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1、原因不明习惯性流产患者外周血T细胞亚群变化【关键词】流产,习惯性;T淋巴细胞亚群;流式细胞术ABSTRACT:ObjectiveToanalyzeoftheroleofperipheralbloodT-cellsubsetsinunexplainedhabitualabortion(UHA).MethodsT-cellsubsetseasuredbyfloetry(FCM)intheperipheralbloodlymphocytes.Thesamples60non-pregnantUHAenand20non-pregnantofhealt
2、hyen(NNP).ResultsTcells(65.43％vs61.10%,P<0.05),T-cellcostimulatorymoleculeCD28＋(9.51%vs0.82%,P<0.01),andcytotoxicTlymphocytes(CLT,1.74%vs0.02%,P<0.01),CD8+CD3-lymphocytes(28.18%vs9.87%,P<0.01)phocytesofUHAthanthoseofNNP,eanCD4/CD8ratioshophocytesofUHA.Decreaseo
3、fTrcellsubsetsmightbeassociatedphocytecellsubsets;floetry习惯性流产的原因可分为遗传和非遗传因素两个方面,非遗传因素包括内分泌、解剖、感染、免疫、心理和环境因素等。据报道,50%~60％习惯性流产与机体免疫功能异常有关。笔者应用流式细胞术分析60例原因不明习惯性流产(UHA)患者和20名正常非孕(NNP)妇女外周血T细胞亚群比例变化,了解T细胞亚群在UHA发病中的可能作用。 1对象与方法 1.1对象 收集2005年9月-2007年3月本院门诊就医的UHA患者60例,非孕期,排除染
4、色体、生殖道解剖结构、内分泌异常和生殖道感染,年龄(30.33±3.25)岁(27~34岁)；NNP妇女20例,年龄(28.36±5.23)岁(23~34岁)。 1.2方法 无菌采集受检者外周肝素抗凝血2mL,取全血100μL分别加入鼠抗人CD3-PC5、CD4-FITC、CD8-PE、CD25-PE、CD28-FITC、CD29-PE单克隆抗体20μL(美国贝克曼-库尔特公司),室温(23~28℃),避光孵育20~30min,加红细胞裂解液0.5mL作用30min后,应用流式细胞仪(EpicsXL型,美国Coulter公司)上机分析,
5、同时设同型对照管。 1.3统计学处理 数据经SPSS11.0软件处理,计量资料采用x±s表示，组间分析应用t检验或方差分析。 2结果UHA较NNP组T总细胞明显升高(P<0.05),T28和CTL表达水平显著升高(P<0.01),CD8+CD3-淋巴细胞群UHA组也较NNP组显著升高(P<0.01)。而Tr和Ts亚群均下降,其中Tr比例显著下降(P<0.01)。T4、T8、Ti细胞亚群比例及CD4/CD8比值两组差别无显著意义(P>0.05,表1)。表1UHA和NNP组外周血T细胞亚群（略） 3讨论目前
6、对UHA的发病机制知之甚少,多数学者认为与机体免疫功能异常有关。邱丽华等报道,正常妊娠与非妊娠妇女外周血Tr细胞亚群差别无统计学意义,而原因不明复发性流产妇女外周血Tr细胞亚群较正常非妊娠妇女显著下降［1］。陈巧英等发现,早孕期正常妊娠者外周血Tr比例显著高于早孕期自然流产患者及黄体期育龄妇女,早孕期自然流产患者外周血CD28＋表达水平显著高于早孕期正常妊娠者和黄体期育龄妇女［2］。本组实验结果,UHA患者外周血T总细胞数、T28和CTL表达水平较NNP妇女显著升高(P<0.05,P<0.01),而Tr细胞群比例显著下降(P&l
7、t;0.01),提示UHA患者外周血T细胞杀伤功能增强。Tr细胞亚群是体内自然存在的,能分泌白细胞介素4(IL-4)、IL-10、β转化生长因子(TGF-β)、表达白介素-2α受体(IL-2Rα,即CD25受体)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)分子,对效应性T细胞具有抑制作用,是调节性T细胞的重要亚群,在维持自身免疫耐受中起关键作用。Nishikas等发现Tr细胞与单核细胞/巨噬细胞共培养,单核细胞仅产生最小剂量的细胞因子,而与CD4+CD25-T细胞共培养,则使后者产生大量亲炎症因子(TNF-α,IFN-γ和IL-6)［4］。因
8、此,Tr细胞亚群数量的减少不能正常有效地诱导孕妇免疫耐受,容易发生对异型抗原的免疫排斥反应,乃至影响胚胎着床而流产。董琳等应用环孢素A上调孕鼠外周Tr细胞,诱导母胎免疫耐受,可降
