微生物检验的质量控制

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1、微生物检验的质量控制广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心2012年11月前言在实际工作中存在许多复杂因素影响微生物学检验，可能给检验结果带来偏差甚至错误，因此必须对影响检验结果的诸多因素采取控制手段保证检验结果的正确性，不断完善微生物检验的质量控制。主要内容1检验人员2仪器、设备3检验培养基、试剂4检验环境5采样6样品的接收和预处理7检验质量8校验的执行9参考菌株及其保存10实验室内外部质量控制11检验报告及结果质量控制1检验人员（1）微生物检验不能完全依赖全自动鉴定仪器，检验工作中每一步骤均需要有高度的主观分析和判断能力，与个人的经验、技

2、能和微生物检验基础知识水平密切相关。（2）除要求微生物检验人员必须具备严肃认真的工作态度、精密细致的观察和操作习惯，注重个人卫生外，还必须熟练掌握微生物学检验技术。1检验人员（3）检验人员应执行上岗前培训制度，上岗前培训合格方能上岗操作，还要主动参加学习、培训、讲座，学习新技术，掌握微生物学检验方法、标准及相关法律法规；（4）参与编写测试程序及仪器操作程序，学习质量保证体系知识和计量学基本知识；1检验人员（5）参加各类水平测试和盲样测试，提高检测水平和分析问题、解决问题的能力；（6）微生物学检验室负责人应定期对检验人员进行专业知识和操作熟练程度的

3、考核，提高检验人员的素质。2仪器、设备大型微生物检验室的主要仪器及设备包括：无菌室、微生物自动鉴定仪、微生物快速初筛仪、显微镜、菌落计数器、高压灭菌器、干热灭菌器、离心机、蒸馏设备、培养箱、厌氧箱、水浴箱、冰箱、超净工作台、酶标仪、洗板机、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统等。2仪器、设备要求所有的仪器和设备均应按照生产厂家提供的方法和有关规定正确使用。需要强制性定期检定的仪器和设备，经符合资历的计量部门校准合格后方可使用。对于常用的贵重仪器和设备，在使用前应加以检查，使用后要登记，要做到定期维护，以保证仪器处于良好的工作状态。2.1高压灭菌器（1）

4、操作人员应了解蒸气灭菌的原理并遵守操作规则。（2）放入的灭菌物品不宜放得过挤。（3）使用时，放入生物指示条或化学指示条。（4）生物指标为嗜热脂肪芽胞杆菌的耐受性（121℃，15min）。（5）灭菌后，再培养观察有无细菌生长。（6）也可采用水银留点温度计进行校准。2.2干热灭菌器（1）应遵守操作规则，放入箱内灭菌的器皿不宜放得过挤，器皿与内层底板不能直接接触。（2）灭菌完毕，不能立即开门取物，须关闭电源，待温度下降至50℃以下再开门取物。（3）带有纸包装的物品灭菌温度不能超过160℃。2.3培养箱（1）箱内不应放入过热或过冷的物品，取放物品时，应随

5、手关闭箱门，以维持恒温。（2）如培养物不慎泼洒到箱内，应马上清洁，并采取必要的消毒措施。（3）培养物不宜与培养箱最底层直接接触。（4）必要时，可放入装水容器以维持箱内的湿度。（5）每天记录温度及湿度的变化，观察培养箱内温度与设定温度是否一致。在两次计量周期之间要进行至少一次内部校准。2.5显微镜按使用说明进行操作。使用油镜后先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用沾上二甲苯的擦镜纸擦拭，最后用干净擦镜纸擦干。（建议使用无水乙醇+乙醚）注意防尘，保持清洁、干燥。2仪器、设备实验室需要使用的无菌器具应能正确实施灭菌，无菌器具和器皿有明显标识，以便与非无菌器具和

6、器皿加以区别。3检验培养基、试剂3.1培养基微生物学检验所用干粉培养基，必须由专业厂家生产，产品质量必须符合有关的质量标准，保存也应符合要求，防止潮解、结块等。干粉培养基易受潮变性，需要重视。一旦变质，不得再使用。3.1培养基为保证干粉培养基质量指标，在实际工作中应注意：（1）加强包装的密封性能；（2）使用时尽量缩短开盖时间；（3）干粉培养基一般放在通风、干燥、避光的环境中保存，对于易受潮的品种，启用后宜放入干燥器中保存；（4）由于配制水分不同、启用次数或时间增加，干粉培养基的pH值可能会有所变化，应随时略加调整。3.1培养基干粉培养基所要求的理

7、化指标，可以从下面几个方面进行初步检查：（1）干粉培养基应为疏松颗粒状或粉末状，颜色正常、一致；（2）溶解后清彻透明，无沉淀；（3）45℃时pH值为7.2士0.2；熔化温度70℃左右，凝固温度为35-40℃；（4）水分含量符合标准。3.1培养基商品化培养基的平皿应对所用培养基做外观检查，如培养基是否开裂、平皿有无破碎、血平板有否溶血、有否冰冻、灌注是否均匀、有否过多的气泡，清晰度和有无污染也需要检查。培养基平皿的制备商必须按照标准随产品附上书面鉴定资料，实验室应将此鉴定书保存一定时期。3.1培养基实验室自制培养基应有质量控制，包括：制备数量制备日

8、期有效日期制备者姓名还必须检查：培养基颜色均匀度厚度光洁度溶血与否有否过多气泡是否污染3.1培养基培养基的配制应严格按照标准规定的方法进