胡桃楸水提物对白色念珠菌生物膜形成抑制作用的研究

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1、江苏人学硕十学位论文中文摘要目的：探讨白色念珠菌生物膜对中药胡桃楸水提物的敏感性。白色念珠菌易在人体内形成生物膜且易对抗真菌药物形成耐药，因此首先应该对白色念珠菌在体外形成的生物膜进行形态学观察，以便进一步了解其相关特征。本研究通过体外形成白色念珠菌生物膜结构，观察白色念珠菌生物膜形成过程中不同时期的生长特点及形态特征，并以临床常用抗真菌药物两性霉素B和卡泊芬净为对照药物，比较中药胡桃楸水提物对白色念珠菌生物膜的作用效果，目的在探讨胡桃楸水提物对白色念珠菌生物膜的抑制作用，为临床治疗白色念珠菌感染提供理论依

2、据。方法：本实验采用6孔培养板，体外培养形成白色念珠菌生物膜结构，在显微镜下观察不同培养时间的生物膜结构特点。另采用96孔培养板，体外培养形成白色念珠菌生物膜，以结晶紫染色法分析生物膜体外生长动力学，以XTT还原法定量测定胡桃楸水提物、两性霉素B和卡泊芬净三种药物抑制白色念珠菌生物膜50％和80％细胞活性的最低药物浓度，比较三种药物抗白色念珠菌生物膜效力。结果：白色念珠菌生物膜内细胞数量随培养时间延长而增加，最初8h膜内细胞数量增加显著，培养48h时，生物膜内细胞数量达到最高并趋于稳定，镜下可见典型的成熟生

3、物膜结构。2h组与4h组，8h组与12h组，48h组与72h组之间无明显差别(P>0．05)，其他组问具有明显差异(P<0．05)。生物膜成熟时，细胞数量趋于平衡状态，但仍保持在高水平。随培养时间延长，白色念珠菌生物膜耐药性逐渐增强，而且对药物的浓度具有一定依赖性。生物膜48h成熟时，胡桃楸水提物、两性霉素B和卡泊芬净的SMICso分别是：1．36g／ml，2．0gg／ml，8pg／ml；SMICso分别是：1．84g／ml，3．6“g／ml，16gg／ml。结论：48h后白色念珠菌可在体外培养形成典型成熟

4、生物膜结构。白色念珠菌生物膜对两性霉素B耐药。卡泊芬净对成熟白念珠菌生物膜具有较强的抑制能力。胡桃楸水提物具有抑制初期白色念珠菌生物膜的作用，一般不能明显抑制48h成熟生物膜。关键词：胡桃楸水提物，白色念珠菌感染，生物膜，XTT还原法江苏大学硕士学位论文ABSTRACTObjectives：TodiscussthesensitivityofCandidaalbicansbiofilmtoextractofChinesemedicineJuglansmandshurica．Candidaalbicansbio

5、filmsiseasytoforminthehumanbodyandeasytoformresistancetoantifungalagents．Therefore，firstmorpHologicalobservationsshoudbecarriedoutinordertounderstandtherelevantfeature．ThisresearchobservesthegrowthandmorpHologicalcharacteristicsbymeansoftheformationofCandi

6、daalbicansbiofilmstructureinvitroindifferentperiodofCandidaalbicansandcomparestheeffectsofthethreeantifungalagentsonCandidaalbicansbiofilm，extractofChinesewalnut，ampHotericinBandcaspofungin，aimingtoinvestigatetheantibacterialeffectofextractofJuglansmandshu

7、ricaonCandidaalbicansbiofilmandprovideatheoreticalbasisforclinicaltreatmentofCandidaalbicansinfection．Nethods：Inthispaper,Candidaalbicansbiofilmmodelwasestablishedin6-wellcultureplates．Thestructuralcharacteristicsofdifferentperiodsbiofilmwereobservedthroug

8、hmicroscope．96-wellcultureplateswereadoptedtoculturethebiofilmstructureofCandidaalbicansandcrystalvioletstainingofbiofilmwasusedinvitrogrowthkinetics，andXTTreductionassaywasusedtoacquiretheconcentrationsofthe