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时间:2018-09-21
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1、细菌的生理本章重点与难点细菌的生长繁殖:了解细菌的繁殖方式和速度,掌握细菌的生长繁殖的条件。细菌的人工培养:熟悉培养基的定义及种类,熟悉细菌在人工培养基中的生长情况,掌握细菌菌落概念及意义。3.细菌的代谢产物及其实际意义:了解分解产物及其在细菌鉴别上的意义,掌握与医学有关的合成代谢产物的种类及意义。(一)细菌的化学组成水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质和核酸等(二)细菌的物理性状带电现象:G+pI为2~3、G-pI为4~5表面积大:较一般生物体大一万倍光学性质:半透明颗粒(透射、折射)半透性:CW、CM选择性通透内部渗透压高:G+20~25个大气压G-5
2、~6个大气压一、细菌的化学组成和物理性状营养物质水碳源(糖)氮源(氨基酸蛋白胨)无机盐生长因子重要溶剂菌体成分能源菌体成分原料必须外界补充菌体及酶的组分能量储存及转运调节渗透压与繁殖及致病相关二.细菌的营养物质三.影响细菌生长的因素(二)细菌繁殖的方式与速度细菌个体的生长繁殖二分裂繁殖细菌的生长曲线细菌数目的对数培养时间(小时)510152025306.06.57.07.58.08.59.0活菌数总菌数迟缓期对数生长期稳定期衰退期第二节细菌的人工培养一、培养基概念:培养基是用人工方法将多种营养物质按照各类微生物生长的需要而合成的一种混合养料。任何培养基
3、都应该具备微生物生长所需要六大营养要素:碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成,必须立即进行灭菌处理高压蒸汽灭菌按物理状态不同划分固体培养基液体培养基在液体培养基中加入一定量凝固剂,使其成为固体状态,琼脂含量一般为1.5%-2.0%琼脂含量一般为0.2%-0.7%不加任何凝固剂半固体培养基固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定用于增菌,大规模工业生产及在实验室进行微生物的研究培养基的分类:固体培养基半固体培养基液体培养基按用途不同划分基础培养基鉴别培养基含有一般微生物生
4、长繁殖所需的基本营养物。比如肉汤培养基。选择培养基利用细菌代谢产物不同而使指示剂显色反应不同的原理,鉴别和鉴定细菌。如麦糠凯琼脂培养基。营养培养基在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。如SS琼脂培养基。在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如血琼脂培养基。特殊培养基如厌氧培养基。用于厌氧菌的培养。表面生长沉淀生长混浊生长液体培养基上生长现象固体琼脂平板上菌落菌苔EMB琼脂平板上大肠菌菌落具有金属光泽SS琼脂平板上大肠杆菌为
5、粉红菌落分解代谢:营养物质分解和转化为能量的过程合成代谢:几种简单的前体+能量用于细胞组分的合成细菌新陈代谢包括分解代谢与合成代谢第三节细菌的代谢产物及意义一、分解代谢产物及其意义细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同,因而代谢产物各异,利用生物化学方法鉴别不同细菌称为细菌的生化反应。1.糖发酵实验不同细菌对糖的分解利用能力存在较大差异,且产物不同,是常用的鉴别微生物的生化方法。有些细菌能分解某种糖产生有机酸和气体;有些细菌只产酸不产气。若产酸,可根据培养基特定的酸碱指示剂的特征性的颜色变化检测;若产气,可从培养基中的杜氏小管中是否有气泡观测。2.VP实验某
6、些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。大肠埃希菌v-p试验阴性,产气肠杆菌v-p试验阳性。3.甲基红实验某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可进一步分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH降至4.5以下,当加入甲基红试剂则呈红色,为甲基红试验阳性。若细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其他物质(如醇、酮、醚、气体和水等),则培养基的酸度仍在pH5.4以上,故加入甲基红指示剂呈黄
7、色,是为阴性。4.枸橼酸盐利用实验以枸橼酸钠为唯一碳源、PH值7.0的培养基上,产气杆菌分解枸橼酸钠产生碳酸盐,使培养基由中性变为碱性,培养基中指示剂溴麝香草酚蓝(BTB)由浅绿色变为深蓝色,此为枸橼酸盐利用试验阳性。大肠杆菌因不能利用枸橼酸盐,此试验为阴性反应。(二)蛋白质的分解代谢产物及其意义1.吲哚实验吲哚试验是用于检测吲哚的产生,某些细菌可产生色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸。对二甲基氨基苯甲醛遇吲哚形成玫瑰吲哚(红色)2.硫化氢实验硫化氢试验检测硫化氢的产生,细菌分解含硫有机化合物如半胱氨酸等产生硫化氢,硫化氢遇培养基中的铅盐或铁
8、盐等形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀。IMViC试验I:吲哚试验M:甲基红试验Vi:VP试验C:枸
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