浅析儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用

浅析儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用

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时间:2018-09-28

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1、浅析儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用【摘要】目的探讨肺炎支原体咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应法和血清MP被动凝集法等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性。方法采用3种MP检测法对362例临床拟诊为呼吸道感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究,每个患儿取咽拭子做快速培养和PCR,同时取血清做MP-Ab检测,对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例,阳性率为%,病程为天;PCR法检测出阳性103例,阳性率为%

2、,病程为天;MP-Ab法检测出阳性127例,阳性率%,病程天。结论种MP检测法的敏感性与病程有相关性,临床医生应根据患儿病程选取检测方法,以提高阳性检出率和敏感性。【关键词】肺炎支原体;快速培养法;咽拭子聚合酶链反应;血清抗体;配对研究肺炎支原体是婴幼儿、青少年急性呼吸道感染的主要病原体之一,临床上大多数表现为呼吸道感染综合征,其中约3%~10%可发展为支原体肺炎。但只根据临床症状很难鉴别由MP或病毒、细菌等病原体引起的儿童呼吸道感染,给临床治疗带来一定的困难。笔者采用3种MP检测法对362例临床拟诊为呼

3、吸道感染患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究,通过病例回顾来探索对支原体肺炎敏感的实验室诊断方法,以协助临床准确做出诊治。1材料与方法对象收集湖南省儿童医院检验科XX年1月1日~9月30日在呼吸免疫科就诊住院患儿,有呼吸道感染症状,已经初诊为非细菌性感染的患儿362例作为研究对象,其中男175例,女187例;年龄为2个月~12岁,病程为1~90天。1.方法具体方法有:用MP快速培养法、PCR法和MP-Ab法等3种MP检测法对362例研究对象同时进行检测,记录结果。通过研究对象病历回顾统计MP感染的例数,并按

4、年龄、病程和3种MP检测法结果进行统计学分析。1.临床诊断MP感染的诊断标准按文献[1]、临床症状、体征标准,包括回顾性诊断——即患儿经红霉素治疗有效,经青霉素、头孢菌素治疗无效者等;以及实验室检查3种检测法至少有一种阳性。病程计算方法:以病历本记录为准,即在患儿开始有症状或体征时开始计算,到患儿来就诊检测时为止进行计算。快速培养法支原体分离鉴别培养液由珠海市浪峰生物技术有限公司提供。清晨患儿未洗漱前用咽拭子取咽部分泌物,严格按说明书进行,将咽拭子用无菌生理盐水处理,接种到预温的培养基中,3℃培养;培养基

5、液体颜色由紫红色变为草绿色或嫩绿色且清亮,并且在静置时,瓶底有蓝色颗粒或物质沉淀为阳性,5天后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为阴性。PCR法:试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。应用PCR法检测MP-DNA,严格按试剂盒说明书进行,以在紫外灯下出现180bp扩增带结果判为阳性。每次试验均设阳性、阴性对照,由专人进行操作,质量控制。MP-Ab法:试剂为日本瑞必欧株式会社MP-Ab检测试剂SERODIA-MYCOⅡ凝集试验试剂盒,严格按试剂盒说明书操作,抽取患儿静脉血ml,采用明胶颗粒被动凝集法,用

6、血清检测,结果以≥1∶40判断为阳性。每次试验均设未致敏明胶颗粒、致敏明胶颗粒和阳性、阴性血清进行测定。1.统计学方法计量资料用均数±标准差表示,各年龄组与3种检测方法结果比较用Spearman检验;各年龄组间确诊病例的阳性率比较用χ2检验;3种检测方法阳性结果与病程之间的比较用q检验。结果.1阳性样本经过回顾性诊断,在配对研究组362例研究对象中有152例符合MP感染的诊断标准,即有152例确诊病例,其中肺炎45例,支气管炎56例,上呼吸感染49例,支气管哮喘2例。MP快速培养法检测出78例阳性,PCR

7、法检测出103例阳性,MP-Ab法检测出127例阳性。.结果分析各确诊病例的年龄分布,见表1。表1显示儿童MP感染的年龄以3~4岁年龄段的病例最多,为46例,阳性率最高,为%,与其余年龄组段比较P。不同病程患儿3种检测法的检测结果,见表2,表2显示MP快速培养法为阳性的患儿病程均值较短为天,PCR法为阳性的患儿病程均值为天,MP-Ab法为阳性的患儿病程均值较长为天。3组之间两两比较,差异有统计学意义。表1不同年龄组MP感染确诊病例和3种检测方法结果对比分析注:△□代表与年龄组3~4岁组段比较结果表不同病程

8、患儿3种检测方法阳性结果对比分析注:△代表三组之间的两两比较讨论MP感染的临床表现常无特异性,临床的实际工作中,容易与一般病毒性感冒相混淆。在临床上患儿有下列症状:发热呈弛张热或不规则热。刺激性咳嗽非脓性痰,偶带血丝。可有咽痛、头痛、胸痛,全身症状比体征明显。肺部体征不典型而胸片炎症显著,可见云雾状大片阴影。WBC正常或升高。青霉素类、磺胺类抗生素治疗无效,改用或一开始用大环内酯类抗生素有效。实验室MP检验有1项或1项以上阳性

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