hiv实验室诊断—医学课件

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1、HIV实验室诊断李珉珉暨南大学附属第一医院一、HIV的一些相关知识：1.HIV的结构2.HIV基因组成及结构3.HIV感染的免疫反应二、HIV的实验室检查1.实验室、人员及设备要求2.实验室检测3.职业暴露1.HIV的结构脂质膜蛋白酶整合酶P18gp120gp41RNA反转录酶P24核蛋白核衣壳(由微粒组成)2、HIV的基因分型HIV可分为两个型：HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ。(1)基因组成：Ⅰ:LTR-gag-pol-vif-vpr-tat-rev-vpu-env-nef-LTR.Ⅱ:LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-e

2、nv-nef-LTR.结构基因：gag、pol、env调节基因：tat、rev、nef、vif、vpu附属基因：vpr、vpxLTPgagLTPgagpolpolvprvifviftatvpurevenvrevrevrevtattattatenvLTPLTPvprvpxnetnet（2）基因结构：(3)两者的主要区别：①Ⅰ型含有vpu，而Ⅱ型含vpx。②vpr和nef与其他基因的关系也不同：AHIV-Ⅰ的vpr与vif相互重叠，而nef与env不重叠；BHIV-Ⅱ的vpr与vif不重叠，而nef与env相互重叠。(4)基因表达产物：HIV-ⅠHI

3、V-Ⅱenv：gp160gp120gp41gp140gp105gp36gag：p55p24p18p56p26p16pol：p65p51p31p68p53p343.HIV感染的免疫反应抗-gp41抗-p24p24HIV抗体初筛检测程序：样本选用初筛试剂初筛检测阳性反应阴性反应原有试剂＋另一种原理初筛试剂重复检测均呈阳性一阴一阳均呈阴性送确认阴性报告HIV抗体的检测：1.初筛试验方法及原理：（1）ELISA（2）明胶凝集试验（3）金标法（4）自动化仪器测定2.确证试验：免疫印迹法、间接免疫荧光法、免疫沉淀法(1)方法原理(2)确证试验结果判断：美国C

4、DC：gp160/gp120或p24/gp41任意二条带美国FDA：gp160/gp120或p24、gp41、p31三者组合WHO：至少二条以上env带美国红十字：gag、pol、env每组至少一条带中国：至少二条以上env带或一条env带和一条(gag)p24带。3注意事项(1)相关的政策和规定(2)临床操作中的注意事项(3)初筛与确证结果的差异及解释(4)医疗纠纷1、HIV-1持续流行：全球HIV流行和AIDS仍继续增加，尤其是MSM同性恋人群，多达50%HIV传播发生在疾病急性和早期，（流行病学意义）2、高病毒RNA水平：性传播感染仍具首位

5、，生殖道HIVRNA水平相当于血液中HIVRNA水平。高病毒载量、独特的病毒特性以及缺乏中和抗体，急性期感染者感染性极高。VL>10Mcopies/mm33、极易垂直传播：怀孕妇女感染HIV，增加HIV垂直传播的危险。2013年4月全国报告的HIV感染者（5560例）中，母婴传播占1.3%；AIDS病人（2806例）中，母婴传播占1.0%。为什么HIV急性感染（AHI）越来越受到重视？4、应尽早尽快进行诊断：HIV感染急性期，感染者无症状和流感样症状而经常漏检而误诊，感染者本人不知自己感染状态，极易在高危人群中传播5、应尽早进行人群干预：实时对感

6、染者及其配偶、孕妇感染者及其婴儿进行干预，知晓感染状态，减少危险性行为；了解和干预复杂的性传播网6、应尽早进行病毒干预：在AHI时期进行可能的干预以限制HIV复制和整合入病毒潜伏池、（整合后不可治愈），早期抗病毒治疗的必要性(转变观念)7、指导疫苗研究：基于急性期感染时期的传播性/奠基者病毒的特性8、建立人类自然模型：研究AHI个体，为详细了解人类HIV传播事件提供最好的机会为什么HIV急性感染（AHI）越来越受到重视？RNA+Ab-P24+Ab-血清阳转后的方法RNAp24Ab血清阳转抗体检测临界值特异性抗体比例时间反应指标感染血清阳转前的方法

7、怎样检测HIV-1早期感染?HIV血清阳转窗口期从感染HIV到抗体呈阳性反应这段时间血浆中含有高浓度HIVRNA有很高的传染性现在普遍认为2周～3个月,个别案例达6个月。HIV感染各种检测方法的窗口期HIVAb检测（第三代试剂）：窗口期约28天HIVAb/Ag联合检测（第四代试剂）：窗口期约15天核酸检测：窗口期约10天窗口期感染者的病毒学特征病毒载量值范围为3.84~6.84Log10Copies/mL；28例窗口期病例，病毒载量百万级有10份（35.71%）；十万级9份（32.14%）；万级的样品7份（25%）；万级以下的样品2份，占总样品数

8、的7.14%。HIV急性期感染或窗口期感染检测方法1.Ab/Ag联合检测:ELISA2.HIVRNA检测:集合PCRHIVAb/Ag联合