如何看抗体检测结果及检测应用ppt课件

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1、如何看抗体检测结果及抗体检测应用隋海亮2014年7月5日文档密级：内部公开一、猪瘟ELISA原理——阻断（竞争）ELISA抗体抗原加入样品洗涤+酶标记物洗涤+底物蓝色淡蓝色终止读数阻断（竞争）ELISA原理例如：CSFV-Ab、PRV-gI、PRV-gB猪瘟疫苗的免疫评估—关注两点阳性率：猪瘟抗体（阻断率（Blocking）≥40%，判为阳性结果；30%＜Blocking＜40%，判为可疑结果；Blocking≤30%，判为阴性结果）；免疫合格率：阻断率（Blocking）≥50%的，即为免疫合格。

2、免疫合格的比例即为免疫合格率。变异系数：CoefficientofVariation(CV)变异系数计算的是平均个体的变化，以平均滴度的背离的百分数来表示公式如下标准偏差（STDEV）CV=X100%平均阻断率CV≤40%,显示了群内猪只有一个均衡的、相似反应CV≥60%,显示了群内猪只滴度反应变化高于正常估计值猪瘟检测的应用免疫评估：商品猪：猪瘟二免后4-6周，要求：阳性率≥80%,CV≤40%种猪群（公猪和母猪）：猪瘟免疫后4-6周，要求：免疫合格率≥80%（严格一点，要≥90%）,CV≤40%

3、后备猪（全群检测）：进入隔离舍后1-2周、进入配种舍前1个月（6-6.5月龄），要求：Blocking≥40%，阴性猪补打疫苗，3周后复检，不合格淘汰。猪瘟检测的应用仔猪首免日龄的确定：选30-60头仔猪，日龄和体重相近，每窝1-2头，确认没有野毒感染的风险，不接种猪瘟疫苗连续采血：出生后7天、14天、21天、28天、35天、42天检测抗体水平要求：CSFAbBlock≤30%仔猪占20%-40%时为首免日龄(依据感染压力和平均阻断率而定)。应用公猪季度性监测全部公猪，一年4次要求：S/P≥2.5公

4、猪暂停使用(1-2个月)或PCR确认感染状态母猪季度性监测母猪要求：S/P应主要在2.5≥S/P≥0.4(90%母猪抗体在免疫后转阳)后备母猪和后备公猪在引进种群前1个月，全群监测要求：S/P≥2.5和S/P≤0.4暂停引入繁殖群应用动态检测4周龄、10周龄猪群，每次20-30样本主要是：分析蓝耳感染状态，判断猪群是否稳定，(对于不稳定群体,延迟转群或免疫等)，如果S/P≥2.5的比例超过5%，则判断该场蓝耳不稳定，有感染；没有则稳定。三、伪狂犬伪狂犬gE：结果成立条件：阴性对照平均值-阳性对照平均

5、值必须大于或等于0.3；否则试验无效。判定结果：如果S/N值低于或等于0.60，样品应判定为阳性；如果S/N值大于0.70，样品应判为阴性；处于0.6~0.7的样品判定为可疑，间隔两周时间可重新检测。伪狂犬病毒gE片段gB片段疫苗病毒片段猪群PRV感染状况的普查采样要求公猪群：全部采样生产母猪群：随机采样30个样本15周龄后的生长猪（母源抗体消失）：随机采样20-30个样本检测方法IDEXXPRVgIELISAS/N≤0.6阳性，S/N＞0.7阴性0.6

6、：低感染群：种猪阳性率10%以下，可做净化高感染群：种猪阳性率10%以上，低于30%，可做净化；高于30%，通过疫苗控制，来稳定猪群伪狂犬疫苗的免疫评估—针对阴性场商品猪群免疫疫苗后4-6周，随机采样20-30份要求：gE抗体检测全部为阴性；gB抗体检测阳性率≥95%伪狂犬的评级标准：伪狂犬gE抗体全阴性，则为阴性场伪狂犬gE抗体阳性，但检测15周龄猪，gE抗体转阴，则为阳性稳定场伪狂犬gE抗体阳性，但检测15周龄猪，gE抗体阳性率达到20%以上，则为阳性不稳定稳定场应用—净化母猪群,公猪群(全部)

7、过去6-12个月没有使用全病毒灭活苗或非gE基因缺失弱毒疫苗若S/N≤0.6则淘汰（对于怀孕母猪:可以先隔离,产后2周淘汰）;若0.6

8、,评估但不涉及淘汰）以人为本以正兴邦