胸髓横断对大鼠膀胱神经支配通路的影响―假狂犬病毒跨突触示踪研究.doc

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1、胸髓横断对大鼠膀胱神经支配通路的影响―假狂犬病毒跨突触示踪研究【摘要】目的利用假狂犬病毒跨突触示踪技术，研究胸髓横断伤所致的急、慢性脊髓损伤（SCI）对膀胱脊髓神经支配通路的影响。方法76只SD大鼠随机分为4组:non-SCI、SCIa、SCIb和SCIc组。SCIa、SCIb和SCIc组大鼠完全横断脊髓，在饲养不同时间后，膀胱壁内注射假狂犬病毒（PRV）;non-SCI组大鼠不损伤脊髓，仅于膀胱壁组织内注射PRV。各组注射PRV后于既定时间点经心脏灌注固定取材。采用链霉卵白素―过氧化物酶（SP）免疫组织化学方法显示背根神经节（DRG）和脊髓切片中PRV阳性神经元。计算机图像分析软件统计各组

2、PRV阳性神经元数目和面积，单因素方差分析比较各组统计值差异。结果non-SCI、SCIa、SCIb和SCIc组大鼠膀胱重量分别为（144±9）mg、（142±8）mg、（486±51）mg和（656±69）mg。non-SCI和SCI大鼠PRV示踪的时限性和分布相似。SCI大鼠病毒标记的DRG细胞面积显著增加（P<0.001），non-SCI、SCIa、SCIb和SCIc组分别为（593±40）μm2、（588±39）μm2、（815±53）μm2和（902±57）μm2。慢性SCI大鼠在注射PRV后第3天，L6和S1节段后角标记细胞数显著增加;注射后第4天，L6和S1节段标记的运动

3、神经元数也显著增加。结论急性和慢性脊髓损伤不影响大鼠膀胱的PRV示踪特性。慢性SCI大鼠膀胱排尿反射通路出现显著重组。　　关键词脊髓损伤膀胱排尿反射通路假狂犬病毒跨突触示踪　　Effectofthoraciccordtransectionontheurinarybladderspinalneuralpathwayinrats:atranssynaptictracingstudybyPRV　　【Abstract】ObjectiveTodeterminatetheeffectofacuteandchronicspinalcordinjury（SCl）resultedfromthoraciccor

4、dtransectionontheurinarybladderspinalneuralpathwaywithatranssynaptictracingstudyusingPseuˉdorabiesVirus（PRV）.Methods76adultSprague-Dawleyratswererandomlydividedinto4groups，non-SCI，SCIa，SCIbandSCIcrespectively.Thenon-SCIratsunderwentnosurgicalprocedureexceptpseudorabiesvires（PRV）tracerinjectionintot

5、hebladdertissuewhiletheratsofothergroupswerespinalizedandgivenPRVinjectionatdifferˉenttimeafterSCI.TranscardiacperfusionfixationwasdoneinappropriatesurvivalperiodsafterPRVinjection.Thensectionsofdorsalrootganglion（DRG）andspinalcordwereprocessedforvisualizationofvirusbytheStreptavidin-Peroxidase（SP）

6、immuno-histochemicalprocedure.AllsectionsweremeasuredwiththeOlympusCue-2imageanalˉysissystem.OnewayanalysisofVariancetestwasusedforcomparisonofdifferentmeasurementsbetweennormalandspinalizedrats.ResultsThebladderweightsinnon-SCI，SCIa，SCIbandSCIcratswere（l44±9）mg，（142±8）mg，（486±51）mgand（656±69）mg7re

7、spectively.Thetime-orderedflowchartsofPRVtracingweresimilarinthenon-SCIratsandintheSCIrats.Thecross-sectionalareaofthelabeledDRGcellprofilesincreasedsignificantlyafterSCI（P<0.001），whichwere（593±40）μm2，（5