自身免疫性疾病的实验室检测

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1、自身免疫性疾病的主要实验检测张富强自身免疫性疾病机体免疫系统受环境或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原的免疫应答（自身抗体或致敏T细胞），导致自身组织器官损伤或功能障碍所致的疾病。常见自身抗体的检测抗核抗体的检测与应用抗ENA抗体谱的检测与应用与小血管炎相关的自身抗体检测与应用与RA相关自身抗体的检测与应用与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用抗核抗体的检测与应用抗核抗体（antinuclearantibody，ＡＮＡ）是一组将自身各种细胞核成分作为靶抗原

2、的自身抗体总称。ＡＮＡ主要是ｌｇＧ，也有lgM、lgA和lgD，无器官特异性。抗核抗体的命名ＡＮＡ检测方法：ＨＥｐ－２＋灵长类肝组织冷冻切片，与血清中ＡＮＡ结合，再加入酶标抗人ｌｇＧ，复合物在荧光显微镜下观察。常见ＡＮＡ荧光染色模型均质型（H）：高滴度均质型主要见于SLE患者。颗粒型（S）：高滴度的颗粒型常见于MCTD，同时也见于SLE，硬化症、SS等。核膜型（M）：主要见于原发性胆汁性肝硬化。核仁型（N）：高滴度对诊断硬皮病具有一定特异性。常见自免的ＡＮＡ检出率抗ｄｓＤＮＡ抗体的检测与应用检测：绿蝇短膜虫为基质的ＩＩＦ法，高度特异性：虫

3、体动基体有环状ｄｓＤＮＡ，不含其他核抗原。意义：ＳＬＥ患者的特征性标志抗体，ＳＬＥ的重要诊断标准之一，该抗体参与ＳＬＥ的发病：形成多种冷沉淀而致血管炎，ＳＬＥ肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关，从而该抗体的滴度的动态测定可监控治疗。但ｄｓＤＮＡ抗体对ＳＬＥ的敏感性仅为３０％－５０％，ｄｓＤＮＡ抗体阴性不能排除ＳＬＥ的诊断。抗核小体抗体（ａｎｔｉｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅ　ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡｎｕＡ）的检测与应用。常用ＥＬＩＳＡ法凋亡细胞产生核小体，ＳＬＥ患者的吞噬细胞清除能力受损，导致核小体大量积聚，产生抗核小体抗体。ＡｎｕＡ更早出现，临床资料

4、显示，有１５％－１９％的抗ｄｓＤＮＡ抗体阴性的ＳＬＥ中ＡｎｕＡ阳性。抗ENA抗体谱的检测与应用抗ENA抗体谱：可提取核抗原抗体的总称。临床常检测的主要包括：抗Sm抗体：SLE标记性抗体（30%-40%阳性检出率）抗nRNP抗体：MCTD95%阳性检出率（高滴度）抗SSA/Ro、抗SSB/La抗体：SS阳性检出率分别为：70-80%和40%，抗SSB的特异性高于抗SSA。可达50-60%。抗Sc1-70抗体：几乎仅在PSS患者检出，在PSS的阳性检出率40%-60%抗Jo-1抗体：常见于多发性肌炎DM，检出率40-50%，在PM/DM检出率

5、25%，单独皮肌炎检出率不足10%抗ACA抗体：与局限性系统性硬化症有关，亦可见于原发性胆汁性肝硬化（PBC）免疫印迹技术：固相载体常为吸附有抗原的硝酸纤维膜。原理：ENA抗原经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，按分子量大小形成区带，经标准参照物确定每一抗原区带的分子量。然后转印至硝酸纤维薄膜上制成抗原吸附载体膜。血管炎相关的自身抗体检测与应用抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。是系统性血管炎的标志抗体。ANCA荧光染色型与靶抗原ANCA的临床应用类风湿性关节炎相关自身抗体的检测与应用RF：以变性lg

6、G的Fc段为靶抗原。常见的RF有lgM型、lgG、lgA和lgE型，除RA之外的疾病中RF滴度较低＜40IU/ml。1、lgM型＞80IU/ml并伴有严重关节功能障碍时通常提示患者预后不良。2、lgG型与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关，常伴随lgM型同时出现，在正常人及非RA患者中很难检出。3、lgA型与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。几种疾病RF的检出率抗角蛋白抗体AKA主要见于RA患者，阳性率为30-55%，特异性可达95%-99%。其他疾病中检出率极低。AKA是判断RA预后的一个标志性抗体，高滴度常提示

7、疾病较为严重，AKA与RF很少平行出现。抗环瓜氨酸肽抗体CCP：ELISA法检测。对RA的特异性为96%。在RA早期阶段就可测出，其特异性明显高于RF，抗CCP阳性者更容易发生关节损害。自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用常见自身免疫性肝病：自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎。1、抗平滑肌抗体ASMA：是自身免疫性肝炎AIH的血清学标志抗体。阳性率90%。高滴度1:1000时对AIH的特异性达100%。AIH患者主要为lgG型，而在PBC与AIH重叠时，常以lgG和lgM同时出现。2、抗肝肾微粒体抗体LKM-1和抗肝

8、细胞胞质抗体LC-1为2型AIH的特异性标志。3、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体（SLA/LP）是AIH的最特异标志，但阳性检出率只有10%-30%。但阳性预测值几乎为100%。4、抗线粒体抗体