牛血样中布氏杆菌菌病的血清学试验

牛血样中布氏杆菌菌病的血清学试验

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1、牛血样中布氏杆菌菌病的血清学试验  布鲁氏杆菌病,起初叫法不统一,有许多的名称:有按学者名称叫的。如布鲁氏杆菌病,斑格氏病,有按地区起名叫的,如马尔他热,地中海热,地中海弛张热:有按临床表现命名的,如波张热,波浪热,浪热病,懒汉病;有按兽名叫的,如羊儿病,山羊热;还有的按病原学叫的,如布氏杆菌病。实际上这些名称都不够合适,因为本病不是地中海的地方病。大量的临床资料统计,具有典型波浪热的患者只占20%,不仅山羊的病,绵羊同样也能患病,布鲁氏杆菌属于革兰氏阴性菌,无芽胞,抵抗力和其他不能产生芽胞的细菌相近。1%

2、来苏尔或2%福尔马林或5%生石灰乳均可杀死。直射阳光0.5-4小时杀死。在干燥的土壤内37天死亡,在冷暗处、胎儿体内可活6个月,在粪水中的存活力很强。  布氏菌是1886年英国医生布鲁氏在马尔他岛死于地中海热的尸体脾脏标本上用显微镜观察到大量的微小菌体。1887年布鲁氏首先成功的分离到病原体的的纯培养,命名为马尔他球菌,即羊种布氏菌,自此时带来了对该病的系统研究。布病是有布氏杆菌属所引起的一种人蓄共患产染病,呈急性经过,易于过渡到慢性,临床上以发热,骨关节或肌肉疼痛以及脏器的损害与经常复发为特征。  传染源

3、:布氏杆菌病是由布鲁菌引起的人兽共患传染病。在家畜中,牛、羊、猪发生,且可传染给人和其他家畜。其特征是生殖器官和胎膜发炎,引起流产、不育和各种组织的局部病灶。重要通过消化道,经皮肤,结膜,交配等感染传播。混虫也可以传播本病。病畜及带菌者。最危险的是受感染的妊娠母畜,它们在分娩和流产时将大量的布鲁氏菌随着胎儿,胎水和胎衣排出。此外,布鲁氏菌也可以通过精液,乳汁,尿液感染。人的传染源主要是患病动物,一般不由人传染给人。  流行特点:在我国,人感染严重的地区是羊布氏杆菌病多发的地区。一般牧区人的感染率要高于农区,

4、有明显的职业特征:只要与患病动物的毛,皮,乳肉,血液等接触频繁的人员发病率要高的多。  1材料与方法  1.1试验材料  1.1.1被检血清  从塔县各乡家畜中采集血清,其中牛血清164份,其余牛血清各乡提前采集并保存冰箱待检。  1.1.2诊断液  布鲁氏菌病标准阳性血清,阴性血清,平扳凝集抗原(虎红),抗原喀什地区动物疾控中心提供的。  1.1.3主要仪器  平面玻璃扳,微量移液枪。  1.1.4检测方法及判定标准:  按照中华人民共和国国家标准动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646-2002内规定的

5、虎红平扳凝集试验。  1.2试验方法  1.2.1虎红平板凝集试验  它是一种半定量的凝集反应试验。所用抗原是用虎红(四氯四碘荧光素)色素染成的一种酸性抗原,具有克服非特异性反应,对检查小分子抗体lgG较为敏感的特点。  1.2.2虎红平板凝集抗原的制备  1.2.3缓冲液及虎红染料的配制  1.2.4缓冲液  称取氢氧化钠12克,加如含有0.5%石炭酸的生理盐水200毫升,待溶解后加入54毫升浓硫酸,并用0.5%石炭酸生理盐水补足至6,000毫升。  1.2.5虎红染液  虎红有钠盐钾盐两种,本试验以用钠

6、盐者为佳。虎红钠盐分子式:C20H2O5I4Na2,分子量为1017.718染料配制:称取虎红纳盐0.4克,加入38.6毫升的灭菌蒸馏水中,充分混匀,置40C冰箱保存备用。  1.2.6虎红平板凝集试验(RBPT)方法  在清洁的玻片上加0.03毫升的受检血清,然后在加入标化抗原悬液0.03毫升,使充分混匀,在4分钟内观察结果,以出现可见的凝集反应为阳性。  2结果与分析  人,牛,马及骆驼的待检血清的凝集价在1:100(++)以上者为阳性,1:50(++)为可疑;绵羊,山羊,猪及犬的待检血清,在1:50(

7、++)以上为阳性,1:25(++)为可疑。对可疑反应的人或动物应在10~20天内在重复检查,以进一步确定诊断结果。做虎红平板凝集实验4份牛血清为阳性,其余全部为阴性。  3讨论  3.1检测结果  本次调查是在血清学检测基础上对塔什库尔干县家畜布病进行调查和采样。其中检菌没有分离到布鲁氏菌,检测血清,平均阳性率上述1.82%.调查证实布病在塔什库尔干县部分地方确实存在,但是感染程度较低。  3.2应对措施  3.2.1做好布氏杆菌病菌苗接种措施  在布氏杆菌病疫情发生的地区,应采取免疫接种办法。特别应注意的

8、是,对怀孕的牛免疫接种,易引起流产,因此菌苗接种应在配种前进行。养殖户给牛免疫接种时,最好是在当地兽医人员的指导下,按疫苗生产厂家提供的布氏杆菌苗说明书实施免疫。  3.2.2做好自身防护  作为农牧民来说,做好自身的防护工作尤为重要。因此,饲养人员无论在平时的饲养和防疫过程中,一定要把安全放在首位,要有无菌观念。消毒措施要严格、彻底,以防后患。

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