抗原特异性th17细胞的分化与调节

《抗原特异性th17细胞的分化与调节》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、抗原特异性Th17细胞的分化与调节：杨静,贾磊,李丽,吴长有【摘要】目的:探讨影响抗原特异性Th17细胞分化和调节的因素。方法:T细胞受体转基因小鼠(DO11.10)CD4+T细胞,与同背景正常小鼠的脾细胞混合,经OVA多肽刺激后,在不同的Th17极化的培养条件下,观察Th17细胞及细胞因子的产生。结果:单纯OVA抗原刺激主要诱导特异性Th1型反应,在TGFβ和IL6存在的条件下,主要诱导Th17反应;当加入IL23之后,促进了Th17细胞的分化。阻断了IFNγ和IL4之后,Th17细胞的百分率明显增加。LPS可以促进Th1型细胞

2、因子的产生,但对抗原特异性Th17细胞的分化没有明显的促进作用。结论:抗原特异性Th17细胞是与Th1、Th2相对独立的细胞亚群,TGFβ、IL6和IL23可诱导或促进Th17的分化,而Th1和Th2细胞因子抑制其分化。【关键词】Th17T细胞亚群流式细胞术细胞因子　　[Abstract]AIM:ToassessthedifferentiationandregulationofantigenspecificTh17cellsinvitro.METHODS:NaveCD4+TcellsfromOVATCRtransgenicmic

3、e(OVATCRTg)normalBALB/cmiceunderdifferentcultureconditions.TheexpressionandproductionofIL17andothercytokinesainlyinducedTh1typeresponses.AdditionofTGFβplusIL6inducedTh17response.Furthermore,additionofIL23tocellculturecouldpromotethedifferentiationofTh17cells.Blocking

4、ofIFNγandIL4byneutralizingmonoclonalantibodiesenhancedthepercentageofIL17producingcells.LPScouldpromotetheproductionofTh1cytokinesbuthadnosignificanteffectonIL17expression.CONCLUSION:AntigenspecificTh17cellsaredistinctfromantigenspecificTh1andTh2cells.TGFβ,IL6andIL

5、23arethefactorsresponsibleforpromotingthedifferentiationanddevelopmentofTh17subset,etry;cytokine　　按照CD4+T细胞分化和功能特征可以将其分为Th1和Th2细胞[1]。Th1型细胞通过分泌干扰素γ(IFNγ)等细胞因子介导细胞免疫;Th2型细胞通过分泌IL4等细胞因子介导体液免疫[2,3]。Th1型免疫反应失调,出现组织损坏和慢性炎症,而Th2型免疫反应失调,则导致过敏和哮喘疾病的发生[3]。近年来,在类风湿关节炎、实验性自身免疫性脑脊髓炎

6、等自身免疫病和过敏原特异性反应研究中发现一种特殊的辅助型T细胞。这群CD4+T细胞同传统Th1和Th2细胞具有明显不同的特征:主要分泌IL17,表达控制其分化的独特的转录因子——孤独受体（orphannuclearreceptor,RORγt）[4],因此命名为Th17细胞。目前对于此细胞亚群的研究主要集中于其在疾病的发生发展中的作用,而探讨影响抗原特异性Th17细胞的诱导和分化因素的报道较少。为此,我们研究了体外培养体系中,初始抗原特异性TCRTgCD4+T细胞,经抗原刺激后,探讨影响Th17细胞的诱导、分化和调节的因素。为深入研究C

7、D4+T细胞免疫调节效应和探讨自体免疫性疾病等免疫学机制提供实验和科学依据。　　1材料和方法　　1.1材料OVA抗原特异性转基因BALB/c小鼠（DO11.10,TCRTg,雌性,6～8周龄）,购自实验动物中心。PerCP标记的抗CD4（PerCPCD4)、APC标记的抗IFNγ(APCIFNγ)、PE标记的抗IL17(PEIL17)均购自美国BD/Pharmingen公司。FITC标记的抗KJ1.26单克隆抗体(mAb)特异性识别转基因OVA抗原受体表达的细胞,购自CaltagLaboratories（CA)。Rebi

8、nantMurineIL6、humanIL2和TGFβ购自PEPROTECH公司。LPS和布雷菲德菌素(brefeldinA,BFA)购自Sigma公司。antiIFN