大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产esbls的研究.doc

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1、大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产ESBLs的研宄作者:陈云波王震查长森邹立林季敬章彭颖吕建新【摘要】目的了解临床分离的54株大肠埃希菌对氨基糖类苷类抗生素的耐药谱及产ESBLs情况,分析氨基糖苷类修饰酶AAC(3)-II的检出率及该酶的一些特征。方法采用MIC法测定临床分离的54株大肠埃希菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,用NCCLS推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株,并通过聚合酶链反应、克隆测序和测定重组菌耐药谱对aac(3)-II基因进行研究。结果54株大肠埃希菌对阿米卡

2、星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为%、%、%、%、%、%、%;共检测出产ESBLs菌株34株,占%;aac(3)-II基因在54株大肠埃希菌中检出率为%;质粒转化菌产ESBLs且同时检出aac(3)_II基因。重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-11对庆大霉素和卡那霉素有耐药性,对其余5种氨基糖苷类抗生素没有表现出耐药性。结论大肠埃希菌对庆大霉素的耐药率最高,对阿米卡星的耐药率最低;耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌与其产ESBLs有相关性;重组

3、菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-11仅对庆大霉素和卡那霉素产生耐药。【关键词】大肠埃希菌;氨基糖苷类抗生素;修饰酶;超广谱0内酰胺酶;耐药性ResearchonaminoglycosideresistanceprofilesandproducingESBLsABSTRACTObjectiveToinvestigatetheaminoglycosideresistanceprofilesandproducingESBLsofclinicalEscherichiacolistrains

4、andanalyzethecharacteristicofAAC(3)-II.MethodsMICtestsof7aminoglycosidesandESBLsconfirmationtestswereperformed54strainsofaac(3)-IlgenewasamplifiedbyPCRandclonedintopET26b,thenandsequenced.ActivityofAAC(3)-IIwastestedbyMICmethod.ResultsTheresistantrates

5、of54strainsoftoamikacin,gentamicin,kanamycin,tobramycin,streptomycin,spectinomycin,netilmicinwere%,%,%,%,%,%,%ando/o(34/54)ofstrainswerefoundproducingESBLs.Thepositiverateofaac(3)-IIgenewas%(45/54).Theaac(3)-IIgeneresistancetogentamicinandkanamycin,but

6、notother5aminoglycosides.ConclusionsFifty-fourhestresistantratetdthelowestresistanBLs-producingstraioglycoside-resistastrainsofhadthehigogentamicinwhilehatratetoamikacin.ESnsweremostlyinaminnceTheaac(3)-Ilgeneonlymediatesresistancetogentamicinandkanamy

7、cinKEYWORDSEscherichiacoli;Aminoglycosides;Modifyingenzymes;Extended-spectrumbeta-lactamases;Antibioticresistance大肠埃希菌0是条件致病菌,2002年全国细菌耐药性监测网对所属57家三级甲等医院的调查发现,其临床分离率列第一位(%)[1]。目前国内对大肠埃希菌的多重耐药性已引起很大的重视,对0-内酰胺类、氨基糖苷类抗生素(aminoglycosides)的耐药机制有较多的研究,但两者相关性

8、的研究还不多。以54株从临床分离的大肠埃希菌为研究对象,测定菌株对7种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)及检测其产超广谱3-内酰胺酶(ESBLs),为临床合理有效地应用抗生素提供依据;同时克隆aac(3)-II基因到pET26b,检测重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)_II对氨基糖苷类抗生素的耐药谱,为进一步研究aac(3)-II基因奠定基础。1材料和方法实验菌株及质粒收集从XX年2〜8月温州医学院附属第一医院临床送检的血液、腹水、尿液等无菌体

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