超声介入植入法在兔肝vx2肿瘤模型制作中的应用

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1、超声介入植入法在兔肝VX2肿瘤模型制作中的应用韩洋孟凡荣俞群南京市中丙医结合医院超声科江苏南京210014【摘要】目的:逆穿刺活检法在兔肝肿瘤模型制作中的应用。方法:取60只新丙兰大白兔，随机分为A、B、C3组，每组20只，超声引导下瘤块悬液注射法和逆穿刺活检法制作兔肝VX2肿瘤模型，术后超声观察28d。每组取3例肿瘤模型瘤体标木进行病理验证；每组取3例进行肿瘤的1251介入治疗实验。结果：兔肝VX2肿瘤模型制作方法中，A组兔肝模型肝内单发VX2肿瘤10只；B组兔肝模型肝内单发VX2肿瘤12只；C组兔肝模型肝

2、内单发VX2肿瘤全部种植成功，未见腹壁浸润及腹腔种植。与A、B组相比，C组模型制作时间短，肝内单发VX2肿瘤种植成功率高。肿瘤病理显示三组病例均为兔肝VX2肿瘤，三组兔肿瘤模型均能满足1251介入治疗实验要求。结论：逆穿刺活检法制作兔肝VX2肿瘤模型能够满足实验要求，并且具有成功率高、损伤小。该法在兔肝VX2肿瘤模型制作中只有很高的应用价值。【关键词】兔;肝VX2肿瘤模型;逆穿刺活检法【中图分类号】R2465【文献标识码】B【文章编号】1674-8999(2013)08-0115-01近年来，在肝癌的动物实验

3、研究中，兔的肝VX2肿瘤模型其有可多部位种植及种楨后成活率高，其形态学、生化和生物学特性与人类癌瘤相似，在科研实验中应用广泛。为提高兔的肝VX2肿瘤模型的制作成功率，木小组对肝VX2肿瘤模型的制作方法进行研究。1材料与方法实验动物:新丙兰大白兔60只，体重约16〜20kg,3〜5月龄，雌雄不限，随机分为A、B、C三组，每组20只。11建立兔肝VX2肿瘤模型：麻醉方法为盐酸氯胺酮注射液50mg/kg肌注法。A组将VX2肿瘤从荷瘤兔后腿部剥离，将肿瘤块剪碎成约lmm3大小。在种植兔剑突下作一腹部切口，用眼科镊子将

4、组织块埋入肝内部，深约5mm,然后填压凝胶海绵止血。B组，用lml针筒吸取剪碎的瘤块液02ml,内含大小约lmm3的VX2瘤块2〜3个，在超声引导下，注射器针头经皮刺入肝左叶内，深度约15~20mm,将瘤块注入。C组，①制作瘤块，用18G活检针于荷瘤兔腿部VX2肿瘤处穿刺活检，然后将瘤块组织条置入生理盐水中，清洗后用剪刀剪为长约2mm的瘤块。用lml针简吸取一个瘤块备用；②在超声引导下，将备用针管经皮刺入肝左叶内，深度约15〜20mm,然后快速推入瘤块。12超声观察：术后隔天1次对兔VX2肿瘤模型进行超声监测

5、，记录接种区病灶的大小、冋声、血供等超声改变。超声检查28d，每组选取三个瘤块较大者于不同吋间处死实验动物，取出瘤块，进行病理学检查。13治疗实验：每组抽取三例瘤体较小的模型，进行超声引导下1251粒子植入治疗。每周超声检查1次，观察瘤体大小，3周后，取出瘤体进行病理检查。兔肝VX2肿瘤模型成功标准:肝内单发肿瘤形成,无腹壁浸润,无腹腔种植、腹水。14统计方法：采用SPSS115统计软件进行统计，统计方法为x法和t检验法。2结果各组兔肝VX2肿瘤模型对比情况：A、B、C三组中，A组兔术后第2d精神状态差，进食

6、量少；B、C组兔与实验前相比无明显异常。兔肝VX2肿瘤模型制作7d内，A组实验兔死亡5只，B组实验兔死亡1只，C组实验兔无死亡，成功率100%。14d后A组发生切口感染者5只；肝肿瘤自肝内向外生长，浸润腹壁者5只；B组发生浸润腹壁4只；腹腔种植3只，伴有腹水形成;3组中单发肝内肿瘤共42只，未见明显肝外浸润，符合肝VX2肿瘤模型标准。肝VX2肿瘤介入治疗后观察结果显示，未经放射粒子1251治疗的兔肝VX2肿瘤继续生长，最后发生液化。经过植入1251治疗的瘤体体积缩小，回声增强。病理结果显示瘤细胞消失，瘤体纤维

7、化。图3示肝VX2肿瘤植入1251声像图，高冋声短线为1251粒子。3讨论兔肝VX2肿瘤模型是S前国内外常用的动物实验模型，其中比较成熟的方法有瘤块混悬液注射法和开腹手术瘤块埋入法［1-2］。这两种方法制取瘤块的步骤相同，需要将兔大腿部肿瘤切下来，然后再加工为lmm3人小的瘤块，费吋费力，而且对瘤兔创伤大，每只瘤兔只能使用1次［3］，反复制作瘤兔耗费一定的实验吋间。逆穿刺活检法属于微创方法，制取瘤块方便快捷，损伤小，能保证荷瘤兔的多次使用，为肝VX2肿瘤的后续实验带来更广阔的发展空间。本研究显示，3组肝VX2

8、肿瘤均为实体肿瘤，无液化，能达到肝VX2肿瘤的实验要求；与传统的瘤块制作方法相比，逆穿刺活检法瘤块制作吋间明显缩短,而II肝VX2肿瘤种植成功率。Liu等［4］采取A组方法制作兔肝VX2肿瘤吋，成功率915%,高于本小组研究的成功率，但低于C组制作方法的成功率；与开腹手术瘤块埋入法相比（A组方法），逆穿刺活检法具有明显的优势：不需开腹，无开腹手术瘤块埋入法常见并发症，如出血多、损伤大、术中兔易产生麻