bmi-1在胰腺癌中的表达及其临床意义

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1、Bmi-1在胰腺癌中的表达及其临床意义容海鹰1杨元生1彭卫斌1朱雅丽1黄开红2(1广州新海医院消化内科广东广州510300)(2中山大学附属第二医院消化内科广东广州510120)【摘要】目的探讨Bmi-1蛋白在胰腺癌组织的表达情况及其临床意义。方法收集2002年1月至2009年1月间有3年以上保存完整病历资料的胰腺癌术后患者81例，所有病例均经术后组织病理学确诊，且不合并其他系统肿瘤转移,采用免疫组化法对胰腺癌组织标木进行染色，所有组织标木均经10%甲醛固定，石蜡埋，用S-P免疫组化方法检测胰腺癌组织Bmi-1蛋白的表达情况。结果免疫组化分析表明

2、胰腺癌组织存在Bmi-1蛋白的过度表达；Bmi—1蛋白在胰腺癌组织的表达中阳性率为75.3%(61/81)。Bmi—1的表达与胰腺癌大小、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<O.05),而与患者性别、年龄、肿瘤分化程度等无(P>O.05)Bmi-1阳性患者生存率明显低于Bmi-1阴性患者(P<0.01)。结论在胰腺癌组织中有Bmi-1蛋白的表达，其阳性表达情况与胰腺癌患者寿命及肿瘤细胞浸润转移密切相关，可作为判断胰腺癌患者预后的指标。【关键词】Bmi-1蛋白胰腺癌基因表达生存率【中图分类号】R730.23【文献标识码】A

3、【文章编号】2095-1752(2012)11-0360-02胰腺癌是我国常见的恶性肿瘤之一，異有发病隐匿、易转移和死亡率高等特点［1］。近年来，我国经济发展迅速，生活条件明显改善，已进入老龄化时代,而胰腺癌主要发病人群为60岁以上的老年人。胰腺导管腺癌发生的基因改变括K-ras、HER/2-eu,TP53、DPC4、ALK5和TGFβR2等［2〜5］,这些癌基因的发现对提高胰腺癌诊断水平、评估恶性程度、预测复发转移及鉴別高危人群有重要的指导作用。有学者曾经提出Bmi-1的高表达与胰腺癌临床病理特征有一定关系.因此木研究目的是探讨胰腺癌

4、组织中Bmi-1的表达情况，以及Bmi-1与胰腺癌临床病理特征、胰腺癌病人预后之间的相关性。1研究方法1.1临床资料收集2002年1月至2009年1月间我院及中山大学附属第二医院共81例胰腺癌根治术后患者，所冇患者均经术后组织病理学确诊为胰腺癌，且不合并苏他系统肿瘤性疾病。所有患者术前均未接受化疗和放疗，苏中男性46例(56.8%)，女性35例(43.2%)，年龄35〜85岁，中位年龄62岁。对81例患者进行了为期3年随访，收集患者的临床资料，包括手术日期、生存状况、死亡日期。胰腺癌切除标本分成2份：一份用10%甲醛固定，行病理学相关检查；另一份

5、经10%甲醛固定，石蜡包埋，用S-P免疫组化方法检测Bmi-1蛋白的表达情况。1.2免疫组化检测方法将胰腺癌标本石蜡连续切片、脱蜡，每块取4μm厚，应用乙醇梯度水化，每块切片滴加3%H2O2去离子水，用EDTA(pH=8.0)修复液进行抗原修复,然后将组织切片微波炉中高火5min、解冻2min、中低火20min加热，待其自然冷却，接着漂洗3次，每次应用磷酸盐缓冲液(PBs)漂洗3min,然后加入正常山羊血清，室温封闭15min;甩去PBS液，加入第一抗体(鼠抗人Bmi-1,1:150)溶液50μl,4°C孵育过夜；再用PBS冲洗三次，

6、每次5min然后甩去PBS液，加入生物素化通用二抗工作液1滴或50μl,室温下孵育lOmin;再用PBS冲洗三次，每次5min后甩去PBS液，加入辣根酶标记链霉卵白素液1滴或50μl,室温下孵育lOmin；再用PBS冲洗三次，每次3min后甩去PBS液，加入新鲜配制的DAB2滴或100μl,显色lOmin，显微镜下观察3〜lOmin。黄色。1.3评定标准细胞核内呈现棕黄色或棕褐色颗粒是Bmi-1阳性表达，也有的表现在胞质内呈现棕黄色颗粒。高倍镜下(10×20)随机取4个不同的视野，计数细胞总数及核阳性细胞数，按阳性细

7、胞所占的百分比(P)计分：阳性细胞率<10%为1分，阳性细胞率>10%H≤50%为2分，阳性细胞率>50%且≤75%为3分，阳性细胞率>75%为4分；同吋，根据染色的强弱程度(I)也计分：阴性1分，弱染色2分，中等强度染色3分，强染色4分。通过二者的乘积来判断结果.•≤4分为(_);>4H≤8为(+);>8且≤12为(++)；>12且≤16为(+++)；以上结果由至少两位病理科医生在双盲情况下观察所得。(++)、(+++)定义为强阳性。1.4统计学处理所得数据百分率比较

8、用χ2检验，所冇统计学分析均在SPSS16.0下运行，检验水准α=0.05。2结果2.1免疫组化分析结果81例胰腺癌