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时间:2018-10-10
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1、当归补血汤对防治不同血虚证的作用张三、李四、王五(××大学,××班)[摘要]目的:通过实验了解血虚证的造模方法和当归补血汤的组方和作用。并掌握氰化高铁血红蛋白测定法及溶血素(抗体)测定实验。方法:在当归补血汤对环磷酰胺致小鼠血虚的防治作用的实验中,采用溶血素测定实验测抗体含量、氰化高铁血红蛋白测定法测血红蛋白含量。在当归补血汤对放血法致小鼠血虚的防治作用的实验中,采血检测血红蛋白含量并进行溶血素(抗体)测定实验。结果:两种造模方法的对照组小鼠出现行动迟缓,嗜睡,困缩弓腰,耳尾苍白而凉,毛蓬竖而少光泽的症状;而正常组
2、和用药组均无此症状。两种造模方法的对照组的小鼠的血红蛋白和溶血素(抗体}含量都比正常组低,经用当归补血汤治疗后含量都升高。结论:当归补血汤的确具有升高血红蛋白、增强免疫的作用,从中医来讲具有补益气血的功能。[关键词]当归补血汤;血虚证;测定;血红蛋白当归补血汤为临床常用补血汤之一。本法现代主要用于贫血、白细胞减少证、对抗化疗副作用等。据中医理论认为,,有形之血生于无形之气,重用黄芪大补脾肺之气,以资气血生化之源,当归养血和营,如此则阳生阴长,气旺血生,是当归补血汤的配伍特色。本文就当归补血汤对不同血虚证的作用进行研
3、究。1实验材料1.1药物当归补血汤煎剂(黄芪:当归=5:1,每毫升含生药1g)、生理盐水、阿氏液、血红蛋白转化液、环磷酰胺、蒸馏水、补体(豚鼠血清)、鸡红细胞悬液、标准血红蛋白1.2主要工具2ml注射器、天平、吸管、吸球、移液器、血红蛋白吸管、洁净纱布、试管、灌胃针头1.3主要仪器离心机、恒温箱、分光光度计1.4动物雄性小鼠30只,体重18~22g;豚鼠,雌雄皆可。2方法与结果2.1当归补血汤对环磷酰胺致小鼠血虚的防治作用2.1.1将小鼠随机分成三组:正常组、对照组、用药组,每组10只,均喂以普通饲料,自由饮水。2
4、.1.2对照组、用药组动物腹腔注射以环磷酰胺1mg/10g,1次;正常组腹腔注射以生理盐水1mg/10mg,1次。用药组用当归补血汤煎剂,每天0.5ml/20mg灌胃,1天;正常组、对照组用生理盐水每天0.5/20mg灌胃,1次1次,共5天。2.1.3采血检测血红蛋白含量,并进行溶血素(抗体)测定实验。溶血素(抗体)测定实验步骤:在试管中加入1ml生理盐水,取小鼠全血20μl,加5%鸡血红细胞悬液0.5ml、补体0.5ml。将试管(上盖塑料薄膜)置入37℃水浴箱30分钟,离心2500rpm)15分钟,取上清液倒入比
5、色杯中。以空白管调“0”,测定吸光度。结果表明,对照组小鼠的抗体含量比正常组低,经用当归补血汤之后,小鼠的抗体含量都比正常对照组有所增加,故当归补血汤的确具有增强免疫的作用。2.1.4用氰化高铁血红蛋白测定法测定血红蛋白(单位g/L):取血20μl,加到0.5ml血红蛋白转化液中,混匀,静置5分钟。用分光光度计比色,波长540nm,光径10.0nm,以空白转化液调零,测定吸光度“A”。用定值为50g/L、100g/L、150g/L、200g/L的HiCN参考液,在分光光度计上测定吸光度“A”,在标准计算纸上绘制Hi
6、CN标准曲线,用所测吸光度“A”在坐标纸上查出相应的蛋白含量。由结果可得,对照组小鼠的血红蛋白含量比正常组低,经用当归补血汤之后,小鼠的血红蛋白含量都比正常对照组有所增加,说明当归补血汤的确具有升高血红蛋白的作用。2.2当归补血汤对放血法致小鼠血虚的防治作用。2.2.1将小鼠随机分成三组:正常组、对照组、用药组,每组10只,均在天平上称重,喂以普通饲料,自由饮水。对照组和用药组皆以摘眼球法放血0.5ml;正常组不做任何处理。2.2.2放血后,用药组用当归补血汤煎剂,每天0.5ml/20mg灌胃,1天;正常组、对照组
7、用生理盐水每天0.5/20mg灌胃,1次1次,共5天。2.2.3采血检测血红蛋白含量,并进行溶血素(抗体)测定实验。步骤同上。有结果可得,对照组小鼠的抗体含量比正常对照组低,经用当归补血汤之后,小鼠的抗体含量都比正常对照组有所增加,故当归补血汤的确具有增强免疫的作用。2.2.4用氰化高铁血红蛋白测定法测定血红蛋白(单位g/L),步骤同上。由结果可得,对照组小鼠的血红蛋白含量比正常组低,经用当归补血汤之后,小鼠的血红蛋白含量都比正常对照组有所增加,说明当归补血汤的确具有升高血红蛋白的作用。2.2.5将小鼠处死,取出脾
8、脏,称重,算出脾指数。由结果可得,对照组小鼠的脾指数比正常组低,经用当归补血汤之后,小鼠的脾指数都比正常对照组有所增加,说明当归补血汤的确具有补血的作用。3统计表1组别n血红蛋白(g/l)抗体(OD)值脾指数(mg/g)化学法放血法化学法放血法化学法放血法正常组6117.25117.250.040.044.84.8模型组6115.88116.380.040.
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