真菌诊断进展课件

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1、深部真菌感染的非培养诊断进展北京大学第一医院北京大学真菌和真菌病研究中心余进AIDS插管等侵袭性治疗肿瘤和免疫抑制治疗骨髓和实体器官移植广谱抗生素治疗侵袭性真菌感染率上升—+600%+300%+300%Martinetal,NEJM2003;348:1546深部真菌感染不断增加国内深部真菌感染不容忽视刘正印等，中华医学杂志2003年3月第83卷第5期国内情况我院血液科(2004.5-2005.5共118例患者)确诊和临床诊断有7例,发生率为5.9%以血液病为主的深部真菌感染高危患者中，发生感染的危险因素有2种及2种以上广谱抗生素应用、念珠菌菌落定植和应用尿管，其中广谱抗生素应用是最主要的

2、危险因素深部真菌感染条件致病性真菌念珠菌病曲霉病隐球菌病其他对于侵袭性真菌感染……诊断滞后治疗手段有限基础疾病病死率很高念珠菌血症若不治疗死亡率可以达到45-76%侵袭性曲霉病死亡率高达55-70%诊断方法显微镜检查培养血清学分子生物学镜检和培养方法敏感性低血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区分定植和感染困难培养时间长有些标本采集困难非培养方法优点快速报告结果敏感性提高取材简便多以真菌在致病状态产生的物质为检测标志物，结果阳性提示有致病性定量检测可判断感染严重程度及疗效评估非培养诊断的方法简介真菌细胞壁成分（1-3）

3、-β-D-葡聚糖检测（G试验）真菌抗原检查半乳甘露聚糖（galactomannan)抗原（GM试验)甘露聚糖(mannan)抗原隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验）真菌特异的代谢产物D-阿拉伯糖醇真菌DNA的检测深部真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版宿主因素临床特征病原学真菌镜检真菌培养组织病理学检查血清学检查方法（间接证据）CSF隐球菌抗原阳性——确诊GM-test,G-test——临床诊断ClinicalInfectiousDiseases2008;46（1-3）-β-D-葡聚糖检测（1-3）-β-D-葡聚糖检测b1,6glucansb1,3PPLbilayerchiti

4、nergosterolb1,3glucansynthasemannoproteins真菌细胞壁成份，占50%以上其他微生物、动物及人的细胞不含该成份用于侵袭性真菌感染的早期诊断方法：G试验β-葡聚糖可特异性激活鲎（Limulus）变形细胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故称G试验。Beta-D-glucan通过激活G因子（FactorG）引起凝集内毒素通过激活C因子（FactorC）引起凝集试剂盒:祛除FactorCGlucan特异BG检测的特点可检测多种致病真菌感染念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉,组织胞浆菌,毛孢子菌等不能用于检测隐球菌和接合菌感染阳性结果代表存在侵袭性真菌感染

5、真菌对数生长期释放量最大,可被体内葡聚糖酶降解(glucanase)每周检测2次BG检测用于念珠菌血症敏感度为62%-100%，特异度为64%-88%不同种念珠菌感染对葡聚糖检测无明显影响白念珠菌,光滑念珠菌,热带念珠菌,克柔念珠菌,季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌近平滑念珠菌BG水平较低Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013BG检测用于念珠菌血症BG检测敏感度明显高于Mannan检测79.6%vs42%阳性早于血培养阳性和临床症状出现

6、对于念珠菌血症,BG检测是首选检查Clin.Infect.Dis.2005.41:654–659.J.Clin.Microbiol.2005.43:5957–5962J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013β-（1-3）-D-葡聚糖(BG)检测用于侵袭性曲霉感染（IPA)敏感度为55%-100%特异度为52%-100%对于确诊IPA，阳性率为85.7-100%高度可疑IPA，阳性率为52.4-66%Med.Mycol.2006.44:5163–5172J.Clin.Microbiol.2008.46:1009–1013J.Clin.Microbiol.2005

7、.43:299–305BG检测(阳性界值为60pg/mL)和GM（阳性界值为1.0）比较二者在体内的代谢动力学相似，敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均相同，分别为87.5%、89.6%、70%和96.3%二者联合可以提高特异度和阳性预测值，对敏感度和阴性预测值没有影响JClinMicrobiol,2005,43:299-305.侵袭性曲霉感染（IPA)BG检测与半乳甘露聚糖(GM)检测BG检测与半乳甘露聚糖(GM