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时间:2018-10-02
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1、非发酵菌及检验非发酵菌及检验非发酵菌(nonfermenters)是指一群不能利用或仅以氧化形式利用糖类,生化特性十分相近的革兰阴性无芽胞杆菌。括多个菌属,主要有:假单胞菌属不动杆菌属产碱杆菌属莫拉菌属黄杆菌属分群依据:1.氧化酶试验阳性(不动杆菌及个别假单胞菌为阴性)2.葡萄糖氧化/发酵(O/F):应开管产酸,闭管不变。3.动力:大多为专性需氧菌,半固体上动力不明显(动力观察应在30℃或室温12-24小时培养物悬滴法为准或以鞭毛染色鉴别)4.麦康凯培养基上生长:可分群见表菌属氧化酶葡萄糖O/F悬滴动力触媒硝酸盐还原麦康凯上生长假单胞菌属+O/-
2、+++/-+不动杆菌属-O/--+-+产碱杆菌属+-+++/-+莫拉菌属+--++/-+黄杆菌属+O/F-+-+/-非发酵菌主要菌属的生化反应广泛存在于自然界的空气、水和土壤中。种类多达200余种,大多数为条件致病菌。革兰阴性,直或微弯曲,大多有鞭毛(单鞭毛或单端丛毛),无芽胞,专性需氧。第二节假单胞菌属(Pseudomonas)为假单胞菌的代表,为条件致病菌,也是医院感染的常见病菌之一。(一)生物性状1、形态染色性:革兰阴性菌杆,呈球杆状或长丝状,长短不一,单个或短链排列。无芽胞,无荚膜,单端有鞭毛1-3根,运动活泼。铜绿假单胞菌(P.aeru
3、ginosa)培养特性:专性需氧,4℃不长,42℃可生长。血平板:常见透明溶血环普通平板:可产多种色素,主要有:绿脓素(兰绿色,可溶于水)和荧光素(只溶于水)。从临床标本中分离的菌株大多产生此色素麦康凯上可形成5种不同形态的菌落:①典型型:灰绿色,大小不一,扁平湿润,边缘不齐,表面可见金属光泽。②大肠菌群型:圆形凸起,灰白色半透明。③粗糙型:菌落中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。④侏儒型:细小无光泽,半透明菌落⑤粘液型:光滑凸起呈粘液状生化反应:氧化酶+,O/F上能氧化分解葡萄糖、木糖产酸、精氨酸双水解酶+,枸橼酸盐+,硝酸盐+。抵抗力:较强,临床分
4、离株对多种抗生素耐药(二)致病性:可产生多种致病物质:内毒素、外毒素、菌毛、荚膜、胞外酶和溶血物质除自然界外,也存在于人体皮肤上及与外界相通的腔道中。多为继发感染,如烧伤后的创面感染,也可引起肺炎、脑膜炎、尿道感染,严重时可引起败血症,死亡率甚高。(三)微生物学检验1、标本采集:血液、脑脊液、胸腹水、尿液、痰液、脓汁等。医院环境监控:可采空气、水、物体表面等。2、检验程序3、检验方法:(1)直接镜检:(2)分离培养:血液和体液可先增菌,再转种血平板和麦康凯平板分离;脓汁、分泌物、尿可直接种于上述培养基分离培养。(3)鉴定:根据菌落特征、色素、生姜
5、气味、菌体形态、氧化酶试验等作出鉴定。对无色素的菌株应与其他假单胞菌鉴别。脑脊液、胸腹水、脓汁、痰、尿液分离培养血、麦康凯直接涂片染色血液体液粪便分离培养SS、麦康凯初步鉴定菌落特征,色素菌体形态、氧化酶最后鉴定生化反应血清学噬菌体分型:增菌营养肉汤铜绿假单胞菌的检验程序:铜绿假单胞菌的鉴定要点及与其他假单胞菌的区别试 验铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌斯氏假单胞菌嗜麦芽假单胞鼻疽假单胞菌类鼻疽假单胞氧化酶 + + + + _ +/_ +荧光素 +/_ + +/_ _ _ _ _
6、青脓素 +/_ +/_ +/_ _ _ _ _动力 + + + + + _ +葡糖氧化 + + + + + + +乳糖氧化_ + _ _+ + +蔗糖氧化_ + _ _+ + +木糖氧化 + + + + + _ +赖氨酸脱羧酶_ _ _ _+ _ _精氨酸水解酶+ + +_ _+ +硝酸盐还原+/__/+ _+_ _+明胶液化_/+ +_ _+_+4
7、2℃生长+ _ _+/_ +/__+第三节不动杆菌不动杆菌(Acinetobacter)为一群氧化酶阴性,不发酵糖类、无动力的革兰阴性菌。含6个种:醋酸钙不动杆菌洛菲不动杆菌溶血不动杆菌鲍曼不动杆菌琼氏不动杆菌约翰逊不动杆菌一、生物学性状形态与染色革兰阴性球杆菌,常成双排列,不易退色,多数有荚膜、无芽孢、无鞭毛。培养特性专性需养,营养要求不高。最适温度35℃,鲍曼不动杆菌42℃可生长。血平板上圆形凸起、2~3mm,光滑、边缘整齐、灰白色的菌落,部分菌落呈黏液状(溶血不动杆菌可形成β-溶血环);不产生色素。麦康凯平板形成粉红色菌落。生化反应氧
8、化酶阴性,触酶阳性,葡萄糖O/F为氧化型。不动杆菌属主要菌种生化反应特征:二、致病性该菌广泛存在于自然界,属条件致病菌,也是医院感染的常
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