《生物化学2实验》理论考查复习思考题

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1、《生物化学2实验》实验理论考查复习思考题成都大学生物产业学院生物化学实验室1.为什么在提取唾液淀粉酶前，必需将口中的残渣用清水漱尽后，才能满足实验需要，正确提取淀粉酶？否则会对酶的什么验证实验造成不利影响？2.请阐述酶的专一性验证实验设计原理。3.为什么淀粉的水解进行程度可以通过碘滴反应加以确定。4.在进行激活剂与抑制剂实验中，加入NaSO42的目的与意义。5.请阐述核酸在生物体内存在的方式？生物体内的核酸按其化学结构的组成不同，分为哪两类？它们分别存在于细胞什么部位？6.动物的哪些组织细胞中含有丰富的DNA，是提取D

2、NA的良好材料？7.DNA与RNA对于NaCl溶液呈现不同的溶解度，在DNA的提取中，如何调节NaCl溶液的浓度，实现DNA核蛋白与RNA核蛋白的分离？8.在DNA、RNA及酶的提取分离操作中，对环境温度要求较高，提取反应常常在冰盐浴中进行，请阐述冰盐浴与冰水浴的差异？在DNA提取中，冰盐浴起什么作用？9.在用动物肝脏提取DNA的实验中，需用到下列试剂，请阐述这些试剂在DNA提取中的作用？（1）1×SSC试剂；（2）NaCl-Na2EDTA试剂；（3）5%SDS试剂：（4）氯仿-异戊醇试剂；（5）1mol/LNaCl试

3、剂；（6）95%C2H5OH试剂。10.离心机是生物化学实验中经常使用的仪器设备。（1）根据离心机的转速高低，可将离心机分为哪两类？（2）根据离心机离心过程中，离心试管与转轴的位置关系，可将离心机分为哪两类？（3）为什么高速离心机必须要具备冷却系统？11.在用动物肝脏提取DNA的实验中：（1）加入氯仿-异戊醇试剂后，为什么必须剧烈振荡后才能进行离心分离？（2）根据被离心物质密度大小，在经此离心操作后，离心试管中被离心的物质可分为多少层？从上至下依次是离心得到的什么物质，本实验所需的DNA位于哪一层？（3）离心后的氯仿-

4、异戊醇试剂为什么不能随意倒入水槽中，而必须统一回收？12请阐述用稀碱法提取酵母RNA的原理，通过稀碱法提取的RNA为什么不再具有天然RNA的分子结构？在RNA定性实验中，如何进行RNA组分鉴定？13.请阐述，定量分析测定DNA与RNA通常有三种方法，请根据测定原理回答下列问题：（1）.为什么DNA与RNA能与蛋白质一样，可用紫外分光光度仪进行测定？DNA、RNA与蛋白质测定时，其特征吸收波长为多少？（2）请阐述定糖法测定RNA的原理（地衣酚-Cu2＋定糖法）。在该定量分析测定中，根据反应生物所确定的特征吸收波长是多少？

5、RNA测定的浓度范围为多少？为什么说该定量分析测定反应的特异性差？若要准确测定RNA含量，应如何排除干扰？（3）请阐述定糖法测定RNA的原理（二苯胺定糖法）。在该定量分析测定中，根据反应生物所确定的特征吸收波长是多少？DNA测定的浓度范围为多少？（4）请阐述定磷法测定DNA与RNA总磷量的原理与方法？在该定量分析测定中，其生成物钼蓝的特征吸收波长是多少？当样品中的磷的含量在多大的浓度范围时，所测样品中含磷量与生成物钼蓝测得的吸光度大小成线性关系，符合朗伯比耳定律？为什么用定磷法测定核酸时，必须先测定样品中的无机磷后，再

6、将样品消化后，测定总磷量？14.请阐述小麦萌发前后，淀粉酶活力变化的规律及生理意义？15.有关酶活测定的相关问题：（1）尽管不同的酶的酶活单位的定义各不相同，但在定义每种酶的酶活单位定义时，必须确定哪三个影响酶活测定的相关因素？（2）无论哪种酶，在测定其酶活大小时，为了使酶的活力大小测定准确，必须注意一个共同的问题：即在酶活测定时，酶的加入量与酶作用的底物之间，应存在什么关系？为什么？（3）请阐述在小麦淀粉酶活力大小测定实验中，是如何定义淀粉酶酶活单位的？为准确测定淀粉酶活力大小时，淀粉酶的加入量与其底物（淀粉）加入量

7、之间应保持什么关系？实验又是通过什么方法来定量测定其水解产物的？为准确测定水解产物生成量，水解产物与反应试剂加入量之间应该保持什么关系？（4）在测定酶活大小时，为什么不采用加热法，使酶蛋白变性的方法来终止酶促反应而是采用加酸或碱来终止酶促反应？对于本实验为什么又只能选择加碱的方式来终止酶促反应？（5）在酶活测定时，为什么需要对所提取到的酶液进行适当的稀释后再进行酶活测定？其稀释度大小选择的标准或依据是什么？本实验为什么可以不通过标准曲线来计算还原糖的生成量？16.生物体内糖的代谢有哪三个主要途径？请列表比较糖的有氧氧化

8、与糖的无氧酵解两条代谢途径在细胞定位，代谢中间产物，代谢终产物，代谢途径形成的条件，能量释放，代谢的作用与地位等方面的异同。17.在肌糖元的酵解实验中，为什么用肌肉糜做酵解实验必须在无氧环境下进行，而用肌肉糜提取液做试验时，酵解实验可以在有氧环境中进行？在肌糖元的酵解实验中，下列试剂的加入各起什么作用：（1）0.5%的淀粉溶液；（