生物实验中常用的化学试剂配制方法

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1、生物实验中常用的化学试剂配制方法1.乳酸苯酚固定液乳酸10g,结晶苯酚10g,甘油20g,蒸馏水10mL。2.1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中,贮存于棕色瓶中保存备用。用作培养基指示剂时,每1000mL培养基中加入lmL1.6%溴甲酚紫即可。3.V.P.试剂CuSO41g,蒸馏水l0mL,浓氨水40mL,10%NaOH950mL。先将CuSO4溶于蒸馏水中,然后加浓氨水,最后加入10%NaOH。4.0.02%甲基红试剂甲基红0.1g,95%乙醇760mL,蒸馏水100mL。5.吲哚反应试剂对二甲基氨基苯甲醛8g,95%乙醇760mL,浓HCl160mL。6.

2、Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g,柠橡酸钠0.8g,NaCl0.42g,蒸馏水l00mL。以上成分混匀后,微加温使其溶解后,用柠檬酸调节pH6.1,分装于三角瓶中(30~50mL/瓶),113℃湿热灭菌15min,备用。7.Hank’s液(l)贮存液A液:(I)NaCl80g,KCl4g,MgSO4·7H2O1g,MgCl2·6H2O1g,用双蒸馏水定容至450mL:(II)CaCl21.4g(或CaCl2·2H2O1.85g)用双蒸馏水定容至50mL。将I和II液混合,加氯仿1mL即成A液。(2)贮存液B液:Na2HPO4·12H2O1.52g,KH2PO40.

3、6g,酚红0.2g,葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL,然后加氯仿1mL,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解。(3)应用液:取上述贮存液的A和B液各25mL,加双蒸馏水定容至450mL,113℃湿热灭菌20min。置4℃下保存。使用前用无菌的3%NaHCO3调至所需pH。注意:药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序加入,用适量双蒸馏水溶解,待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品,最后补足水到总量。(4)10%小牛血清的Hank’s液:小牛血清必须先经56℃、30min灭活后才可使用,应小瓶分装保存,长期备用。用时按10%用量加至应用液中。8.0.1mol/LCa

4、Cl2溶液双蒸馏水900mL,CaCl211g,定容至lL,可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。9.0.05mol/LCaCl2溶液双蒸馏水900mL,CaCl25.5g,定容至lL,可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。10.α淀粉酶活力测定试剂(1)碘原液:称取碘11g,碘化钾22g,加水溶解定容至500mL。(2)标准稀碘液:取碘原液15mL,加碘化钾8g,定容至500mL。(3)比色稀碘液:取碘原液2mL,加碘化钾20g,定容至500mL。(4)2%可溶性淀粉:称取干燥可溶性淀粉2g,先以少许蒸馏水混合均匀,再徐

5、徐倾入煮沸的蒸馏水中,继续煮沸2min,待冷却后定容至100mL(此液当天配制使用)。(5)标准糊精液:称取分析纯糊精0.3g,用少许蒸馏水混匀后倾入400mL水中,冷却后定容至500mL,加入几滴甲苯试剂防腐,冰箱保存。11.pH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液称取Na2HPO4·12H2O45.23g,柠檬酸(C6H8O7·H20)8.07g,加蒸馏水定容至1000mL。12.0.lmol/L磷酸缓冲液(pH7.0)称取Na2HPO4·12H2O35.82g,溶于1000mL蒸馏水中,为A液:称取NaH2PO4·2H2O15.605g,溶于l000mL蒸馏水中,为B液。取A液

6、61mL,B液39mL,可得到100mL0.lmol/LpH7.0的磷酸缓冲液。13.测定乳酸的试剂(l)pH9.0缓冲液:在300mL容量瓶中加入甘氨酸11.4g,24%NaOH2mL,加275mL蒸馏水。(2)NAD溶液:NAD600mg溶于20mL蒸馏水中。(3)L(+)LDH:加5mgL(+)LDH于lmL蒸馏水中。(4)D(-)LDH:加2mgD(-)LDH于lmL蒸馏水中。14.Taq缓冲液(10×)Tris-HCl(pH8.4)100mmol/L,KCl500mmol/L,MgCl215mmol/L,BSA(牛血清清蛋白)或明胶lmg/mL15.dNTP混合液dA

7、TP50mmol/L,dCTP50mmol/L,dGTP50mmol/L,dTTP50mmol/L。16.1%琼脂糖琼脂糖lg,TAE100mL,100℃融化后待凉至40℃倒胶,胶厚度约0.4~0.6。17.TAETris碱4.84mL,冰乙酸1.l4mL,0.5mol/LpH8.0的EDTA-Na2·2H2O(乙二胺四乙酸钠盐)2mL18.0.5mol/LEDTA(pH8.0)在800mL蒸馏水中加186.lgEDTA,剧烈搅拌,用NaOH调pH至8.0(约20g颗粒),定容至lL,分装后

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