高效液相色谱法用于有机农药残留的分离和分析

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1、华南师范大学实验报告学生姓名：学号：专业：化学教育年级班级：课程名称：近代有机分离分析实验时间：2012年10月24日实验项目：高效液相色谱法用于有机农药残留的分离和分析实验指导老师：曾志老师实验评分：【实验目的】1、应用高效液相色谱法对磺胺类抗生素的定性和定量检测。2、学习谱图和数据的处理方法。【实验原理】磺胺族抗生素包括磺胺嘧啶，磺胺二甲嘧啶，磺胺甲噁唑，等，被广泛应用到水产、畜禽类养殖中。它们被添加到动物饲料中，以促进动物的生长以及防治各种疾病，如果不能严格控制停药期，很容易造成在动物肉和

2、组织中残留，给人体健康带来危害，因此世界各W对畜禽肉中的磺胺族残留都有严格的限量耍求。GB/T5009.116-2003用液相色谱法检测畜禽肉中的磺胺类药物残留量，操作简单快速，但是该方法灵敏度比较低。【实验仪器与试剂】仪器：岛津液相色谱仪，SPD-20A检测器，LC-20AT泵，微量进样器，C18色谱柱部分物理参数：试剂：磺胺嘧啶标准溶液，磺胺毗啶标准溶液，磺胺嘧啶-磺胺毗啶混合液，乙腈(AR)，0.05%甲酸溶液样品分子式分子量熔点外观溶解性磺胺嘧啶C10H10N4O2S250.282522

3、58°C白色或类白色结晶或粉末，无臭无味，遇光色渐变暗溶于稀盐酸，微溶于乙醇或丙酮，几乎不溶于水，易溶于氢氧化碱溶液或氨溶液磺胺毗啶ChHhN3O2S249.49191193°C黄棕至白色粉末微溶于水【实验步骤】1、准备1.1准备所需的流动相，用合适的0.45um滤膜过滤，超声脱气20min。（这里用的是流动相是乙腈（B）和0.05%甲酸溶液（A），分别用有机相系和水相系的0.45Mm滤膜过滤，超声脱气20min。）1.2根据待检样品的需耍更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。1.3配制样品浓度

4、为lOOOppm（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45inn滤膜过滤。（即分别称取0.10g的磺胺嘧啶、磺胺毗啶用甲醇定容至100.0mL,用0.45Wn滤膜过滤（先在一次性注射器加上0.45Rn滤膜，然后把活塞杆拉出来，把耍过滤的溶液倒进去再把杆推进滤出溶液。）得到磺胺嘧啶和磺胺毗啶的分别为1mg/mL（lOOOppm）。分别吸取磺胺嘧啶和磺胺吡啶标准溶液各5mL,置于10mL容量瓶中磺胺毗啶和磺胺嘧啶-磺胺毗啶混合0.5mg/mL（500ppm）o1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输

5、液管道是否连接正常。2、开机接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站（即电脑桌而上的CS-LightRealTimeAnalysis）o3、参数设定3.1波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按［func］键接着按［Enter］键，用数字键输入所需波长值281nm,按［Enter］键确认。按［CE］键退出到初始屏幕。3.2流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按［fund键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1.

6、0mL/min）,按［Enter］键确认。按［CE］键退出。3.3流动和比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按［cone］键，用数字键输入流动相B乙腈的浓度百分数（20%），按［Enter］键确认。按［CE］键退出。4、更换流动相并排气泡3.1将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；3.2逆时针转动A/B泵的排液阀180°,打开排液阀；3.3按A/B泉的［purge］键，pump指示灯亮，泉大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4.4将排液阀顺时针旋转到底，

7、关闭排液阀。4.5如管路屮仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。4.6如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按［pump］键，冲洗3min后再按［pump］键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。5、平衡系统4.1按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开"在线色谱工作站"软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下"数据收集"页的［查看基线］按钮。5.2等度洗脱方式4.2.1按A聚的［pump］键，A、B聚将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法

8、规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。按A泵的［pump］键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。5.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。5.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过IMPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.6操作。5.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移〈O.OlmV/min,噪声为〈O.OOlmV吋，可认为系统己达到平衡状态，可以进样。6、进样5.1进样前在CS-