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时间:2018-10-13
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1、细胞工程知识点植物细胞工程1.理论基础(原理):全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞2.植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→胚状体―→植物体名称过程形成体特点培养基光脱分化由外植体脱分化为愈伤组织生长素与细胞分裂素的比例避光再分化由愈伤组织分化为有根、芽或有生根发芽的能力上述比例需光营养生长生殖生长发育成完整的植物体由根、茎、叶、花、果实、种子组成自身产生各种激素需光(2)用途:微型繁殖、作物脱毒(材料:)、制造人工种子(培养至)、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产(培养至)。(3)地位:是培育转基因
2、植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术(1)过程:注:杂种细胞的染色体数等于两个杂交细胞的。(2)原理:(3)诱导融合的方法:物理法包括等。化学法一般是用作为诱导剂。(4)意义:。动物细胞工程41.动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的,将它分散成,然后放在适宜的中,让这些细胞。(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(的器官或组织)→剪碎→用处理分散成单个细胞→制成→转入培养瓶中进行→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续。原代培养(10代以内):遗传物质传代培养(10代以后):遗传物质(
3、3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就,称为(只有一层细胞)。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面时,细胞就会,这种现象称为。(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行处理。通常还要在培养液中添加一定量的,以防培养过程中的污染。此外,应,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、、无机盐、等。通常需加入等天然成分。③温度:适宜温度:哺乳动物多是;pH:。④气体环境:95%+5%。O2是所必需的,CO2的主要作用是。(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、、、培养医学研究的各种细胞。(6)植物组织培养
4、与动物细胞培养的比较植物组织培养动物细胞培养原理细胞全能性细胞增殖培养基的物理性质培养基的成分结果新的植株或组织新的细胞系或细胞株应用微型繁殖;作物脱毒;生产人工种子;生产细胞产物蛋白质生物制品的生产;检测有毒物质等条件均需无菌操作、需适宜的温度、pH、氧气等条件4①两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂。②植物组织培养最终产生新个体,体现了细胞的全能性;动物细胞培养产生大量细胞,不形成新个体,故不能体现细胞的全能性。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难
5、)。(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。(3)体细胞核移植的大致过程是:(右图)a为核移植b胚胎移植(4)体细胞核移植技术的应用:①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;②保护濒危物种,增大存活数量;③生产珍贵的医用蛋白;④作为异种移植的供体;⑤用于组织器官的移植等。(5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。3.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的核细胞,称为。(2)动物细胞融合与植物原生质体
6、融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。(3)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合物理法:离心、振动、电激4化学法:聚乙二醇克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇生物法:灭活病毒制备单克隆抗
7、体的技术之一实质改变遗传物质、产生新的性状、获得细胞产品,使后代具有双亲的特性4.单克隆抗体(1)抗体:一个B淋巴细胞只分泌一种。从血清中分离出的抗体具有。(2)单克隆抗体的制备过程:注入小鼠细胞融合分离抗原注入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养选择培养细胞培养基体内培养体外培养从腹水提取从培养液提取单克隆抗体(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量,又能产生。(4)单克隆抗体的优点:。(5)单克隆抗体的作用:①:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有的优点。②:主要用于治疗癌症治疗,可制成“”,也有少量用于
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