肾结核病灶中淋巴细胞趋化因子的表达

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1、肾结核病灶中淋巴细胞趋化因子的表达：鲁雄兵,谢辉莉,邹高德,黄红卫,熊建华,史子敏,潘正跃【摘要】　　目的:探讨淋巴细胞趋化因子在正常肾脏和肾结核中的表达以及淋巴细胞趋化因子和浸润CD4+、D8+T细胞在肾脏结核病灶中的分布特点。方法:6例正常肾脏和10例肾结核病变组织,经匀浆后,采用RTPCR法扩增人淋巴细胞趋化因子（hLptn）的含编码区序列的cDNA;扩增cDNA的克隆至pGMTEasyT载体,测序;应用免疫组织化学方法检测正常肾脏和肾结核中的hLptn的表达和结核病灶中的CD4、CD8分子的表达。结果:正常肾脏和肾结核组织均表达hLptnmRN

2、A,应用RTPCR法克隆的cDNA序列与GenBank中U23772的序列一致;hLptn在正常的肾小球、肾小管中和结核病变中残存的肾小球、肾小管中均有表达;结核病变中有散在的CD4和CD8分子阳性细胞,与hLptn的分布无重叠。结论:淋巴细胞趋化因子在肾脏的肾小球和肾小管中呈结构性表达,肾结核肉芽肿中淋巴细胞的募集可能非依赖于hLptn的作用。【关键词】淋巴细胞趋化因子细胞肾脏结核　　[Abstract]AIM:Tostudytheexpressionoflymphotactininnormalkidneyandrenaltuberculosisand

3、thearrangementoflymphotactinandinfiltratingCD4+TcellsandCD8+Tcellsinrenaltuberculosis.METHODS:HLptncDNAoftissuesfromsixcasesalkidneysandtencasesplifiedbyRTPCR.TheRTPCRproductsmunohistochemicalstainingmethodinetheexpressionoflymphotactininnormalkidneysandtuberculouskidneysandthee

4、xpressionofCD4andCD8intuberculouskidneys.RESULTS:ThesequenceofclonedhLptncDNAedanditalkidneysandtuberculouskidneysexpressedhLptnmRNA.HLptnalrenalglomerulusandrenaltubulebutalsointhecellsofremainingrenalglomerulusandrenaltubuleoftuberculouskidneys.ThecellsexpressingsurfaceantigensC

5、D4andCD8scatteredingranulomas.CONCLUSION:TheconstructiveexpressionofhLptnisinthecellsofrenalglomerulusandrenaltubuleofnormalkidneyandtuberculouskidney.TheaccumulationofCD4+TcellsandCD8+TcellsingranulomasmaynotdependonhLptn.　　[Keyphotactin;cell;kidney;tuberculosis　　人淋巴细胞趋化因子（humanl

6、ymphotactin,hLptn）是人类趋化因子C族的惟一成员,由活化的淋巴细胞产生,具有趋化CD4+,CD8+T细胞和NK细胞等生物学特性。在分枝杆菌诱发的肺肉芽肿形成过程中,Lptn表达量增高[1]。本实验旨在探讨淋巴细胞趋化因子在正常肾脏和肾结核中的表达以及淋巴细胞趋化因子和浸润CD4+、CD8+T细胞在肾脏结核病灶中的分布特点。　　1材料和方法　　1.1材料正常肾脏组织（6例）系小肾癌手术标本远离肿瘤部位的肾组织（距离肿瘤部位>5cm）;肾结核病灶组织（10例）取自肾结核手术切除标本中肾实质较厚、且其表面有少许淡黄色粟粒样结节的部位,手术标

7、本离体后取黄豆大小组织2份,1份迅速置入液氮中保存;另1份固定后做石蜡包埋。RTPCR试剂盒SuperScriptOneStepSystem（含SuperScriptIIRT/TaqPlatinumDNAPolymeraseMix）、pGMTEasy平末端DNA片段克隆试剂盒购自北京天为时代科技有限公司;胶回收试剂盒、RNA抽提试剂RNAexReagent购自上海华舜生物技术有限公司;PCR扩增仪9600型购自美国PerkinElmer公司;兔抗hLptn多克隆抗体购自Peprotech公司;鼠抗人CD4、CD8抗体购自北京中山生物技术公司;HRP

8、酶标记羊抗鼠多抗、HRP酶标羊抗兔多抗购自DAKO公司;引物合成和