金黄色葡萄球菌检测讲义_ppt课件

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1、金黄色葡萄球菌检测内容概述流行病学实验室检验生物学特性检验程序及检验方法质量控制概述金黄色葡萄球菌是国内外最常见的细菌性食物中毒病原菌之一。在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%；加拿大则占45%；我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒约占细菌性食物中毒事件的25%。金黄色葡萄球菌肠毒素已成为世界性卫生问题流行病学---分布在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中均可找到作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球

2、菌存在。因而，食品受其污染的机会很多流行病学---临床症状化脓性炎症局部化脓性炎症全身感染（如败血症、脓毒血症等）毒素性疾病食物中毒(多表现为急性胃肠炎)烫伤样皮肤综合症中毒性休克综合症假膜炎肠炎流行病学---食物中毒金葡菌引起的食物中毒：是金葡菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素流行病学---食物中毒中毒的季节分布：多见于春夏季潜伏期：

3、2-4小时中毒相关食品种类：奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。流行病学---食物中毒传染源：是被金葡菌感染的人和动物化脓性感染部位传播途径：经食物传播流行病学---肠毒素形成条件存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成污染的控制防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成在低温和通风良好的条件下贮藏食物，并且食用前要彻底加热防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品及食物的污染肉制品加工

4、厂所用的原材料经高温或其他适当方式处理后才能进行加工生产定期对食品生产加工人员和餐饮服务人员进行健康检查实验室检验生物学特性---菌体形态及培养特征革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0微米，镜检时呈单个、成对、四联或不规则的葡萄串状无芽孢，无鞭毛，无荚膜需氧或兼性厌氧菌可在10%-15%氯化钠和40%胆汁中生长血平板上菌落周围形成透明的溶血环生物学特性---菌体形态及培养特征大多数菌株能生长在6.5-46℃之间；最适温度37℃。能在pH4.2-9.3之间生长最适为pH7.4大多数菌株产生类胡罗卜素，使细胞团呈现出深橙色

5、到浅黄色。该色素为脂溶性，局限于菌落内生物学特性---生化反应接触酶阳性产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪酸；所有的毒株产生凝固酶，人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆金葡菌的毒素和酶a.溶血素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤

6、维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E五种。一般认为产肠毒素的菌株通常是凝固酶阳性株生物学特性---耐受力几乎所有的消毒试剂以及热加工过程对金黄色葡萄球菌都有严重的破坏作用肠毒素耐热，可耐受100℃30分钟不被破坏检测步骤---增菌利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性（可耐受15%的氯化钠），

7、用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌检测步骤---分离血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在血平板上产生明显的溶血环血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈检测步骤---分离BP平板胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素丙酮酸钠是一种生长促进剂亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用检测步骤---分离在BP平板上其典型菌落为：圆

8、形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色（米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感偶然会遇到不分解脂肪菌株，除无混浊带及透明圈外，其他外观基本相同长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落，其黑色常较典型菌落淡些，且外观可能粗燥，质地较