2014届新课标高考生物总复习配套课件：选修1-2微生物的培养与应用

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1、专题2微生物的培养与应用一、微生物的分离与培养1．培养基的概念：指按照微生物对营养物质的不同需求，配制的供其生长繁殖的营养基质。包括、半固体培养基和。2．培养基的营养构成：各种培养基的基本配方一般都有水、碳源、氮源和无机盐。固体培养基液体培养基4．平板培养基的制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。5．实验操作(1)倒平板操作①培养基需冷却至左右时开始倒平板。a．原因：琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。b．估计培养基温度的方

2、法：培养基从灭菌锅中取出冷却一段时间后用手触摸，感觉上以不烫手为准。②平板倒置原因：培养皿盖上会凝结水珠，培养基表面的温度也较高，平板倒置后，既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。50℃③注意事项：倒平板时不要将培养基溅在皿盖与皿底之间，否则此培养基不能用来培养微生物。(2)平板划线操作：通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种到培养基的表面。(3)稀释涂布平板法：将菌液进行系列稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成，从而能在培养

3、基表面形成。(4)分离某种特定微生物：用，允许特定种类的微生物生长，其他种类微生物生长。连续划线逐步稀释分散单个细胞单个的菌落选择培养基同时抑制或阻止二、微生物的鉴定及数量的测定1．每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。2．鉴定分解尿素的细菌的方法：在以为唯一氮源的培养基中加入指示剂，指示剂若说明该菌种能分解尿素。3．鉴定纤维素分解菌的方法：利用染色法，如果培养基中出现，则说明很可能含有纤维素分解菌。纤维素

4、分解菌的筛选原理：刚果红可以与物质形成红色复合物，但并不和水解后的发生这种反应。菌落数尿素酚红变红刚果红透明圈纤维素多糖纤维二糖和葡萄糖4．土壤中纤维素分解菌的分离实验方案(1)土壤取样：采集土样应选择富含的环境。(2)选择培养：称取土样，在无菌条件下装入锥形瓶，在一定条件下振荡培养1～2d，直到培养液浑浊。选择培养的目的是，确保分离得到所需的微生物。(3)梯度稀释：依次将培养液稀释10～107倍。(4)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，30℃倒置培养。(5)挑选产生的菌落，即为分解纤维素的菌落。纤

5、维素增加纤维素分解菌的纯度透明圈(教师资源·备选题库)1．(2013年黄山模拟)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。答案：C2．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A．接种环、手、培养基B．高压锅、手、接种环C．

6、培养基、手、接种环D．接种环、手、高压锅解析：一般说来灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，操作者的手需要消毒。高压蒸汽灭菌锅是灭菌设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。答案：C3．(2013年深圳模拟)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是(

7、)A．利用平板划线法对细菌进行计数B．以石油为唯一碳源的培养基筛选C．采用稀释涂布平板法分离菌种D．称取和稀释土壤时应在火焰旁解析：平板划线法能对细菌分离、纯化，但不能进行细菌的计数；由题干信息看出，要筛选出能分解石油的细菌只能以石油作为唯一碳源的选择培养基进行筛选；通常采用稀释涂布平板法分离能分解石油的细菌菌种并且进行计数；为了防止空气中的杂菌进入土样中，称取和稀释土壤时应在火焰旁进行。答案：A4．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是()A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．富集

8、培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少C．经稀释培养后，用刚果红染色D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上解析：经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。答案：A考点一　培养基与微生物纯培养技术1．培养基的分类及应用[特别提醒](1)固体、半固体培养基的凝固剂一般不是微生物的营养成分，只起固定