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时间:2018-10-19
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1、幽门螺杆菌vacA及cagA基因型与胃疾病的关系:张凤娟江月萍赵清喜张凤娟【摘要】目的探讨幽门螺杆菌(Hp)vacA、cagA基因型与胃疾病的关系。方法选取105例胃疾病病人,包括慢性浅表性胃炎(CSG)45例,慢性萎缩性胃炎(CAG)48例,胃癌(GC)12例。于胃窦处取3块胃黏膜,分别进行快速尿素酶反应、病理检查和聚合酶链反应(PCR)。提取胃黏膜基因组DNA,用6对引物检测HpvacA、cagA基因的表达。结果快速尿素酶反应、病理检查均阳性的标本57例,Hp的阳性率为54.2%(57/105)。HpvacAs1/m2、s1/m1、s2/m1、s2/m2的阳性率分别为53%(30/57)
2、、18%(10/57)、8%(5/57)、21%(12/57);HpcagA的阳性率为89%(51/57)。vacA、cagA基因型在CSG、CAG和GC之间差异无显著性(P>0.05)。结论Hp菌株的优势基因亚型为HpcagA、vacAs1/m2;HpvacA、cagA基因与特定胃疾病间无显著相关性,不能预示Hp感染的临床结果【关键词】胃疾病;螺杆菌,幽门;胃黏膜;vacA基因;cagA基因;聚合酶链反应 [ABSTRACT]ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetmucosaeachpatient.Rapidureasetest,histo
3、logicalexaminationandpolymerasechainreaction(PCR)en.DNAthespecimen,andsixpairsofprimersination,in2,s1/m1,s2/m1,s2/m2ongCSG,CAGandGCgroups(P>0.05).ConclusionCagAandvacAs1/m2inantgenotypesofHelicobacterpylori.Thereachdiseases;Helicobacterpylori;gastricmucosa;vacAgene;cagAgene;polymerasechainreacti
4、on自1983年ASHALL从胃黏膜中分离出幽门螺杆菌(Hp)后,国内外学者对Hp感染与胃十二指肠疾病的关系从多方面做了大量的研究。Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡的病因之一,也是胃癌的危险因素[1]。Hp的空泡形成毒素(vacA)基因和细胞毒素相关(cagA)基因及其表达产物与Hp感染者的临床发病有着密切关系[2]。本研究采用聚合酶链反应(PCR)技术检测105例胃疾病病人HpvacA、cagA基因亚型,以探讨HpvacA、cagA基因亚型与胃疾病的关系。 1对象和方法 1.1研究对象选择2008年6—12月在我科就诊,需胃镜检查的病人105例,包括慢性浅表性胃炎(CSG)45例,慢性萎
5、缩性胃炎(CAG)48例,胃癌(GC)12例。其中男51例,女54例,年龄17~76岁。胃镜检查前1个月内没有服用过抗生素、质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂、非甾体类消炎药等。于胃窦处取黏膜3块,1块进行快速尿素酶反应,1块送组织学病理检查(亚甲蓝染色),1块进行PCR检测。 1.2模板制备用BioTekeDAN提取试剂盒(北京)提取胃黏膜及可能Hp基因组,严格按照试剂盒说明书操作,2期张凤娟,江月萍,赵清喜.幽门螺杆菌vacA及cagA基因型与胃疾病的关系99避免样本之间交叉污染。基因组DNA置-20℃保存备用。 1.3PCR反应扩增HpvacA、cagA基因亚型的引物序列同文献[35]
6、,见表1。采用广州东盛生物有限公司提供的2×PCRTaqMix反应体系,总反应体积为为50μL。用touchdoin。引物由上海生工生物工程技术有限公司合成。以长100bpDNAladder(广州东盛生物有限公司)为Marker,于20g/L琼脂糖凝胶上电泳检测PCR产物。表1PCR检测HpvacA、cagA亚型的引物扩增区域引物编号引物序列(略) 1.4统计学处理采用SPSS15.0统计学软件进行数据处理,数据间比较采用χ2检验。 2结果 2.1Hp阳性率105例病人中,快速尿素酶反应阳性84例,组织学检查Hp阳性57例,两者均阳性的标本57例,Hp阳性率为54.2%(57/105
7、)。 2.2vacA基因型检测Hp阳性病人vacAs1/m2、s1/m1、s2/m1、s2/m2的阳性率分别为53%(30/57)、18%(10/57)、8%(5/57)、21%(12/57),vacAs1/m2阳性率与其他基因亚型相比,差异有统计学意义(χ2=5.07,P<0.05)。vacA基因型在CSG、CAG和GC之间差异无显著性(P>0.05)。见表2。 2.3cagA基因型检测Hp阳性病人中c
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