂使形成液柱,然后点击确定以开始初始化,可以听见电磁阀开合的声音.3.几秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用吸水纸将蒸馏水擦干净,加入2微升的Buffer,合上上盖并点击Blank.4.Blank完成后,用吸水纸将Buffer擦干净即可以开始上样,点击Measure开始测量.图一图二图三图四5.测量完成后,点击ShowReport查看结果,选择Save进行保存.6.保存的数据对应地保存在C:
2、OnedropData文件夹.OD-1000操作注意事项以下建议非必须,但按此操作可得到更佳测量效果:1、测量前将样品中度混匀(可采用震荡器或用手指弹震管底)。2、TIP头插入液面下吸取样品,可避免吸入气泡;TIP头贴着下光纤表面打出样品,且只按到移液器第一挡尽头,第二挡不要按,可以避免吹出气泡到样品中。3、每次测量完毕后,用蒸馏水清洁上下光纤端面,这样可以更好地保证下一次测量的准确性(主要针对超高浓度样品,一般样品无此要求)。4、每次做BLANK前一定要先用水清洁上下光纤表面,可保证BLANK准确。5、每次测量的核酸样品量建议为1.5-2微升,蛋白样品建议2-2.5ul.过少可
3、能无法形成水柱,过多可能溢出。6、加样后尽快测量,以防蒸发浓缩以及灰尘落入,已加样品不能多次MEASURE,如需重测需重新滴加同一样品。7、仪器避免阳光直射,避免强风吹拂,以避免蒸发。8、仪器USB线与电脑连接时间越长热平衡越好,所以建议USB线与电脑一直连接;并在每天使用前电脑先开机一段时间后再使用仪器。9、连续测量一段时间后擦净样品,用水清洁上下光纤表面,然后用水或BUFFER做RE-BLANK后再MEASURE10、为保证软件高速扫描光谱,请勿同时运行其他高占用CPU的软件。11、仪器不用时,将上臂放下,可以防止灰尘。注:清洁上下光纤表面的方法是:用移液器加2-2.5ul水在
4、下光纤表面,放下上臂,并顺便按压一下上臂,以使下光纤表面的水滴碰到上光纤表面,然后将上下表面的水都用吸水纸擦去即可。清除样品时同样是要将上下表面都擦去。软件的简要操作:(以测量核酸为例)1.双击启动Nanodrop软件,进入以下界面(不同的软件版本可能略有不同)2.点击NuceicAcidMeasurement(核酸测量),会跳出以下对话框:往加样孔里加入2ul蒸馏水,合上上盖使形成液柱,然后点击OK确定,仪器开始初始化并发出哒哒声。3.在初始化时,屏幕上会出现如下信息:“InitializingSpectrometer-pleasewait”and“checkingdetecto
5、rbias”。当这些信息消失后,仪器即可正常使用。软件转为如下界面:4.测量空白对照:用吸水纸将加样孔和上盖的液体擦干净,然后向加样孔中加入空白对照样2ul(即Blank),合上上盖并点击Blank。5.Blank完成后,即可开始样品的测量:在SampleType的下拉列表中选择样品类型,如DNA-50,ssDNA-37,RNA-40(-之后的数字表示此样品的OD为1时所对应的浓度,单位为ng/ul),用吸水纸将加样孔和上盖的液体擦干净,然后向加样孔中加入2ul样品,点击Measure,可以看到如下结果6.用吸水纸将加样孔和上盖的液体擦干净,然后向加样孔中加入另一个样品,以同样的方
6、法进行测量。如果要查看所有的测量结果,点击ShowReport。7.如果要退出此测量界面,点击右上角的EXIT。在退出前请保存测量数据。注:Re-blank是指重新做空白对照,其值不仅会应用于之后测量的样品,也会同时作为新的空白对照更改之前测量的样品值8.历史数据查询在以下目录:C:onedropdatatempdatabackup声明:以上操作方法对于其他测量如蛋白的测量具有一定的参考意义,只是在具体的生物学实验方法上略有不同,如BCA,Bradford等以及标准曲线的建立。详细内容请参阅生物学资料和说明书名词介绍:NuclearAcidMeasurement:核酸测量Pr
7、otein280:用280nm波长测量蛋白,选择适当的蛋白类型(如BSA,IgG等),软件将在测量后给出吸光度值并自动计算其浓度MicroArrayMeasurement:测定荧光染料标记核酸的效率UV-visMeasurement:连续波谱扫描,可用于寻找最大吸收峰CellCultures:用600nm波长测量菌密度ProteinBCA:BCA法测蛋白ProteinBradford:Bradford法测蛋白ProteinLowry:Lowry法测蛋白UserPref