新的端粒酶相关蛋白t star在胃癌组织中的表达

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1、新的端粒酶相关蛋白TSTAR在胃癌组织中的表达【摘要】　　目的：探讨新的端粒酶相关蛋白（TSTAR)与胃癌发生、发展的关系.方法：用半定量RTPCR的方法检测32例人胃癌及相应癌旁组织中TSTARmRNA的表达水平.结果：TSTAR在胃癌组织及癌旁组织中的表达水平分别为4.28±1.31，1.62±0.56（P<0.01），低分化胃癌TSTAR的表达水平为4.75±1.13，显著高于中分化胃癌中的表达水平3.39±1.19（P<0.05）.结论：TSTAR在胃癌组织中高表达，且与病理分化程度相关，在胃癌的发生和发展中起重要作用.【关键词】胃肿瘤；逆转

2、录聚合酶链反应；TSTAR　　【Abstract】AIM:Todeterminea.METHODS:ThemRNAexpressionlevelsofTSTARintumortissuesandadjacentnontumortissuesin32casesofgastriccarcinomaicallyinvestigatedusingsemiquantitativereversetranscriptionPCR.RESULTS:ThemeanmRNAexpressionlevelsofTSTARensand1.62±0.56intheadjacentnon

3、tumortissuespecimens(P<0.01).TSTARa,oderatedifferentiatedhistologicaltype［(3.39±1.19),P<0.05］.CONCLUSION:TheexpressionlevelofTSTARingastriccancertissueishigherthanthatinadjacentnontumortissue.TheexpressionlevelofTSTARiscorrelateda.ThesefindingsindicatethatTSTARmightplayanimport

4、antroleinthecarcinogenesisandprogressionofgastriccarcinoma.　　【Keyachneoplasm；RTPCR；TSTAR　　引言　　端粒酶与细胞永生化和肿瘤的发生关系密切［1］.人类细胞端粒酶催化蛋白亚单位（hTERT）的转录调节是控制端粒酶活性的重要途径，端粒酶相关蛋白(testessignaltransductionandactivationofRNA，TSTAR)也可以通过正性或负性的方式调节端粒酶的活性.有研究表明，新的端粒酶相关蛋白TSTAR对结肠癌细胞的端粒酶活性呈正相调节［2］.我们采用半定量R

5、TPCR的方法检测TSTAR在胃癌组织及癌旁组织中的表达，旨在进一步探讨TSTAR在胃癌发生发展中的可能作用.　　1材料和方法　　1.1材料　　1.1.1组织标本　　收集空军总医院200405/200410经病理确诊、未经放化疗的手术或胃镜检查患者的胃癌组织标本32例按病理分型分为低分化癌组（低分化腺癌，印戒细胞癌等高度恶性的癌）21例；中分化癌组（中分化腺癌）11例及癌旁胃黏膜组织(距癌组织边缘≥5cm)(对照组)标本32例.将新鲜切除的手术标本或活检的胃镜标本立即置于液氮中，后转至-70℃冰箱保存备用.　　1.1.2主要试剂　　DEPC，Trizol，DNAM

6、arkerDMC50（北京赛百盛公司）；Promega反转录试剂盒，TaqDNA聚合酶，MgCl2，琼脂糖，dNTPs（美国Promega公司）；氯仿，异丙醇，750mL/L乙醇（北京化学试剂厂，由解放军第304医院烧伤研究所实验室提供）；TSTAR和三磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde3phosphatedehydrogenase,GAPDH）引物（由上海生工合成）.　　1.1.3主要仪器　　冷冻离心机Biofuge17RS西德；LG15gCl2，1.25μLdNTPs，3.0μL上游及下游引物，2.5μLcDNA模板，32.25μL去酶水，0.5μ

7、LTaq酶，反应条件为：94℃，30s；52℃，30s；72℃，60s，共35个循环.所得产物保存于-20℃，以备电泳分析.　　1.2.5琼脂糖电泳分析　　将PCR产物在12g/L的琼脂糖凝胶中电泳，电压为100V，电流约30mA.采用DMC50（共6条带：50，150，300，500，800，1000bp）作为分子量标准，将产物同预计的大小进行比较，所得结果扫描入计算机.　　统计学处理：用Bandscan5.0对电泳结果进行灰度值分析，用t检验检测组间的差异.首先比较胃癌及癌旁组织GAPDH表达的差异，然后检测