革兰阴性球菌课件

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1、第九章革兰阴性球菌奈瑟菌属（Neisseria）奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛。人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，在奈瑟菌属10个种中，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌DNA序列有70％的同源性，其余8个种视为条件致病菌。主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎奈瑟菌有多糖成分。第一节脑膜炎奈瑟菌N.meningitismeningococcus1.脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌（N.

2、meningitidis）简称为脑膜炎球菌（meningococcus），是流行性脑膜炎（简称流脑）的病原菌。脑膜炎奈瑟菌1.1生物学性状——形态脑膜炎奈瑟菌纯培养的镜下形态（革兰染色）脑膜炎奈瑟菌为革兰染色阴性，常呈双排列，直径约为0.6-0.8μm的双球菌。单个菌体呈肾形或豆形。成双排列时，两个凹面相对。无鞭毛，不形成芽胞。新分离菌株大多有荚膜和菌毛。在脑脊液(CSF)直接涂片中，常位于中性粒细胞内外。1.1生物学性状——培养专性需氧，但在5%~10%CO2条件下生长最佳。营养要求高，需血液

3、血清，最常用巧克力平板。形成光滑透明“露滴样”菌落。可产生自溶酶，需及时转种，培养物如不及时转种，超过48h可死亡。巧克力平板：成分：普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），氯化血红素，万古霉素（多粘菌素），辅酶A制法：取所需要量的普通营养琼脂，加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至60度左右加入一定量的羊血，置85度水浴中摇动10-15分钟，冷却到50度左右后加入相应量的万古霉素和辅酶A，摇匀后倾注平板。用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，在分离培养基上

4、具有重要意义。血液中有V、X因子是位于红细胞中的，一般细菌不能利用，轻微的加热使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。脑膜炎奈瑟菌在巧克力琼脂平板上的菌落特征脑膜炎奈瑟菌在巧克力平板上形成圆形、凸起、湿润、光滑、透明露滴状菌落。血平板：成分：普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），脱纤维羊血制法：取所需要量的普通营养琼脂，加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至50度，加入一定量（5%）羊血，倾注平板。用途：适于各类细菌的生长。脑膜炎奈瑟菌在血琼脂平板上的菌落特征脑膜炎奈瑟菌在培养基上形成圆形隆起、表面有光泽、透明或

5、半透明、直径约1mm～5mm的露滴样粘液型菌落。无色素形成。血平板上无溶血现象。1.1生物学性状——生化反应可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，48h后菌体自溶。大多数脑膜炎奈瑟菌分解葡萄糖和麦芽糖，产酸，不产气。氧化酶和触酶实验阳性。1.1生物学性状——抗原构造根据荚膜多糖抗原不同，分为13个血清群。目前我国流行的血清群，95%以上A群，B群次之，C群较少见，但致病力最强。1.1生物学性状——抵抗力很弱：对干燥、热力、化学因素敏感，室温3h即死亡。各种消毒剂敏感。1.1生物学性状——致病性及

6、免疫性致病物质荚膜（抗吞噬作用，增强细菌侵袭力）菌毛（黏附细胞表面，利于进一步侵袭）内毒素（主要致病物质）所致疾病流行性脑膜炎（简称流脑）人类是唯一的易感宿主，常存在于患者或带菌者的鼻咽腔黏膜中，主要通过飞沫直接从空气中传播。致病机制目前尚未完全清楚。免疫性6月～2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群1.2.1标本采集与分离培养1.病人脑脊液、血液和出血点渗出液的分离培养脑脊液离心取上清液检测脑膜炎奈瑟菌特异抗原，沉淀物直接接种巧克力琼脂平板，5%CO2，37℃培养，同时直接染色镜检。病人急性期静

7、脉血用葡萄糖血清肉汤增菌，5%CO2，37℃培养24-72h。每日从肉汤培养物中取样分离培养，余下的血液分离血清检查抗原和抗体效价，病人恢复期血液血清也检测抗体效价。新鲜出血点渗出物接种巧克力平板，同时直接染色镜检。2.健康者咽拭子的分离培养咽拭子直接接种含多粘菌素B和万古霉素的巧克力平板。1.2.2脑膜炎奈瑟菌的鉴定生化鉴定（光滑露珠样菌落）氧化酶：+DNA酶：-营养琼脂生长：-葡萄糖：+麦芽糖：+氧化酶又名细胞色素氧化酶(C)、或呼吸酶。原理：氧化酶在有分子氧或细胞色素C存在时，可氧化四甲基

8、对苯撑二胺出现紫色反应。用于检测细菌是否有该酶的存在。细菌在与试剂接触10秒内呈紫红色，为阳性。氧化酶实验(oxidasetest)1.3鉴定标准1.菌体和菌落特征典型。2.生化反应为分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。3.普通培养基上不生长。4.能与脑膜炎球菌分群诊断血清发生凝集反应。1.4防治原则综合性预防措施隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风流脑疫苗：6个月-2岁接种两次，间隔1月A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗青霉素、磺胺大剂量治疗脑膜炎接种第二节淋病奈瑟菌Gonococcus淋病奈瑟