苦菜中多糖类物质抗便秘作用机理研究

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1、苦菜中多糖类物质抗便秘作用机理研究温州人的习俗课题的由来一、前言二、材料与方法三、结果与讨论四、结论前言便秘现状:英国10%美国男性占总人口8%女性20.8%日本男性9.1%女性23.5%我国老年人(于普林等,2001年中华老年医学杂志)平均11.5%最高19.5%一、前言1.Ratnaike,R.N.1997年报道便秘和腹泻交替出现2.Ramesh,1998年;Daeninck1999年报道使用鸦征样物质会导致便秘3.Boige1999年报道儿童的功能性便秘会引起大便失禁4.Amanda2001年

2、报道了膳食纤维的摄入、便秘与静脉曲张的关系5.Shimotoyome2000年报道便秘会诱发结肠癌便秘与许多疾病有关苦菜,学名败酱草(Patriniavillosa(PV),为败酱科植物。在我国分布很广,在浙江省永嘉县苦菜已人工栽培成功,目前有2500余亩,平均亩产4000多千克,亩产最高可达6000千克,年总产达万吨以上。苦菜的研究现状化学成分吕扬等,1997.药学学报,白花败酱醇甙结构的修正齐墩果胴酸的分离鉴定药理研究王瑞俭等,1997.长春中医学院学报,黄花败酱的药理研究与临床应用营养成分仲山

3、民等,1999中国野生植物资源,野生败酱的营养成分分析对便秘的研究还未见报道研究基础二、材料与方法材料:1.柑桔皮果胶(购买)2.苦菜多糖(提取)提取方法参见(朱加进.农业工程学报2002,第一期)3.苦菜果胶(提取,待刊)4.椪柑皮果胶(提取)5.NIH品系小鼠灌胃液:①苦菜果胶,按5%苦菜果胶,10%阿拉伯胶,5%墨汁与水混合而成;②苦菜多糖,按5%苦菜多糖,10%阿拉伯胶,5%墨汁与水混合而成;③柑桔果胶(同上)④椪柑皮果胶(同上)⑤空白对照组:按10%阿拉伯胶,5%墨汁与生理盐水混合而成。方

4、法:黑便排出时间和排便频度实验原理:用含有指示剂的抗便秘药给动物灌服,观察抗便秘药的起效时间)(即排出含指示剂粪便的时间),粪便性状,排便数量,并与对照组相互比较,判断抗便秘药的药效。取禁食20小时的体重相近的小鼠50只(腹泻者剔除),随机分成5组,苦味酸标记。各组分别灌服上述5种墨汁混悬液(0.2ml/10g)。各鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行观察,记录小鼠排黑便的时间、粪便性状和数目,以及粪便沾染肛门情况。连续观察6小时,每组取平均值进行比较。小肠推进实验:原理:以墨汁为标记的抗便秘药给动物灌服,

5、观察色素在肠道推进的距离,反映抗便秘药对肠道运动的影响。方法:取禁食24小时的体重相近的小鼠50只,随机分成5组,每组10只,用苦味酸标记。分别用上述5种墨汁液0.2ml/10g体重灌胃。给药后30分钟脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部的肠管,置于托盘上。轻轻地将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至墨汁前沿的距离作为“墨汁在肠内推进距离”。用公式计算墨汁的推进百分率。墨汁推进率(%)=墨汁在肠内的推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100%三、结果与讨论苦

6、菜果胶、苦菜多糖,椪柑果胶的得率:苦菜多糖提取的最佳工艺条件(料液比1∶20、提取温度100℃、提取时间4小时)经L9(33)正交试验而获得,此时得率为2.58%,苦菜果胶得率为6.33%比椪柑果胶得率(5.86%)还高,说明苦菜含有较多的多糖类物质。不同处理对小鼠排便时间的影响表1柑桔、椪柑、苦菜果胶及苦菜多糖对小鼠排粪便的影响(x±SD,n=10)处理开始排黑粪时间/min6小时内排黑便次数黑便性状生理盐水206.5±42.33.8±1.8干燥成形苦菜果胶230.3±39.52.9±1.0湿润成

7、形苦菜多糖195.0±35.63.2±1.9湿润成形柑桔果胶158.9±64.35.9±2.6湿润成形椪柑果胶191.6±55.53.7±2.1湿润成形表2不同处理间排便时间差异显著性SSR检验处理5%显著水平1%极显著水平苦菜果胶aA生理盐水bB苦菜多糖bcB椪柑果胶cB柑桔果胶dC从表1和表2的Duncan’s新复极差测验的多重比较结果表明:苦菜果胶开始排黑便时间最长,和其他任何一组都存在极显著差异(P<0.01),并且比空白对照组(生理盐水)时间还长,说明了良好的抗腹泻能力,然而从表1和表3还

8、可以进一步看出苦菜果胶在6小时内的排黑便次数明显少于其他各组(P<0.01)因此与上述结论一致,尤其应该指出的是,虽然都是果胶物质,但它与椪柑果胶和柑桔果胶存在极显著差异(P<0.01)。表3不同处理间6小时内排便次数差异显著性SSR检验处理5%显著水平1%极显著水平柑桔果胶aA椪柑果胶bB生理盐水bB苦菜多糖cBC苦菜果胶cC服用苦菜多糖的小鼠开始排黑便时间比服用生理盐水和苦菜果胶组的时间短,与服用生理盐水组无显著性差异(P>0.05);而比椪柑果胶和柑桔果胶开始排

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