纸层析法分离叶绿体色素方法的优化

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1、论文题目：纸层析法分离叶绿体色素方法的优化摘要：由于在传统的分离叶绿体色素的方法中仍然存在着需要使用较多的有毒试剂，如丙酮、CCl4等，层析时间长，分离效果较差，色带分布不明显等问题，而且影响叶绿体色素层析实验效果主要有以下几个因素:（1）对材料的处理，（2）提取溶剂的选择，（3）层析剂的选择。可以通过逐一改变叶绿体色素的影响因素的方法来选取对叶绿体色素分离的优良方法，最终组成一个更好的分离方法，从而对提取和分离叶绿体色素的方法进行优化。关键字：叶绿体色素；提取；分离；层析；效果ITitle:paperchromatographymethodsofseparationofchloroplast

2、pigmentsOptimizationAbstract:Asinthetraditionalmethodofseparationofchloroplastpigmentsstillneedtousemoretoxicreagents,suchasacetone,CCl4solongchromatographytoseparatetheeffectoflessobviousissuessuchasthedistributionofribbonsandtheimpactofExperimentalresultschromatographyofchloroplastpigmentsmainlyin

3、thefollowingfactors:(1)ofthematerialhandling,(2)thechoiceofsolventextraction,(3)thechoiceofagentchromatography.Canbechangedbytheimpactofchloroplastpigmentfactorstoselectthemethodofseparationofchloroplastpigmentsofexcellentmethods,andultimatelytheformationofabetterseparationmethod,whichchloroplastpig

4、mentextractionandseparationmethodstooptimize.Keywords:Chloroplastpigment;extraction;separation;chromatography;effectI目录摘要IAbstractII1引言12研究方法12.1材料的处理方法12.2提取液的选择12.3层析液的选择13实验过程13.1选择最优的材料处理方法23.1.1制备叶绿体色素提取液23.1.2点样及做纸捻23.1.3层析23.1.4结果23.2选择最优的提取液23.3选择最适的层析液34讨论34.1从材料处理方面：34.2从提取液方面34.3从层析液方面分析4

5、4.4注意事项45结论46结束语5参考文献6致谢7I1引言叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要有叶绿素a（chla）、叶绿素b（chlb）、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离叶绿体色素是对其认识和了解的前提。分离色素的方法有多种，如纸层析、柱层析等，纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时，由于混合色素中各种成分在两相（即流动相和固定相）间具有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的各种成分得到分离[1]。但是，在使用传统方法提取和分离色素的过程中，仍然存在着使用较多的有毒试剂，如丙酮、CCl4等，层析时间长，分离效果较差，色带分布不明显等不

6、足之处，。所以，本文针对上述的缺点从材料的处理方法、提取液与层析液的选择等方面对提取和分离叶绿体色素的方法进行优化。2研究方法由于影响叶绿体色素层析实验效果主要有以下几个因素：对材料的处理、提取溶剂的选择、层析剂的选择[2]。所以，可以通过逐一改变其影响因素（其他的和对照组相同）的方法分别测出在这三个因素方面的最优良做法，组成一个优化后的分离方法。 2.1材料的处理方法称取新鲜、去大叶脉的菠菜叶，按2g/组分三组，分别对这三组材料做一下处理：（1）不处理（对照组）（2）投入电炉上加热至沸的水中（30s-40s）后，立即放入冷水中（数秒），捞出后用吸水纸吸干水分[3]（3）在烘箱内(48℃)烘干

7、约半小时[4]2.2提取液的选择（1）丙酮（对照）（2）乙醇[5]（3）丙酮+石油醚（2滴）（4）乙醇+石油醚（2滴）[6]每种提取液的总用量均为10mL2.3层析液的选择（1）CCl4+无水Na2SO4(对照)（2）石油醚+CCl4（1/2）（3）石油醚+苯（3/1）（4）石油醚+苯（2/1）第7页共7页3实验过程3.1选择最优的材料处理方法3.1.1制备叶绿体色素提取液称取去大叶脉的菠菜叶，按