从pi3k2fakt2fp53信号传导通路探讨蛇葡萄素抗胃癌作用的机制研究

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1、中英文缩略词汇表英文缩写英文全称中文名称AAbsorbance光吸收值APAmmoniumpersulfate过硫酸铵BCABicinchoninincacid2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠BeyoECLPlusBeyoECLPlus超敏ECL化学发光试剂盒BSABSA牛血清白蛋白HRP-labeledGoatHRP-labeledGoat辣根过氧化物酶Anti-RabbitIgG(H+L)Anti-RabbitIgG(H+L)标记山羊抗兔IgG(H+L)HRP-labeledGoatHRP-labeledGoat辣根过氧化物酶Anti-MouseIgG(H+L)A

2、nti-MouseIgG(H+L)标记山羊抗小鼠IgG(H+L)DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜IC5050%Inhibiting半数抑制率ConcentrationMTTMethylThiazolyl四甲基噻唑兰Tetrazolium1PBSPhosptate-buffered磷酸盐缓冲液salinePMSFPhenylmethanesulfonyl苯甲基磺酰氟fluoridePVDFpolyvinylidenefluoride聚偏二氟乙烯膜RPMI-1640RPMI-1640培养基SDSSodiumSalt十二烷基硫酸钠SDS-PAGEsodiu

3、mdodecylsulfate聚丙烯酰胺凝胶polyacrylamidegel电泳electrophoresisSGC-7901SGC-7901人胃腺癌细胞株TBSTTris-BufferedSalineTris-HCl缓冲盐溶Tween-20液TEMEDTetramethylethylenedia四甲基乙二胺mineTrisTris(Hydroxymethyl)a三羟甲基氨基甲minomethane烷TrypsinTrypsin胰蛋白酶TrypanBlueTrypanBlue台盼蓝Tween-20Tween-20吐温20WBWesternblot蛋白免疫印迹β-act

4、inβ-actinβ-肌动蛋白2中文摘要目的：从PI3K/Akt/P53信号传导通路探讨蛇葡萄素抗胃癌的作用机制。方法：（1）蛇葡萄素对人胃癌细胞细胞增殖的影响。取对数生长期细胞，设空白对照组、顺铂阳性对照组和蛇葡萄素组，以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象，采用MTT法评价蛇葡萄素体外对肿瘤细胞细胞增殖的影响及倒臵显微镜下观察各组细胞的形态学变化。（2）蛇葡萄素对SGC-7901细胞PI3K/Akt/P53信号传导通路的影响。取对数生长期细胞，设空白对照组和蛇葡萄素低、中、高剂量组（10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml），药物作用48h后，采用

5、Westernblot技术检测蛇葡萄素对SGC-7901细胞PI3K/Akt/P53信号传导通路凋亡相关蛋白PI3K、Akt、P53、P21、Bcl-2、Bax表达的影响。结果：（1）蛇葡萄素对人胃癌细胞细胞增殖的影响。MTT法结果表明，蛇葡萄素19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml、66.6μg/ml、100.0μg/ml对SGC-7901细胞的增殖有抑制作用，与空白组比较差异有显著性（P<0.05~0.01），且呈剂量依赖关系，其IC50为40.79μg/ml；倒臵显微镜观察可见，蛇葡萄素组与空白组比较，8.8μg/ml、13.2μg/ml浓度组

6、细胞数目、形态改变不明显，19.7μg/ml、29.6μg/ml、44.4μg/ml、66.6μg/ml、100.0μg/ml浓度组细胞数目随着剂量的增加逐渐减少，形态改变明显，细胞体积变小、皱缩、破裂。（2）蛇葡萄素对SGC-7901细胞PI3K/Akt/P53信号传导通路的影响。10.0μg/ml、20.0μg/ml、40.0μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-7901细胞48h后，对PI3K、Akt蛋白的表达无明显影响，与空白对照组比较差异均没有显著性（P>0.05），其对PI3K的相对蛋白表达量分别为0.15±0.02、0.12±0.03、0.19±0.09，

7、对Akt的相对蛋白表达量分别为1.65±0.41、1.40±0.23、340.0±0.35。20.0μg/ml、40.0μg/ml浓度的蛇葡萄素作用于SGC-7901细胞48h后，均可上调P53、P21蛋白的表达，与空白对照组比较差异有显著性（P<0.05），其对P53的相对蛋白表达量分别为2.97±0.34、100.0±0.64，对P21的相对蛋白表达量分别为0.36±0.06、0.34±0.05；而40.0μg/ml可上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达，与空白对照组比较差异有显著性（P<0.05~0.01），其对Bax的相对蛋白表达