微生物室工作流程

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1、细菌室学习体会苏长青细菌室的主要任务：一、培养、鉴定病原菌的类别二、做出致病菌的药敏结果三、监测院内感染四、菌种保存及科研细菌室的工作流程：标本采集——标本接收——编号——登记——接种——培养——鉴定——做药敏——发报告合抱之木始于毫末标本采集——主要由临床科室负责标本接收——做好核对工作患者基本信息核对标本类型标本采集时间标本量不确定标本应与临床科室联系不合格标本就予以退回标本接收后应及时处理，因一些细菌对环境比较敏感，比如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等在脱离人体后极易死亡；如不能及时处理则应该妥善保存：标本不能冷

2、冻或冷藏编号：目的是为保证标本号的唯一性细菌室标本采用每日编号形式，用7位数“月、日、标本号”联合编号如070808207为七月08为七月八号082为七月八号的第82个标本9091培养基选择根据标本的不同需要接种不同的平板首先了解一下平板的性质和用途：血平板（BA）：除含有普通营养琼脂所包含的所有营养之外，还加入了5%的羊血，大大增加了其中的蛋白质和生长因子，适用各类细菌的生长，一般细菌检验标本的分离都应接种在此平板。麦康凯（MAC）：内含有胆盐可抑制革兰阳性菌的生长，有利于革兰阴性菌的生长，是常用的选择性培养基；发酵型革兰阴

3、性杆菌因分解乳糖能力不同，在此平板上菌落颜色不同，便于鉴别菌种。巧克力平板（CA）：内含有V和X因子，嗜血杆菌、奈瑟菌等生长良好。凡疑有这些菌种存在的标本，均须接种巧克力平板。SS琼脂：因胆盐含量较高，具有较强的抑制力，是常用的强选择性培养基。其中的胆盐抑制革兰阳性菌的生长，枸椽酸盐和粕绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病菌的沙门菌、志贺菌容易分离到。因选择性过强，可能会影响检出率，使用时常加弱选择性培养基以配对互补。小BB：即为营养肉汤，用于标本和各类细菌的增殖。标本类型培养基血血培养瓶中段尿血平板、麦康凯平板脑脊液小BB、血平板

4、、巧克力平板穿刺液小BB、血平板、麦康凯平板、巧克力平板胆汁血平板、巧克力平板、麦康凯平板呼吸道标本血平板、麦康凯平板、巧克力平板、沙宝氏平板粪便标本SS平板、MAC平板和血平板病灶分泌物血平板、巧克力平板、麦康凯平板接种血培养：将血培养瓶上条形码贴到化验单上，点击血培养瓶图标进入输入窗口——扫描条形码（血培养箱右侧）——打开右侧抽屉将血培养瓶放入亮灯空位——点击“√”关上血培养箱。痰培养：接种环在加热器内烧红冷却后，取脓性部分一环分三区划线，分别接种于BA、Cho、Mac(CO2温箱)、SDA(30℃温箱)培养。粪便培养：接

5、种环在加热器内烧红冷却后，取粪便病变明显部位标本适量，分别在SS平板，BA和MAC平板上三区划线。注意：在划第二区之前应再次灭菌接种环以分出单个菌落。小便培养：用加样器无菌取10ul分区划线接种于BA、Mac，置CO2温箱培养。脑脊液穿刺液首先接种小BB：取600ul标其它无菌体液本打入小BB试管中，再各取一滴分别接种在BA、CA、MAC，灭菌接种环后三区划线棉拭子用灭菌后的镊子钳取标本后在BA、组织标本MAC、CA、SDA上滚动接种，然后三区划线深静脉导管（PICC）：用无菌移液管将小BB移入装有PICC的无菌试管中。支原体

6、：将棉拭子标本与营养液R1充分混匀后，取出棉拭子，将营养液R1与营养液R2混匀，然后将混合液加入药敏板，每孔55ul.注意事项接种环使用前后均应灭菌，以免造成环境污染及交叉污染。脑脊液与其他无菌体液均应先接种小BB进行增菌，以免小BB污染造成假阳性结果。接种标本时应待接种环冷却后进行，以免将细菌烫死从而造成假阴性结果。三区划线时应轻柔，不破坏平板；线条应疏密合适，从而更好分离出单个菌落。培养需氧培养：临床细菌室最常用的培养方法，将已接种好的平板置于35度温箱中孵育。二氧化碳培养：有些细菌初次分离培养时需置5%-10%CO2环境

7、才能生长良好，如一些奈瑟菌属，布鲁菌属等。鉴定及药敏依据细菌的菌落形状、气味、颜色、溶血类型及有无等和一系列的生化反应对细菌进行鉴定，然后进行药敏试验。“无菌概念”“无菌概念”有两层含义：一、保护自己不被感染：要求细菌室工作人员做好自我防护工作，如使用口罩、手套、帽子等。二、保护细菌不被污染：标本采集——标本接收——编号——登记——接种——培养——鉴定——做药敏——发报告谢谢大家