铅暴露对猪免疫功能影响

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1、铅暴露对猪免疫功能影响【】目的探讨饲料中添加不同剂量铅对猪免疫功能的影响。方法将24头14～17kg仔猪随机分为4组，用正常饲料和分别添加5，15，45mg/kg(分别为低、中、高剂量组，均按含铅量计)醋酸铅的饲料对其进行90d攻毒饲养试验。测定猪血液中白细胞数量(、igg、iga)、和补体(c3，c4)含量，并使用四甲基偶氮噻唑盐(mtt)法检测血液中t淋巴细胞活力。结果低剂量组t淋巴细胞活力降低29.3％，与对照组比较差异有统计学意义(p0．05)；中剂量组iga含量下降0.12g／l，t淋巴细胞活力降低25.2％，与对照组比较差异均有统计学意义(p0．05)；高剂量

2、组的白细胞(、igg、iga、c3含量分别下降4.3×109，1.48，0.13，0.14，0.31g/l，t淋巴细胞活力下降37.4％，与对照组比较差异均有统计学意义(p0.05)。结论饲料中含铅量达到5mg／kg时影响猪免疫功能，高于45mg／kg时可导致猪免疫力显著降低【关键词】铅；饲料；猪；免疫功能effectofleadexposureonimmunefunctioninpigsin,guoboli,etal.collegeofveterinarymedicine,northmunefunctionofpigs.methodstlydividedintofou

3、rgroupsandalfeedsandfeedsg/kg(log／kg(mediumdose)，45mg/kg(highdose),respectively.thenumberof，iggiga，c3，c4levelinserumeasuredandtlymphocyteactivityinedbymttmethod.resultstlymphocyteactivityinlophocyteactivityinthemediumdosegroupdecreasedby0.12g/land25.2％,respectively,pared，iggigaandc3inhi

4、ghdosegroupdecreasedby4.3×109/l，1.48g/l，0.13g/l，0.14g/l，0.31g/l,respectively.munityofpigscouldbeaffectedbyleadinfeedg／kg,andcouldbesignincantlydereasedg/kg.keymunefunction近年来，伴随饲料工业的发展，为满足畜禽快速生长需要，我国畜牧业生产过程中存在盲目向饲料中添加过多微量元素的现象，导致饲料中铅超标的情况时有发生，对畜禽健康和食品安全造成潜在的危害〔1〕。.133229.有研究表明，长期低剂量铅暴露可以抑

5、制t淋巴细胞的增殖和分化〔2,3〕，并导致血清中免疫球蛋白igm，igg含量降低〔4〕。本研究观察饲料中添加不同剂量铅对猪免疫机能的影响，找出饲料中铅含量与猪免疫毒性的剂量-效应关系，为国家制定饲料中铅含量限量标准提供理论依据。1材料与方法1.1材料与仪器健康商品仔猪24头，雌雄各半（陕西杨陵上河猪场)，体重14～17kg；醋酸铅(纯西安化学试剂厂)；胎牛血清培养液（dmem）（美国gibco公司)；植物凝集素（ppha-p）（美国sigma公司)；二甲基亚砜(dmso，美国sigma公司)；猪淋巴细胞分离液(天津灏洋生物制品科技责任公司)；标准胎牛血清(天津灏洋生物制品

6、科技责任公司)；xd811l生化分析仪(上海迅达医疗仪器有限公司)；ca500三分类血液分析仪(日本埃尔玛公司)；ckx41倒置显微镜(日本olympus公司)；mco-15ac二氧化碳培养箱(日本sanyo公司)；dg5030多孔酶标测定仪(国营华东电子管厂)。1.2分组与染毒24头猪随机分为4组，每组6头，分别为对照组和低、中、高剂量组(饲料中分别添加铅5.0，15.0，45.0mg／kg)。正常饲料适应性饲养10d后，攻毒饲养持续90d。1.3血液中白细胞数量分析采用乙二胺四乙酸钠(edta-na)真空采采取猪血管抗凝血，血液分析仪测定全血中白细胞数量。1.4t淋巴

7、细胞活力测定采用t淋巴细胞转化试验测定t淋巴细胞转化率。于猪前腔静脉采取无菌抗凝血，经猪淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞，显微镜下稀释至5×106个／ml，加入含pha-p的dmem培养藏100μl(pha-p终浓度为9μg／ml)，co2培养箱孵育68h，之后加入四甲基偶氮噻唑蓝(mtt5mg/ml)10μl，继续孵育4h，加入100μldmso，轻微振荡10min，利用酶标仪在490nm波长下测定其吸光度(a)值。用加pha-p孔的吸光度值减去不加pha-p孔的吸光度值代表淋巴细胞的活力。1.5免疫球蛋白(igm，igg，lg