响应面法优化大麦幼苗抗氧化物提取工艺

《响应面法优化大麦幼苗抗氧化物提取工艺》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、响应面法优化大麦幼苗抗氧化物提取工艺单媛媛，胡筱波*（华中农业大学食品科技学院，武汉，430070）摘要：研究了大麦幼苗抗氧化物的提取工艺。在提取溶剂、提取时间、提取温度、pH值、料液比五个单因素试验的基础上，根据Box-Behnken中心组合试验设计原理，选取提取溶剂、提取时间和pH值3个因素的3个水平进行响应面分析，建立了·OH消除率的二次回归方程，到提取工艺的优化组合条件。实验结果表明，大麦幼苗抗氧化物提取的最优工艺条件为：提取溶剂80%乙醇，时间4h，温度20℃，pH值3，料液比1:8。在此条件

2、下提取物对·OH的清除率达94.7%。关键词：大麦幼苗；抗氧化物；提取；响应面分析中图分类号：　　文献标识码：A　　文章编号：0引言近年来的研究表明，人体的衰老与自由基导致的氧化密切相关，许多学者认为具有清除自由基能力的物质将对人体的衰老起到良好的抑制和延缓作用[1-2]。而目前人们对一些合成抗氧化剂的安全性提出了质疑，许多国家已限制或停止使用。从植物中提取的天然抗氧化剂由于安全、无毒等优点而受到人们的欢迎。因此以天然植物抗氧化剂替代合成抗氧化剂是今后食品工业发展的趋势，同时从天然植物中寻找清除体内自由

3、基的物质也是现代医药、保健行业的发展趋势。大麦(Hordeumvulgare，L)属于禾本科大麦属单子叶植物[3]，其幼苗中富含SOD、天然维生素和黄酮等多种生物活性物质，具有很强的抗氧化性及清除自由基的功能[4-7]。大麦幼苗中含有多种抗氧化生物活性物质，可用提取出来用于食品添加剂，还可用于抗衰老等许多疾病的预防和治疗，也可以应用于美白护肤产品的研究和开，目前有关这方面的研究还未见报道。我们以大麦幼苗为原料，利用响应面分析法对抗氧化物的提取工艺条件进行研究，以期为大麦幼苗抗氧化物的开发和利用提供理论基

4、础。1材料与方法1.1试验材料华2627品种大麦由华中农业大学植物科技学院提供，常规播种，于华中农业大学校内种植，幼苗高度为5～10cm时采取。1.2试验方法1.2.1单因素提取实验1.2.1.1不同溶剂的大麦幼苗提取物（简写为EBS，下同）清除·OH效果的影响准确称取大麦幼苗各1.0g，分别用无水乙醇、80％、60％、40％、20％的乙醇溶液各20mL在室温下提取5h，过滤后定容到25mL，测定提取液·OH清除率，从而确定最佳提取溶剂。1.2.1.2不同提取时间对EBS清除·OH效果的影响准确称取幼苗

5、各1.0g，分别用80%乙醇20mL分别在室温下提取1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h，过滤后定容到25mL，测定提取液·OH清除率，从而确定最佳提取时间。1.2.1.3不同提取温度对EBS清除·OH效果的影响准确称取幼苗1.0g，分别用80%乙醇20mL在0℃、20℃、40℃、60℃、80℃下提取5h，过滤后定容到25mL，测定提取液·OH清除率，从而确定最佳提取温度。作者简介：单嫒嫒（1985-），女（汉），硕士，研究方向：*通讯作者：胡筱波，女，博士，副教授。1.2.1.4不同料液比对EBS

6、清除·OH效果的影响准确称取幼苗各1.0g，分别用1mL、3mL、6mL、9mL、12mL80%的乙醇分别在室温下提取5h，过滤后定容到25mL，测定提取液·OH清除率，从而确定最佳料液比。1.2.1.5不同pH值对EBS清除·OH效果的影响准确称取幼苗各1.0g，分别用20mLpH值为1、3、5、7、9的80%乙醇，在室温下提取5h，过滤定容到25mL，测定提取液·OH清除率，从而确定最佳提取pH。1.2.2中心组合试验设计参考单因素实验结果，以提取溶剂、提取温度及pH值三个因素为自变量，以·OH清除

7、率为响应值，根据BOX中心组合设计原理[8]，设计三因素三水平响应面分析试验[9]，因素取值见表1。表1大麦幼苗抗氧化物提取中心组合试验因素水平表Tab.1Factorsandlevelstableofcentralcompositedesign水平因素X1（%）X2（℃）X3-110001080203160405注：X1表示乙醇体积分数；X2表示温度；X3表示pH值试验共15个实验点，其中12个为分析因子，三个为零点，零点实验进行三次，以估计误差，实验以随机方式进行，重复三次。实验数据采用SAS软件R

8、EREG程序进行分析处理，由此得出响应面分析图和方差分析表。1.2.3·OH清除率的测定据Fenton方法产生·OH的模型，参考杨容等[10]、RONGTSAO[11]等方法加以改进，在10mL的比色管中依次移取1mmol/L硫酸亚铁溶液2mL和3mmol/L双氧水溶液2mL，混合均匀后加3mmol/L水杨酸溶液2mL和2mL蒸馏水。在(37±0.1)℃的恒温水中反应30min后，在510nm的波长下测A0值。同时以同样的方法测定以样品代替