欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:20023026
大小:83.00 KB
页数:5页
时间:2018-10-08
《蛋白质组学技术在前列腺疾病中运用的研究进展》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、蛋白质组学技术在前列腺疾病中运用的研宄进展张敏建史亚磊(通讯作者)程宛钧(福建中医药大学附属人民医院福建福州350004)【中图分类号】R319【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)25-0384-02前列腺疾病主要括前列腺炎、前列腺增生、前列腺癌,近年来前列腺疾病呈多发趋势,众多学者运用蛋白质组学技术对前列腺疾病进行广泛的研究。蛋白质组学(Proteomic)的概念最早由澳大利亚学者Wilkins和Williams于1994年提出,并首次公开发表在1995年7月的《Electrophoresis》上,指由一个基因组、细胞、组织或生物所表达的全部蛋白质[1
2、]。随着蛋白质组学技术的不断发展,己被广泛应用到生命科学的各个领域。其中前列腺疾病也是蛋白质组学技术研究的重要领域[2],很多学者运用蛋白质组学技术对前列腺疾病进行蛋白组组学的研究,木文对相关研究进行综述。1关于前列腺增生的研究赵旭宏等[3]对前列腺增生患者、前列腺癌患者和健康对照的尿液蛋白质双向凝胶电泳图谱进行对比分析,用丙酮沉淀蛋白的方法对前列腺增生患者、前列腺癌患者和健康对照尿液中的蛋白质进行浓缩,再用双向凝胶电泳技术分离蛋白质样品,CANONG9照相获取图像,PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析,寻找差异表达蛋白质。在
3、此基础上用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALIDI-TOF)进行肽指纹图谱鉴定,并进行生物信息学分析。结果通过实验条件的优化,应用蛋白质组学方法分析前列腺增生患者尿液蛋白质的组成成分是可行的,为研究前列腺增生患者尿液检测特异标志物提供了基础资料,为今后鉴别前列腺增生和前列腺癌提供了有益的依据。顾晓箭等[4]对用双用双向凝胶电泳分离前列腺增生患者血清总蛋白,从胶上切下表达有差异的兴趣蛋白质点,经胶内原位酶解后,用质谱仪测得其肽质量指纹谱;然后通过数据库检索鉴定蛋白质。结果成功获得了BPH患者血清蛋白质的二维凝胶电泳图谱,为今后从更高的水平来寻找前列腺疾病的功能蛋白质和差异
4、性蛋白质,阐明前列腺疾病相互发生发展的分子生物学机制等研究提供了冇益的探索。Charrier等[5]应用2-DE分析40例良性前列腺增生患者和52例前列腺癌和的血清,发现良性前列腺增生患者中低分子量游离PSA(fPSA)明显高于前列腺癌患者,用fPSA/tPSA比值作指标诊断前列腺癌的准确率高达100%,而常用的血清PSA作为肿瘤标志物早期诊断前列腺癌的准确率仅有42.5%。Lehrer等[6】在前列腺癌和良性前列腺增生患者血清中检测到15.2、15.9和17.5kD3个蛋白峰,而在健康者血清中未发现,并认为15.9RD蛋白质有助于前列腺癌的诊断和与良性前列腺增生相鉴别,而且
5、对今后前列腺癌检测抗体芯片的开发及成为免疫治疗的靶点冇潜在应用价值。2关于前列腺癌的研究:张晓波[7】等收集2007年2月至2008年4月间住院收治手术切除前列腺癌组织和良性前列腺增生组织及其配对的患者血清标本3例。提取组织总蛋白,双向电泳分离并转膜、正常人血清封闭、患者血清作为一抗杂交,行Western印迹检测,前后比较差异表达蛋白,MALDI-TOF-MS质谱分析,数据库查询鉴定后进行RT-PCR法和Western印迹验证。结果证实该方法改进可以显著提高展示两组差异表达蛋白。周尊林等[8]用雄激素敏感性LNCaP细胞在常规细胞培养基中持续培养。在雄激素递减环境中培养雄激素
6、敏感的LNCaP细胞,且培养出了稳定传代的细胞,命名为LNCaP-s细胞。并通过双相凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解析电离/飞行吋间质谱测量法(MALDI-TOFMS>分析前列腺癌LNCaP细胞的蛋白表达。结果在2-DELNCaP蛋白谱中,成功鉴定出了222种蛋白质。程志强等[9]对前列腺癌患者(其中12例冇骨转移,15例无骨转移)的血清用二维电泳、液相色谱串联质谱技术进行前列腺癌骨转移相关血清蛋白的筛选实验,结果发现了两组患者血清中表达水平有显著差异的3个蛋白质:载脂蛋白A2I、血清淀粉样蛋白A和细胞角蛋白10,其中血清样淀粉蛋白A2I和细胞角蛋白10在骨转移组表达升高
7、,载脂蛋白A2I在骨转移组表达降低。Watkins等[10]对36例前列腺癌患者及相应正常对照组的血清进行检,结果发现一个50.8kD的蛋白质存在于所冇前列腺癌患者中,而正常对照者均为阴性,表明该蛋白对前列腺癌的检测意义重大。Qu等[11]利用树型分析方法处理SELDIFMS蛋白芯片系统,分析前列腺癌患者血清与非前列腺癌的对照组血清所得到的蛋白质谱,用326例参与者的血清建模,用60例参与者血清做检测组。在检测到的779个峰值中,选取其中的124峰作为分类,可以明确区分前列腺癌患者和正常人,特异度和敏感
此文档下载收益归作者所有