脊髓组织缺血再灌注早期mda和sod的动态变化

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1、脊髓组织缺血再灌注早期MDA和SOD的动态变化【关键词】缺血再灌注；自由基；超氧化物歧化酶；动物，实验；丙二醛　　ABSTRACTObjectiveTostudytheearlycontentchangesofmalonyldialdehyed(MDA)andtheearlyactivitychangesofsuperoxidedismutas(SOD)afterspinalcordischemiareperfusion,andtodiscusstheeffectoffreeradicalinspinalcordsecondaryinjuries.Me

2、thodsAbdominalaorticcorss-clampingedin48adultmaleSprague-Daiareperfusionmodel;thecontentofMDAandtheactivitiesofSODinspinalcordeasured1h,6h,12h,18hand24hafterreperfusion.ResultsThecontentofMDAincreasedimmediatelyafterreperfusionandreachedthepeak6hafterreperfusion,thenitstarteddec

3、reasing,butitiareperfusion.　　KEYDA）含量及超氧化物歧化酶（superoxidedismutas,SOD）活性的变化规律，以探讨脊髓继发性损伤的病理机制。　　1材料与方法　　1．1动物分组及模型建立　　48只健康成年雄性SD大鼠，体重200～250g，随机分为缺血前（假手术组）、缺血再灌注后1h、6h、12h、18h、24h组，共6组，每组8只。所有动物均经腹腔注射1%戊巴比妥钠（60mg/kg）麻醉，麻醉后常规消毒，左侧腹部背最长肌外侧缘直切口，解剖分离腹主动脉,于左肾动脉下方夹闭腹主动脉40min，然后开放腹主动脉，

4、关闭腹腔，造成脊髓缺血再灌注模型。缺血前组除不夹闭腹主动脉外所有操作相同。　　1．2脊髓组织内自由基含量和超氧化物歧化酶活性检测　　分别于缺血前、缺血再灌注后1h、6h、12h、18h、24h等各时相点断头处死动物，取脊髓组织（L2～3），用冰生理盐水洗去残血，拭干。MDA采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法，利用722分光光度计于波长532nm测定。SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法，操作步骤按说明书进行。　　1．3统计学方法　　使用SPSS10.0统计软件包，所有参数用均数±标准差(±s)表示，各组间采用成组设计的t检验比较。　　2结果　　2．1脊髓组织MD

5、A含量及SOD活性变化　　见表1。表1脊髓缺血再灌注后脊髓组织中MDA含量及SOD活性(略)注：△与假手术组比较Ｐ＜0.05缺血前MDA为4.57±0.38μmol/g；SOD为79.42±2.25nu/mg。缺血后脊髓组织内MDA含量1h即见上升，6h升至最高峰，达18.98±2.37μmol/g，此后缓慢下降，24h仍高于缺血前（Ｐ＜0.05）。SOD活性缺血前最高，缺血再灌注后迅速下降，6h达最低，为44.13±3.27nu/mg，以后逐渐回升，24接近缺血前水平（Ｐ＞0.05）。　　2．2MDA与SOD相关性　　表1结果表明，脊髓缺血再灌注后脊

6、髓组织MDA含量与SOD活性间的相关系数r=-5.58，即二者之间呈负相关（Ｐ＜0.05），表现为再灌注早期MDA含量上升，SOD活性相应减少，随着MDA含量逐渐下降，SOD活性接近正常。SOD是自由基的重要清除酶之一，它除通过催化O2-歧化反应，发挥抗氧自由基外，还可增强H2O2浓度的调节功能保护组织细胞。SOD活性可反映机体对氧自由基清除能力的高低。从本实验可以看出：SOD在缺血前活性最强，再灌注后迅即降低，至6小时降至最低，此后逐渐回升。表明SOD也参与了脊髓缺血再灌注损伤的病理过程。我们还发现，在整个再灌注期，SOD活性与MDA含量呈现负相关（

7、相关系数=-5.58），说明SOD活性的下降与其清除氧自由基时的消耗有关。有学者［4］证实自蛛网膜下腔注射SOD有减轻脊髓继发损伤，促进脊髓功能恢复的作用。此外我们注意到,至再灌注后24h,MDA含量仍高于正常而SOD活性已恢复到接近正常,可能与体内其它抗氧化系统激活后SOD消耗减少有关。有［5］对缺血再灌注早期脊髓组织进行病理学观察后发现，脊髓组织在再灌注后数分钟即可发生水肿，此过程可持续数天，但6h最明显，表现为大量线粒体扩张，嵴减少、断裂、空泡变性，核仁解体，核染色质消失。本实验证实缺血再灌注后脊髓组织MDA含量最高和SOD活性最低均发生在6h处

8、，与上述结果近似，因此我们认为，脊髓缺血再灌注后的病理改变与脂质过氧化反应密切相关，同时对于脊