植物血凝素pha说明书

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1、植物血凝素(PHA)植物血凝素(phytohaemagglutinin)(PHA)是一种有丝分裂原,主要用于激活免疫细胞-淋巴细胞。是一种干扰素诱导剂,不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素;还可以刺激机体产生非特异性抗体;增强免疫细胞-浆细胞产生特异性抗体的质和量。由于其较难提纯,且成本极高,所以一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。我公司共投资300万元,用4年的时间经过多年试验终于摸索出植物血凝素(PHA)的提取方法,利用国际最先进的超低温冷冻方法从红芸豆中提取出纯度可达99.9%的植物血凝素(PHA),填补了国内空白。PHA的作用机理:1.PHA刺

2、激T细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞;效应T细胞分泌产生大量细胞因子(如白细胞介素、干扰素等)杀伤病毒;细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。2.PHA可刺激B细胞转化为浆母细胞然后增殖分化为浆细胞,浆细胞产生大量非特异性抗体来中和病毒。同时可以刺激机体免疫细胞-浆细胞产生特异性抗体的质和量;提高机体的免疫力。我公司研究植物血凝素(PHA)在动物疾病防治上的应用,主要进行了以下试验:1.利用鸡白细胞、脾细胞、鸡胚成纤维细胞以有机锗Ce-132、新城疫弱毒株NDV-F、植物血凝素(PHA)、聚肌胞PolyI:C为诱生剂,对外源性干扰素IFN诱生条件如诱生剂量、诱生时

3、间及培养条件进行了比较分析和探讨,结果发现以Ce-132诱生IFN的能力为最强,其他依次为PHA、NDV-F、PolyI:C;且鸡脾细胞和鸡白细胞产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞;并且最佳诱生剂量依次为:Ce-132为70微克/毫升;鸡HDV-F为128HAU/毫升;PolyI:C为60微克/毫升;PHA为20微克/毫升。该研究表明,植物血凝素(PHA)在机体内刺激机体产生干扰素的能力是聚肌胞的30倍,所产生的作用是直接服用干扰素的300倍,所以服用1mg植物血凝素(PHA)相当于服用30mg的聚肌胞和直接使用300mg干扰素。2.PHA对家禽的新城疫、传染性法氏

4、囊病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、脑脊髓炎、流感等疾病的预防及治疗效果。结果表明PHA对上述病毒感染的保护率分别为新城疫77.5%、传染性法氏囊病92.5%、传染性支气管炎85%、传染性喉气管炎77.5%、脑脊髓炎90%、流感80%。       植物血凝素(PHA)对鸡常见病毒病的疗效研究为了验证植物血凝素(PHA)对新城疫、传染性法氏囊病、鸡肾型传支等6种病毒病的预防效果,指导临床合理用药,特进行了本试验。1材料和方法1.1药物植物血凝素(PHA),由生化试剂公司提供。1.2试验动物及分组1日龄AA肉鸡520只,购自某鸡场,用温控育雏笼正常饲养,从21日龄开

5、始给药,至28日龄用于试验。随机分为3组,每组40只,处理详见表1。(略)1.3攻毒用毒株NDV强毒,IBDV强毒,肾型IBV强毒,ILTV强毒,AEV强毒,HAV强毒,中国农业大学动物医学院预防医学系传染病组馈赠。1.4人工发病参考常维山等方法,即种毒经37℃水浴融化,用灭菌生理盐水加双抗20倍稀释后,4℃locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(Wuzhensaidinfo

6、rmationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame第3页共4页冰箱作用30分钟,按每胚0.2ml接种10日龄SPF鸡胚,37℃孵育,弃去24h内死亡鸡胚,接毒后36h将鸡胚放入4℃冰箱过夜,无菌收集尿囊液。除健康对照组外,其余各组进行人工感染各种毒株强毒,感染剂量1ml含毒尿囊液,滴鼻或点眼0.5ml,肌肉注射0.5ml。同时鸡舍断电降低舍温、适当减少饮水供给以诱使发病。1.5预防试验28天后按表1进行感染,试验期14天,每天定时观察各组鸡的采食、饮水、精神状况、临床症状,记录死

7、亡情况,并对病死鸡进行尸体剖检。1.6疗效评价指标1.6.1死亡率:具有各种传染病的典型症状及病变的死亡鸡占该试验组鸡的百分比。1.6.2治愈率:经用药治疗后,存活病鸡临床症状完全消失的占该试验组鸡的百分比。1.6.3数据统计处理:用常规统计学方法(X2检验)对各组死亡率、治愈率进行显著性检验。2结果试验期各用药组存活鸡的临床症状逐渐减轻消失,精神、采食、饮水逐渐恢复正常;用药组死亡率明显低于感染对照组,剖检可见同一时间死亡的病鸡比感染对照组病变轻。各组的死亡率、治愈率,见表2。(略)3结论与讨论PHA主要通过诱导干扰素产生,提高机体免疫力,达到预防疾病的效果。

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