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1、尿液中检测HIV-1抗体进行男同性恋HIV病毒感染筛查的研究作者:宋丹 陶晓燕 蔡文德 魏安业【关键词】尿液摘要:目的:用酶联免疫吸附试验进行男同性恋者尿液中艾滋病病毒Ⅰ型抗体检测,并与血清学检测结果进行比较,探讨采用尿液检测HIV抗体进行特殊人群HIV感染筛查的可行性。方法:平行采集受检男同性恋者的外周静脉血及尿液标本,分别用血液和尿液ELISA法检测HIV抗体,阳性血清标本采用WB法确认。结果:检测109人,血清学检测结果3人阳性,并经WB实验确认为HIV病毒感染,尿液检测3人为阳性,与血清学实验对照,准确性为100%。结
2、论:尿液检测HIV-1抗体结果可靠,可作HIV病毒感染的筛查。关键词:男同性恋;酶联免疫吸附试验;艾滋病病毒Ⅰ型AnalysisofHIV-1AntibodyinUrineSamplesforMSMAIDSInfectionTestAbstract:Objective:TocomparetheconsistencyofresultofdetectingHIV-1antibodyinMSMurinesamplesandserumspecimensbyELISA.Method:Thegroupedurineandserumsamp
3、lesofMSMwerecollectedandHIV-1antibodiesinthemwerescreenedbyurineandserumELISAkits,respectively.Thepositiveserumspecimenswereretestedbywestern-blottest.Result:Ofthe10serumsamples,samplesshowedpositivereaction;Theresultswereconfirmedbywestern-blot.Ofthe10urinesamples,
4、showedpositivereaction.Theconsistencyoftestingresultswas100%.Conclusion:UrinespecimencanbeusedtoscreentheHIV-1antibody.Keywords:MSM;ELISA;HIV-1 目前,中国常用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血液中艾滋病病毒I型(HIV-1)抗体的方法筛查HIV感染者,采集标本时对病人造成针刺损伤,给被检者带来痛苦和不便,不利于标本的采集,给大规模特殊人群的筛查带来一定的困难,不利于预防工作的开展
5、。本研究引进尿液检测HIV抗体的方法,平行检测尿液、血液标本,以血液检测结果为对照,评估尿液检测结果的准确性,为开展人群HIV-1抗体筛查作出准备。 1材料与方法检测对象:采集深圳市各酒吧及娱乐场所中109名男同性恋并愿意接受HIV-1抗体检测者的尿液及静脉血,同一人的尿液标本及血液标本编号统一对应。尿液每份留8ml,转入一次性朔料试管封口后,保存于4℃。将静脉血离心后分离血清,转入一次性塑料试管封口保存于-20℃,待检。1.尿液检测方法:使用美国CalypteBiomedicalCorporation公司生产的Calypt
6、eTMHIV-1尿酶免疫试剂盒。检测严格按说明书操作。在550型酶标仪上判读,计算Cutoff值,判定结果。1.血液检测方法:采用北京金豪生物技术有限公司生产的血液HIV抗体ELISA试剂盒,按说明书操作。阳性血清标本用WB确证实验进行确诊。 2结果在收集的109份男同性恋的尿液标本中,经CalypteTMHIV-1尿酶免疫试剂ELISA方法检测,检测出3份标本为阳性,血清标本ELISA方法检测,3人为阳性,阳性标本经WB确认试剂检测,确认为HIV-1病毒感染。以血清学检测结果为准,尿液ELISA检测HIV-1抗体感染的准确
7、性及符合率为100%。深圳市男同性恋HIV-1病毒感染率为%。 讨论目前,中国最常用检测HIV抗体的方法是用ELISA法检测血液中的HIV抗体,并以蛋白印迹法(WB)加以确证。ELISA法的基本原理为免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物。用酶标记法检测样品时,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计、普通光学显微镜和电子显微镜观察结果。在ELISA检测中,酶的催化有放大作用,故这种技术特异性强,灵敏度高,半衰期较长。蛋白印迹试
8、验(WB)常用于鉴别抗特异抗原决定簇的抗体,敏感性和特异性均较其它方法高,本法现作为HIV感染的确诊实验。基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS-PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后将通过电泳转移技术转入硝酸纤维膜上。将此膜切割成条状,每条膜上均含有经电泳分离过