常用培养基的配置

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1、常用培养基的配制泰兴市人民医院检验科微生物室刘鸿丽培养基的种类1.按物质组成①天然培养基②半合成培养基③合成培养基2.按物理性状①液体培养基②半固体培养基(0.2%---0.5%琼脂)③固体培养基(1.5%~2.0%琼脂)培养基的种类按用途基础培养基营养培养基鉴别培养基选择培养基厌氧培养基1.培养基的制备1.调制与溶解2.调节pH3.过滤澄清4.分装5.灭菌6.质量检查7.保存培养基的调配与溶解调配:先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,按培养基的配方准确称取各成分,混悬于蒸馏水中,然后用剩余的水冲洗瓶壁。溶解:将各成分混匀于水中,加热至各成分均溶解溶解过程中应随时搅拌。培养基

2、制备培养基的PH调节培养基PH是细菌生长繁殖的重要条件。由于不同细菌对PH的要求不同,所以不同培养基所需PH不同。一般培养基PH为7.2~7.6,也有酸性或碱性培养基。培养基经高压灭菌后,PH降低0.1~0.2,调PH时应高于所需PH0.1~0.2。具体方法有PH试纸法、电子PH计法和比色法等。培养基的制备培养基的分装与灭菌分装:根据需要将培养基分装于事先洗净的适宜容器中。其分装量最多不超过容积的二分之一。培养基分装后,用清洁的塞子塞好,并用纸包扎后灭菌。有些培养基需高压后再进行分装,此时必须采用无菌操作方法,用前应作无菌检查。灭菌:高压蒸汽法灭菌是目前最可靠的方法。培

3、养基的灭菌温度和时间,随培养基的品种、装量和容器的大小而定。培养基的制备培养基的检定一般性状检查:颜色、透明度、PH等。无菌试验效能试验:使用标准菌株,观察其生长繁殖和生化反应情况。培养基的制备一、麦康凯琼脂【用途】用于分离革兰氏阴性杆菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的麦康凯琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中,经高压灭菌后(121℃15分钟)冷却至50℃,倾倒平板,冷却后,放冰箱保存。【质量控制】选择性生长:大肠埃希菌ATCC25922生长红色混浊菌落伤寒沙门菌ATCC14028生长无色透明菌落福氏志贺菌ATCC12022生长无色透明菌落二、SS琼脂【用途】用于分离沙门

4、菌和志贺菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的SS琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中,煮沸待完全溶解,冷却至50℃,倾倒平板。冷却后,放冰箱保存。【质量控制】选择性生长:大肠埃希菌ATCC25922部分抑制生长红色混浊菌落伤寒沙门菌ATCC14028生长中心黑色菌落三、沙保弱琼脂【用途】用于分离真菌【配制方法】称取购买的梅里埃公司的沙保弱琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中,经高压灭菌后(121℃15分钟)冷却至50℃,倾倒平板,冷却后,放冰箱保存。【质量控制】选择性生长:白色念珠菌ATCC10231生长大肠埃希菌ATCC25922生长部分或完全抑制四、双糖【用途】用于鉴定细菌

5、分解葡萄糖和乳糖的试验。【配制方法】称取购买的梅里埃公司的双糖琼脂粉g溶解于500ml蒸馏水中,煮沸待完全溶解,分装试管,每管约4ml,塞上塞子,包装后高压灭菌(121℃15分钟)后取出,放置斜面,冷却后,放冰箱保存。【质量控制】质控菌ATCC25922大肠埃希菌A/AATCC27853铜绿假单孢菌K/K阴沟肠杆菌K/A奇异变形杆菌K/H2S五、半固体【用途】用于观察细菌的动力。【配制方法】称取购买的梅里埃公司的半固体琼脂粉g溶解于400ml蒸馏水中,煮沸。待完全溶解,分装试管,每管约2-3ml,塞上塞子,包装后高压灭菌(121℃15分钟)后取出,冷却后,放冰箱保存。【

6、质量控制】质控菌阳性对照ATCC27853铜绿假单孢菌阴性对照肺炎克雷伯菌培养基制备的注意事项1.在调配溶解培养基成分时,可先在烧瓶加入少量蒸馏水,再加入其他成份,以防止加热时瓶底烧结。2.制备培养基不可用铁、铜器皿,以免铁、铜离子进入培养基抑制细菌的生长或细菌毒素的产生。3.需要在培养基中加入染料、胆盐、指示剂等,应在校正pH后加入。4.倾注平皿时,不应将平皿盖全部打开,以免空气中的尘埃及细菌等落入平皿中。5.倾注平皿时,应恰当把握培养基的温度。温度过高,冷凝水过多,不易分离细菌;温度过低,部分琼脂凝固,平板高低不平。培养基的制备

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